एक माउस मॉडल में ग्लियोब्लास्टोमा के लिए चिकित्सीय स्टेम कोशिकाओं के इंट्रानेसल वितरण
Summary
स्टेम कोशिकाओं ने अपने आंतरिक ट्यूमर ट्रिपिज्म के कारण ब्रेन ट्यूमर के इलाज के लिए चिकित्सीय वाहक का वादा किया है। गैर-इनवेसिव इंट्रानेसल स्टेम सेल डिलीवरी रक्त मस्तिष्क की बाधा को छोड़कर और नैदानिक अनुवाद के लिए मजबूत क्षमता को दर्शाता है। यह आलेख ग्लिओमा के माउस मॉडल में इंट्रानैसल स्टेम सेल डिलीवरी के बुनियादी सिद्धांतों का सारांश देता है।
Abstract
मस्तिष्क की दुर्दमताओं के प्रति आंतरिक उष्णकटिबंधीय स्टेम कोशिकाओं को घातक ट्यूमर के खिलाफ चिकित्सकीय एजेंटों के वादे के रूप में पेश करता है। इन्ट्रैकैनल रूट के माध्यम से चिकित्सीय स्टेम कोशिकाओं की डिलीवरी एक हाल ही में खोजी हुई वैकल्पिक रणनीति है, जो कि नैदानिक अनुवाद की मजबूत क्षमता के साथ होती है, क्योंकि इसकी नस-आक्रामक प्रकृति के कारण इंट्राकैर्नियल आरोपण या प्रणालीगत मार्गों के माध्यम से वितरण। रक्त मस्तिष्क की बाधा की कमी से आगे स्टेम कोशिकाओं की चिकित्सीय क्षमता को इंट्रानेलिस ब्रेन एंट्री से गुजरती है। यह लेख हमारे अध्ययनों में उपयोग की जाने वाली आवश्यक तकनीकों का सारांश देता है और इंट्राक्रानियल ग्लिमा xenografts के एक माउस मॉडल का उपयोग करके स्टेम सेल डिलीवरी के लिए इंट्रानेशल रणनीति के बुनियादी सिद्धांतों की रूपरेखा करता है। हम अनुकूलित प्रक्रियाओं का प्रदर्शन करते हैं जो विशिष्ट पूर्वनिर्धारित प्रायोगिक मापदंडों के साथ सुसंगत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम उत्पन्न करते हैं और सुव्यवस्थित कार्य प्रवाह के लिए दिशानिर्देश प्रदान करते हैं जो कुशल निष्पादन और विश्वसनीय प्रयोग सुनिश्चित करते हैंNtal परिणाम आलेख, परिकल्पना, स्टेम सेल प्रकार, या ट्यूमर विशेषताओं के आधार पर आगे प्रयोगात्मक अनुकूलन के लिए आधार रेखा के रूप में सेवा करने के लिए डिज़ाइन किया गया है।
Introduction
मानव स्टेम सेल की कम विषाक्तता, कम इम्यूनोजेसिसिटी और आंतरिक ब्रेन ट्यूमर ट्रोपिज्म, चिकित्सीय वाहनों के वितरण के लिए आकर्षक लक्षण हैं 1 । घातक मस्तिष्क ट्यूमर के लिए उपन्यास स्टेम कोशिका आधारित चिकित्सा हाल के वर्षों में विकसित नवाचार का वादा कर रहे हैं, और इस चिकित्सीय रणनीति का इंट्रानेबल रूपांतर नैदानिक अनुवाद की दिशा में एक छलांग का प्रतिनिधित्व करता है, इसमें गैर-आक्रामक और दोहराए जाने वाले प्रशासन नाटकीय ढंग से रोगी अनुप्रयोगों के लिए बाधा को कम कर सकते हैं और आकस्मिक शल्यचिकित्सा प्रक्रिया 1 , 2 , 3 , 4 से जुड़े सामान्य संज्ञाहरण के बिना आउट-मरीज सेवाओं के लिए अनुकूलनीय या लंबा-रोगी सेवा हो सकती है।
हम और दूसरों ने मस्तिष्क ट्यूमर के लिए स्टेम सेल डिलीवरी के इंट्रानेसल रूट का बीड़ा उठाया है और कुछ बुनियादी सिद्धांतोंमाउस एक्सनोग्राफ्ट मॉडल 2 , 3 , 4 के साथ-साथ ट्रांसजनल रिसर्च के साथ-साथ चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) अभिकर्मक वाहक 2 के माध्यम से विवो में स्टेम कोशिकाओं के प्रवास की जांच की। इन पायलट अन्वेषणों के माध्यम से, हमने पर्याप्त अनुभव जमा किया है और इनकी समझदारी प्राप्त की है कि जांच करने के लिए जांच करने वाले संकल्प को बनाए रखने के दौरान, बेहतर तरीके से विकसित मस्तिष्क-व्युत्पन्न एक्सनोग्रेट (पीडीएक्स) घातक ग्लियोमा के माउस मॉडल का उपयोग करके एक मजबूत पूर्व नैदानिक मूल्यांकन रणनीति का निर्माण कैसे किया जाता है नाक गुहा को वितरित चिकित्सीय स्टेम कोशिकाओं के इंट्रानल मस्तिष्क प्रविष्टि के परिष्कृत जैविक घटना के सूक्ष्म तंत्रिकी विवरण। यहां, हम एक मानकीकृत ऑपरेटिंग प्रोटोकॉल के सिद्धांतों का वर्णन करते हैं जो एक अच्छी तरह से स्थापित मानव तंत्रिका स्टेम सेल लाइन एचबी 1। एफ 3 सीडी 5 का इस्तेमाल करते हुए प्रयोगात्मक जांच की वर्तमान स्थिति को प्रदर्शित करते हैं। <sup>, 6 , 7 , 8 , जो चिकित्सीय वाहक के रूप में मानव स्टेम कोशिकाओं का उपयोग करके विशिष्ट ट्यूमर मॉडल या रणनीतियों के अनुकूलन करने के लिए आसानी से बदलने योग्य है।
Protocol
Representative Results
Discussion
यद्यपि इंट्रामनल मार्ग के इंट्रानेसल मार्ग को व्यापक रूप से छोटे अणुओं, नैनोमिडीसिन और प्रोटीन यौगिकों जैसे 18 के लिए खोजा गया है, इंट्रानेलिस ब्रेन ट्यूमर के लिए चिकित्सीय स्टेम कोशिकाओं के …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम एनआईएच R01NS087990 (एमएसएल, आईवीबी) द्वारा समर्थित था।
Materials
| Stereotaxic frame | Kopf Instruments | Model 900 | |
| Hypoxic Cell Culture Incubator | ThermoFisher Scientific | VIOS 160i | |
| Cell culture supplies (Plastics) | ThermoFisher Scientific | Varies | Replaceable with any source |
| Legend Micro 21R Refrigerated Microcentrifuge | ThermoFisher Scientific | 75002490 | Replaceable with any source |
| Bench centrifuge Sorvall ST16R | ThermoFisher Scientific | 75004240 | Replaceable with any source |
| Micro syringe 702N 25µl (22S/2"/2) | Hamilton Company | 80400 | Flat tip |
| Sample Tray for Irradiator | Best Theratronics | A13826 | To set up mice protection with lead shield |
| Leica DMi8 Microscope | Leica Microsystem | Custom setup | |
| Leica CM1860 UV cryostat | Leica Microsystem | Custom setup | |
| Exel International Insulin Syringe | ThermoFisher Scientific | 14-841-31 | |
| Corning Phosphate Buffer Saline | Corning Cellgro/ThermoFisher | 21-031-CV | |
| Dulbecco's Modified Eagle Medium | Corning Cellgro/ThermoFisher | 11965-084 | |
| Trypsin 0.05% | Corning Cellgro/ThermoFisher | 25300054 | |
| Hyaluronidase from bovine testes | MilliporeSigma | H3506 |
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