As células estaminais são portadores terapêuticos promissores para tratar tumores cerebrais devido ao seu tropismo intrínseco de tumor. A entrega de células estaminais intranasais não invasivas ultrapassa a barreira hematoencefálica e demonstra um forte potencial de tradução clínica. Este artigo resume os princípios básicos da administração de células estaminais intranasais em um modelo de glioma de mouse.
O tropismo intrínseco para doenças malignas do cérebro torna as células-tronco como portadores promissores de agentes terapêuticos contra tumores malignos. A entrega de células estaminais terapêuticas através da via intranasal é uma estratégia alternativa recentemente descoberta, com forte potencial de tradução clínica, devido à sua natureza não invasiva em relação à implantação intracraniana ou parto via via sistêmica. A falta de barreira hematoencefálica fortalece ainda mais o potencial terapêutico das células estaminais submetidas à entrada de cérebro intranasal. Este artigo resume as técnicas essenciais utilizadas em nossos estudos e descreve os princípios básicos da estratégia intranasal para a administração de células estaminais usando um modelo de mouse de xenoenxertos de glioma intracraniano. Demonstramos os procedimentos otimizados que geram resultados consistentes e reprodutíveis com parâmetros experimentais específicos predeterminados e oferecem diretrizes para o fluxo de trabalho simplificado que garantem uma execução eficiente e uma experiência confiável.Resultado ntal. O artigo foi concebido para servir de base para uma maior personalização experimental com base em hipóteses, tipos de células estaminais ou especificações tumorais.
A baixa toxicidade, a baixa imunogenicidade e o tropismo intrínseco do tumor cerebral de células-tronco humanas são características atraentes para a entrega de veículos terapêuticos 1 . As novas terapias baseadas em células-tronco para tumores cerebrais malignos são inovações promissoras desenvolvidas nos últimos anos e a adaptação intranasal desta estratégia terapêutica representa um salto para a tradução clínica, na medida em que a administração não invasiva e repetida pode reduzir drasticamente a barreira para aplicações de pacientes e Pode ser adaptável para serviços ambulatoriais sem anestesia geral ou serviço hospitalar prolongado associado a procedimentos cirúrgicos invasivos 1 , 2 , 3 , 4 .
Nós e outros fomos pioneiros na via intranasal da administração de células estaminais aos tumores cerebrais e colocamos o trabalho de base para alguns dos princípios básicosDe pesquisa de tradução usando modelos de xenogravagem de mouse 2 , 3 , 4 , bem como investigou a migração de células-tronco in vivo por meio de suporte de reagentes de ressonância magnética (MRI) 2 . Através destas explorações-piloto, acumulamos uma experiência substancial e obtivemos informações sobre como construir melhor uma estratégia de avaliação pré-clínica robusta usando modelos de mouse de xenoenxerto (PDX) bem estabelecidos do paciente (PDX) de glioma maligno, mantendo a resolução de investigação para examinar a Detalhes mecanicistas matizados dos fenômenos biológicos sofisticados da entrada no cérebro intranasal do cérebro de células estaminais terapêuticas entregues à cavidade nasal. Aqui, descrevemos os princípios de um protocolo de operação padronizado para demonstrar o estado atual das investigações experimentais usando uma linha de células-tronco neural humana bem estabelecida HB1.F3.CD 5 <sup>, 6 , 7 , 8 , que é facilmente modificável para se adaptar a modelos de tumor específicos ou estratégias usando células-tronco humanas como portadores terapêuticos.
Embora a via intranasal de administração de fármaco tenha sido amplamente explorada para moléculas pequenas, nanomedicinas e compostos de proteína 18 , a aplicação de células-tronco terapêuticas para o alvo do tumor cerebral intranasal é muito nova no espectro de terapias de tumores cerebrais em desenvolvimento 2 , 3 , 4 . Existem complexidades intrínsecas envolvidas em relação aos comportam…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi suportado pelo NIH R01NS087990 (MSL, IVB).
Stereotaxic frame | Kopf Instruments | Model 900 | |
Hypoxic Cell Culture Incubator | ThermoFisher Scientific | VIOS 160i | |
Cell culture supplies (Plastics) | ThermoFisher Scientific | Varies | Replaceable with any source |
Legend Micro 21R Refrigerated Microcentrifuge | ThermoFisher Scientific | 75002490 | Replaceable with any source |
Bench centrifuge Sorvall ST16R | ThermoFisher Scientific | 75004240 | Replaceable with any source |
Micro syringe 702N 25µl (22S/2"/2) | Hamilton Company | 80400 | Flat tip |
Sample Tray for Irradiator | Best Theratronics | A13826 | To set up mice protection with lead shield |
Leica DMi8 Microscope | Leica Microsystem | Custom setup | |
Leica CM1860 UV cryostat | Leica Microsystem | Custom setup | |
Exel International Insulin Syringe | ThermoFisher Scientific | 14-841-31 | |
Corning Phosphate Buffer Saline | Corning Cellgro/ThermoFisher | 21-031-CV | |
Dulbecco's Modified Eagle Medium | Corning Cellgro/ThermoFisher | 11965-084 | |
Trypsin 0.05% | Corning Cellgro/ThermoFisher | 25300054 | |
Hyaluronidase from bovine testes | MilliporeSigma | H3506 |