룩아웃 Mycoplasma PCR 탐지 키트는 세포 문화와 생체를 파생 다른 세포 배양에서 Mycoplasma Acholeplasma, 그리고 Ureaplasma 오염의 검출에 높은 민감도에 대한 선택의 방법으로 설립되는 효소의 연쇄 반응 (PCR)을 사용합니다.
오염없는 세포 라인의 유지 보수 세포 기반 연구하는 것이 필수적입니다. 가장 큰 오염 문제 중 mycoplasma 오염 수 있습니다. 일반적으로 오염된 세포를 mycoplasma 죽이지 아니지만, 그들이 감지하기 어려울 수 있으며 변경 신진 대사를 포함하여 교양 세포에 효과 다양한 발생할 수, 증식 및 염색체 aberrations가 둔화. 즉, mycoplasma 오염은 생명 과학 연구에 대한 정확한 자료를 제공하는 이들 세포 라인의 가치를 타협.
실험실에서 mycoplasma 오염의 원인은 매우 완벽하게 제어하는 도전입니다. 특정 mycoplasma 수종은 인간의 피부에 발견으로, 그들은 가난한 무균 기술을 통해 도입하실 수 있습니다. 또한, 그들은 이러한 태아 소 혈청으로 오염된 보충제에서 온 수 있으며, 가장 중요한 기타 오염된 세포 문화. 일단 mycoplasma가 문화를 오염, 빨리 연구실의 다른 영역을 오염으로 확산될 수 있습니다. 좋은 무균 기술로 좋은 실험실 관행에 엄격한 준수가 핵심이며, mycoplasma에 대한 정기 검사는 높은 mycoplasma 오염의 성공적인 제어를위한 권장합니다.
mycoplasma의 PCR 기반의 감지는 일상적인 세포 라인 유지 보수를 위해 매우 인기있는 방법이되었습니다. PCR 기반의 탐지 방법은 매우 민감하고 연구자들이 미생물 기술을 사용하여 필요한 그것이 시간에 비해 감지되면 오염을 분리 및 제거에 신속하게 대응할 수 있도록 신속한 결과를 제공할 수 있습니다. 룩아웃 Mycoplasma PCR 탐지 키트 μl 당 겨우 2 genomes의 검출 한도, 매우 민감합니다. 매우 구체적인 Jumpstart는 DNA 형성 촉매의 DNA 중합 효소와 독점적인 프라이머 설계의 이점 복용, 잘못된 반응을 획기적으로 줄일 수 있습니다. 편리한 8 튜브 형식은, dNTPs 사전 – 코팅 및 관련 primers 스트립은 세포 라인의 큰 컬렉션과 함께 고객의 요구를 충족하기 위해 처리량을 높일 수 있습니다.
키트의 극단적인 감도 감안할 때, 큰주의가 샘플 및 시약의 실수로 오염을 방지하기 위해 이동해야합니다. 우리가 보여주는 단계별로 프로토콜은 신뢰할 수있는 mycoplasma 감지에 필요한주의 사항과 관행을 강조 표시합니다. 우리는 또한 표시하고 전형적인 결과와 자신의 해석을 논의합니다. 우리의 목표는 룩아웃 Mycoplasma PCR 감지 키트를 사용하여 연구의 성공을 보장하는 것입니다.
때문에 키트의 극단적인 감성, 정확하게 수행하면 키트 샘플은 mycoplasma 오염을 가지고 있는지 여부를 나타내는 정확한 결과를 얻을 수 있습니다. 키트의 Jumpstart DNA 형성 촉매의 DNA 중합 효소와 함께 사용하기위한 최적화되었습니다. 기타 taqs는 샘플을 준비할 때 사용할 수 있지만 481 BP의 내부 통제 밴드는 대체 DNA 형성 촉매의 적절한 민감도를 나타내기 위해 존재해야합니다. 긍정적인 밴드가 오염의 수준에 따라 다양한 밀도를 전시하는 것은이 가능합니다. 많이 오염된 샘플에 대한 내부 통제 대역의 부재를 관찰하는 것이 가능합니다. 오염을 방지하기 위해 샘플을 준비 때는 주의해야하며 적절한 기술을 사용하면 적절한위한 열쇠입니다. 룩아웃 Mycoplasma PCR 감지 키트를 사용하여 감지.
The authors have nothing to disclose.
시그마 – 알드리치에 의해 투자
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
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LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit | Sigma-Aldrich | MP0035 | |
JumpStart Taq DNA Polymerase | Sigma-Aldrich | D9307 | |
GenElute Blood Genomic DNA kit | Sigma-Aldrich | MP0030 | |
Nunc amplification tubes | Sigma-Aldrich | T0447 |