हम ऑटोलॉगस रक्त के दोहरे इंजेक्शन के माध्यम से चूहे में एक बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज मॉडल स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।
हम चूहे में एक बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज मॉडल स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। इस अध्ययन में करीब 250 ग्राम वजनी चूहों का इस्तेमाल किया गया। ऑटोलॉगस रक्त के १०० माइक्रोलीटर पूंछ नस से लिया गया था और टकसाली पोन में इंजेक्शन । इंजेक्शन प्रक्रिया को 2 चरणों में विभाजित किया गया था: सबसे पहले, 10 माइक्रोन रक्त को एक विशिष्ट स्थान, एंटेरोपोस्टेरियर स्थिति (एपी) -9.0 मिमी में इंजेक्ट किया गया था; पार्श्व (Lat) 0 मिमी; ऊर्ध्वाधर (वर्ट) -9.2 मिमी, एपी -9.0 मिमी पर स्थित अवशिष्ट रक्त का दूसरा इंजेक्शन; लैट 0 मिमी; 20 मिनट के अंतराल के साथ वर्ट -9.0 मिमी। बैलेंस बीम टेस्ट, लिंब प्लेसमेंट टेस्ट और मॉडिफाइड वोएस्ट न्यूरोस्कोर का इस्तेमाल न्यूरोलॉजिकल फंक्शन का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था । वीवो में हेमरेज की मात्रा का आकलन करने के लिए मैग्नेटिक रेओनेंस इमेजिंग (एमआरआई) का इस्तेमाल किया गया। इस मॉडल के लक्षण बड़े पैमाने पर पोंटिन रक्तस्राव के साथ रोगियों के साथ कतार में थे ।
इंट्रासैरेब्रल हेमरेज स्ट्रोक रोगियों के पांचवें हिस्से के लिए खाते हैं। इंट्रासैरेब्रल हेमरेज का पूर्वानुमान रक्तस्राव की गति, मात्रा और स्थान पर निर्भर करता है1,2। पूर्वाभास नकसीर की तुलना में, ब्रेनस्टेम हेमरेज में मृत्यु दर अधिक होती है और रुग्णता3होती है। ब्रेनस्टेम नकसीर का लगभग 40% पों में होता है4. पोंटिन हेमरेज की एटियोलॉजी और पैथोलॉजी काफी अलग है और फोर्ब्रेन हेमरेज 5 की तुलना में कम अध्ययन कियाजाताहै।
दो तरह के पोंटिन हेमरेज एनिमल मॉडल होते हैं। एक सहज नकसीर मॉडल है जो पोन्स 6 ,7,8में बैक्टीरियल कोलेजनेस के अर्क से प्रेरित है । इस मॉडल का सबसे बड़ा फायदा यह है कि रक्तस्राव सहज है। हालांकि, कोलेजनेस केवल पोंटिन हेमरेज की एक छोटी मात्रा को प्रेरित कर सकता है। इसके अलावा, कोलेजनेस मस्तिष्क को अन्य चोटों का कारण बन सकता है। दूसरा मॉडल पोन्स9में ऑटोलॉगस रक्त के स्टीरियोटैक्टिक इंजेक्शन से प्रेरित है । इस मॉडल का लाभ यह है कि उच्च सफलता दर के साथ मास्टर करना आसान है। सैद्धांतिक रूप से, शोधकर्ताओं ने पोन के किसी भी स्थान में रक्त की किसी भी मात्रा सुई सकता है । हालांकि, सुई मार्ग के माध्यम से वापस रिसाव के कारण, इंजेक्शन की मात्रा सीमित है। हाल ही में, डबल इंजेक्शन विधि को बढ़ावा दिया गया है वापस रिसाव9को कम करने के लिए । यह विधि इंजेक्शन के बीच 20 मिनट के अंतराल के साथ दो बार ऑटोलॉगस रक्त इंजेक्ट करती है। डबल-इंजेक्शन विधि हल्के (30 माइक्रोल) और मध्यम (60 माइक्रोन) पोंटिन हेमरेज को प्रेरित करने के लिए लागू की जाती है लेकिन बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज नहीं होती है। क्लिनिक में, खराब पूर्वानुमान वाले अधिकांश पोंटिन हेमरेज रोगियों में बड़े पैमाने पर रक्तस्राव (10 एमएल से अधिक) होता है।
पिछले अध्ययन में, हम चूहा10में एक पोंटिन इस्कीमिक स्ट्रोक मॉडल स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान की है । इस अध्ययन में, हम मौजूदा दोहरे इंजेक्शन विधि को संशोधित करते हैं, और पोन में दो अलग-अलग स्थानों पर 100 माइक्रोन ऑटोलॉगस रक्त के दोहरे इंजेक्शन द्वारा चूहे में बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज को प्रेरित करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।
वर्तमान अध्ययन में, हमने एक बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज चूहा मॉडल उत्पन्न करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान किया। इस मॉडल का उपयोग रोगविज्ञान तंत्र और बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज के पूर्वानुमान पर अन?…
The authors have nothing to disclose.
इस अध्ययन को आर्थिक रूप से चीन के राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (81471181 और 81870933) और ग्वांग्झू मेडिकल यूनिवर्सिटी (0506308) के उद्घाटन प्रयोगशाला कार्यक्रम वाई जियांग के लिए समर्थन किया गया था, और चीन के राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (81701471) और ग्वांग्झू नगर स्वास्थ्य आयोग (20191A011083) के वैज्ञानिक कार्यक्रम द्वारा जेड Qiu के लिए, और चीन के राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (81501009) द्वारा वू
100ml Saline solution | Guangdong yixiang | 191222201 C1 | Preparing heparin diluent |
100μl Microinjector | Shanghai Gaoge | Injection of autologous blood | |
1ml Syringe | Jiangsu Zhiyu | 20191014 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
75% Alcohol | Shandong Lierkang | Disinfection of rat tail | |
Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
Animal anesthesia system | RWD | R510-31S-6 | Inducing and maintaining anesthesia |
Balance beam | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
Blades | Shanghai Feiying | 74-C | For gross anatomy |
Bone cement | Shanghai Xinshiji | 20180306 | Surgicl instruments |
Brain tank | Shenzhen LEIYEA | For gross anatomy | |
Butorphanol tartrate | Jiangsu Hengrui | For pain management | |
Electric cranial drill | Nanjing Darwin biotechnology | 20180090018 | Making a burr hole on the skull |
EP tube | Nantong Surui | Transfer autologous blood | |
Erythromycin eye cream | Yunnan pharmacy | Eyes protection | |
HE dye liquor | Solarbio | G1120 | For HE staining |
Heating pad | Dangerous Jungle | JR01 | Keeping warm |
Heparin sodium injection | Chengdu Haitong Pharmacal Company | 190701 | Preparing heparin diluent |
IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
Isoflurane | RWD | 20080701 | Inducing and maintaining anesthesia |
Light dark box | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
Micro-injection pump | Baoding Leifu | TFD03-01-C | Injection of autologous blood |
MRI system | Philips | Confirmation of infarction in vivo | |
Needle holder | Shanghai Jinzhong | J32020 | Surgicl instruments |
Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
Q-tips | Jiangxi Songhe | Surgicl instruments | |
Scalp heedle | Jiangxi Hongda | 20200313 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
Scalpel | Shanghai Kaiyuan | 170902 | Surgicl instruments |
Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Y00040 | Surgicl instruments |
Stereotaxic apparatus | RWD | 900-00001-00 | for surgical positioning |
Surgical towel | Xinxiang Huakangweicai | 20070601 | Surgicl instruments |
Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
Suture scissors | Shanghai Jinzhong | J25041 | Surgicl instruments |
Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | J31080 | Surgicl instruments |