Dieses Video zeigt ein Modell zur Entwicklung von Intimahyperplasie nach der Entfaltung des Stents unter Verwendung einer menschlichen Gefäß (IMA) in einem immundefizienten Rattenmodell zu untersuchen.
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Methodenartikel
Menschliche Arteria mammaria interna (IMA) Transplantation und Stenting: A Human Model um die Entwicklung von In-Stent Restenose Studie
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Präklinische Forschung in vivo Modelle zu pathobiologischen und pathophysiologischen Prozessen in der Entwicklung der Intimahyperplasie nach Gefäß-Stents zu untersuchen sind entscheidend für translationale Ansätze 1,2.
Die am häufigsten verwendeten Tiermodelle gehören Mäuse, Ratten, Kaninchen, Schweine und 3-5. Allerdings bleibt die Übersetzung dieser Modelle in den klinischen Alltag schwierig, da diese biologischen Prozesse bereits in der Tier-Gefäße untersucht werden, aber nie in der menschlichen Forschung Modelle 6,7 durchgeführt. In diesem Video zeigen wir einen neuen humanisierten Modell, um diese Lücke zu überwinden translationale. Das gezeigte Verfahren ist reproduzierbar, einfach und schnell durchzuführen und geeignet ist, die Entwicklung von Intimahyperplasie und die Anwendbarkeit von verschiedenen Stents zu studieren.
Dieses Video zeigt, wie die Stent-Technik in der menschlichen Gefäße durch Transplantation in immundefizienten Ratten folgten durchzuführen, undbezeichnet die Herkunft von proliferierenden Zellen als Menschen.
Protokoll
1. Arteria mammaria interna (IMA) Vorbereitung
- Die arterielle Endothel wird durch die Passage eines 2-Französisch Fogarty arteriellen Embolektomie Katheter (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA) entblößt. Der Katheter wird durch das ganze Schiff Länge gezogen zweimal zu Endothelschädigung zu gewährleisten.
- Verwenden Sie eine beliebige menschliche Stent 8mm Länge und 2,5 mm-3 mm Durchmesser (zB Translumina, Yukon Stent). ACHTUNG: Der Durchmesser des Stents sollte nicht mehr als die Gefäßdurchmesser um mehr als 10% auf Pre-und Post-Stent-Stenose zu vermeiden. ACHTUNG: Schalten Sie nicht die Länge des Stents innerhalb der gleichen Studie.
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Diskussion
Obwohl verschiedene In-vivo-Forschung werden bestehende Modelle, die Entwicklung der Intimahyperplasie nach Stentimplantation zu untersuchen, diese Modelle noch immer vor translationale Hürden zu überwinden. Darüber hinaus sind Großtiermodellen teure und spezielle Haltungsbedingungen sowie chirurgische Geräte ist nicht für alle Laboratorien zur Verfügung.
Mit Hilfe eines menschlichen IMA, um die Entwicklung der menschlichen Intimaproliferation und In-Stent Restenose zu studieren wur.......
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Offenlegungen
Keine Interessenskonflikte erklärt.
Danksagungen
Die Autoren danken Christiane Pahrmann für ihren Beitrag. Besonderer Dank geht an Ethicon, Norderstedt, Hamburg (Deutschland) für die Bereitstellung des Nahtmaterial.
Finanzierung
Sonja Schrepfer hat ein Forschungsstipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 und SCHR992/4-1) erhalten haben.] Die Arbeit wurde von der ISHLT Shumway Career Development Grant 2010 und der Falk-Forschungsförderung (Stanford University) unterstützt.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Name des Reagenzes | Firma | Katalog-Nummer | Kommentare |
| 2 Französisch Fogarty-Katheter | Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA | 120602F | |
| Yukon-Stent | Translumina GmbH, Hechingen, Deutschland | Verwenden Sie den Stent Ihrer Wahl nach Ihren Studienprotokoll | |
| RPMI-Medium | Biochrom | Nr.F1275 | |
| Heparin | Baxter | 2B0953 | |
| Isofluran | Abt | B506 | |
| Provo-Jod | Betadine Puredue Pharma | EAN: 5995327165830 | |
| 80% Ethanol | Geyer | ETV 80/0500 | |
| Micro Klemme | Harvard Apparatus | PY2-61 bis 0186 | |
| Nahtmaterial 8-0 | Johnson & Johnson, | 2808G | |
| Nahtmaterial 6-0 | Johnson & Johnson, | 1698 H | |
| Carprofen | Feizer Vet | PZN: 0110208 | |
| Metamizol | Ratiopharm | ||
| Target Retrieval Solution, pH 9 | Dako | S2368 | |
| Bild-iT FX Signal Enhancer | Invitrogen | I36933 | |
| monoklonalen Maus-Anti-GFP-Antikörper | BD Living Colors | 632381 | |
| Primärantikörper Verdünnungsmittel | Dako | S3022 | |
| Ziege-anti-Maus-IgG, Alexa Fluor 488 | Invitrogen | A11017 | |
| sekundären Antikörper Verdünnungsmittel | Dako | S0809 | |
| Kaninchen polyklonale anti-smooth muscle α-Aktin | Abcam, | ab5694 | |
| Ziege-Anti-Kaninchen-IgG, Alexa 555 | Invitrogen | A21430 | |
| Verlängern Sie Gold-Reagenz antifade | Invitrogen | P36930 |
Referenzen
- Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346(2009).
- Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput....
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Nachdrucke und Genehmigungen
