Le cellule staminali sono promettenti vettori terapeutici per curare i tumori cerebrali a causa del loro tropismo tumorale intrinseco. La consegna delle cellule staminali intranasali non invasive bypassa la barriera del cervello e dimostra un forte potenziale per la traduzione clinica. Questo articolo riassume i principi fondamentali della consegna delle cellule staminali intranasali in un modello di topo di glioma.
Il tropismo intrinseco verso malignità del cervello rende le cellule staminali come vettori promettenti di agenti terapeutici contro tumori maligni. La consegna di cellule staminali terapeutiche attraverso il percorso intranasale è una strategia alternativa scoperta di recente, con un forte potenziale di traduzione clinica, a causa della sua natura non invasiva rispetto all'intestazione intracranica o alla consegna attraverso percorsi sistemici. La mancanza di barriera sanguigna del sangue rafforza ulteriormente il potenziale terapeutico delle cellule staminali sottoposte a entrata intranasale del cervello. Questo articolo riassume le tecniche essenziali utilizzate nei nostri studi e delinea i principi fondamentali della strategia intranasale per la consegna delle cellule staminali usando un modello di mouse degli xenograft intracranici degli gliomi. Eseguiamo le procedure ottimizzate che generano risultati coerenti e riproducibili con specifici parametri sperimentali predeterminati e offrono linee guida per un flusso di lavoro semplificato che garantisca un'efficace esecuzione e un'esperienza affidabileRisultato ntal. L'articolo è stato progettato per servire da base per un'ulteriore personalizzazione sperimentale basata su ipotesi, tipi di cellule staminali o specifiche tumorali.
Bassa tossicità, bassa immunogenicità e tropismo tumorale intrinseco del cervello di cellule staminali umane sono tratti attraenti per la consegna di veicoli terapeutici 1 . Le nuove terapie a base di cellule staminali per tumori cerebrali maligni sono promettenti innovazioni sviluppate negli ultimi anni e l'adattamento intranasale di questa strategia terapeutica rappresenta un salto verso la traduzione clinica, in quanto la somministrazione non invasiva e ripetuta potrebbe ridurre drasticamente la barriera per le applicazioni del paziente e Può essere adattabile per i servizi out-patient senza anestesia generale o un lungo servizio in pazienti associati a procedure chirurgiche invasive 1 , 2 , 3 , 4 .
Noi ed altri abbiamo introdotto la via intranasale di consegna delle cellule staminali nei tumori del cervello e abbiamo posto il terreno per alcuni dei principi fondamentaliDella ricerca traslazionale usando i modelli xenograft 2 , 3 e 4 del mouse, oltre a studiare la migrazione di cellule staminali in vivo tramite i rivelatori di risonanza magnetica (MRI) 2 . Attraverso queste esplorazioni pilota, abbiamo accumulato un'esperienza notevole e abbiamo approfittato di come costruire una robusta strategia di valutazione pre-clinica usando modelli di topi xenograft (PDX) di pazienti derivanti da malattie degli amiomi maligni, pur mantenendo la risoluzione investigativa per esaminare I dettagli meccanici più sfumati dei fenomeni biologici sofisticati dell'ingresso cervello intranasale delle cellule staminali terapeutiche consegnate alla cavità nasale. Qui descriviamo i principi di un protocollo operativo standardizzato per dimostrare lo stato attuale di indagini sperimentali utilizzando una linea di cellule staminali neurali umane ben consolidate HB1.F3.CD 5 <sup>, 6 , 7 , 8 , che è facilmente modificabile adattarsi a modelli o strategie tumorali specifici che utilizzano cellule staminali umane come portatori terapeutici.
Sebbene sia stato ampiamente esplorato il percorso intranasale della somministrazione di farmaci per le piccole molecole, le nanomedicine e le proteine, 18 , l'applicazione di cellule staminali terapeutiche per il targeting tumorale intranazionale del cervello è molto nuova nello spettro delle terapie tumorali cerebrali in sviluppo 2 , 3 , 4 . Ci sono complicazioni intrinseche riguardanti i comporta…
The authors have nothing to disclose.
Questo lavoro è stato sostenuto da NIH R01NS087990 (MSL, IVB).
Stereotaxic frame | Kopf Instruments | Model 900 | |
Hypoxic Cell Culture Incubator | ThermoFisher Scientific | VIOS 160i | |
Cell culture supplies (Plastics) | ThermoFisher Scientific | Varies | Replaceable with any source |
Legend Micro 21R Refrigerated Microcentrifuge | ThermoFisher Scientific | 75002490 | Replaceable with any source |
Bench centrifuge Sorvall ST16R | ThermoFisher Scientific | 75004240 | Replaceable with any source |
Micro syringe 702N 25µl (22S/2"/2) | Hamilton Company | 80400 | Flat tip |
Sample Tray for Irradiator | Best Theratronics | A13826 | To set up mice protection with lead shield |
Leica DMi8 Microscope | Leica Microsystem | Custom setup | |
Leica CM1860 UV cryostat | Leica Microsystem | Custom setup | |
Exel International Insulin Syringe | ThermoFisher Scientific | 14-841-31 | |
Corning Phosphate Buffer Saline | Corning Cellgro/ThermoFisher | 21-031-CV | |
Dulbecco's Modified Eagle Medium | Corning Cellgro/ThermoFisher | 11965-084 | |
Trypsin 0.05% | Corning Cellgro/ThermoFisher | 25300054 | |
Hyaluronidase from bovine testes | MilliporeSigma | H3506 |