1. Numune Hazırlama
2. Ön arıtma
3. Enzimatik Sindirim
4. Fermantasyon


Kaynak: Margaret Workman ve Kimberly Frye Laboratuvarları - Depaul Üniversitesi
Bu deneyde, selülozik malzeme (mısır sapları, yapraklar, otlar vb.) etanol üretimi için bir hammadde olarak kullanılacaktır. Selülozik malzeme önce ön işleme tabi tutulur (öğütülür ve ısıtılır), enzimlerle sindirilir ve daha sonra maya ile fermente edilir. Etanol üretimi bir etanol probu kullanılarak izlenir. Deney, kullanılan hammaddeyi değiştirerek etanol üretimini optimize etmek için genişletilebilir, ön işlem koşulları, enzim varyasyonu, maya varyasyonu vb. Reaksiyonu izlemenin alternatif bir yöntemi, etanol yerine üretilen karbondioksiti (bir gaz sensörü kullanarak) ölçmektir. Düşük teknolojili bir alternatif olarak, bir etanol probu veya karbondioksit gazı sensörü mevcut değilse, işlem sırasında glikozu izlemek için glikoz ölçüm cihazları (herhangi bir eczanede bulunur) kullanılabilir.
'Sorgulamaya dayalı öğrenmeye' artan vurgu ile bilimsel problar daha popüler hale geliyor. Çeşitli problarla (iletkenlik, çözünmüş oksijen, voltaj ve daha fazlası için olanlar gibi) birlikte kullanılan Vernier Lab Quest gibi el cihazları, veri toplamaya ve/veya grafik oluşturmaya daha az odaklanmaya ve verileri analiz etmeye ve tahminlerde bulunmaya daha fazla odaklanmaya olanak tanır. Diğer bir avantaj, bunların küçük ve hafif olması ve alınabilmesidir ölçümler için sahaya.
1. Numune Hazırlama
2. Ön arıtma
3. Enzimatik Sindirim
4. Fermantasyon


Biyoyakıtlar, bitkiler gibi biyolojik maddelerden elde edilen yakıtlardır. Biyoyakıtlar, dünyanın birçok yerindeki mahsullerden elde edilebildikleri için fosil yakıtlara bir alternatif olarak hizmet eder. Ek olarak, daha temiz yanarlar, böylece sera gazı emisyonlarını azaltırlar.
En yaygın kullanılan biyoyakıtlardan biri, bitki biyokütlesinden, tipik olarak şeker kamışı ve mısırdan elde edilen etanoldür. ABD'de etanol biyoyakıtın çoğunluğu mısırdan üretilmektedir.
Mısır mahsullerinin hammadde olarak kullanılması tartışmalıdır, çünkü mısır büyümek için enerji yoğundur, büyük miktarda gübre kullanır ve hammadde olarak kullanılması gıda arzından, özellikle de hayvancılık için yemden büyük miktarda mısırı uzaklaştırır. Sonuç olarak, çimen, yapraklar, kağıt ve mahsullerin yenilebilir olmayan kısımları gibi diğer bitki materyallerinin veya lignoselülozik materyallerin kullanımı artmaktadır.
Bu video, lignoselülozik malzemeden etanol elde etmenin temellerini kapsayacak ve laboratuvarda lignoselülozik hammaddelerden etanol üretimini gösterecektir.
Lignoselülozik biyokütle, odunsu hücre duvarlarına sahip bitki maddesini ifade eder. Bu tür bitki maddeleri, genellikle tarım ve imalatın atık bir ürünü olduğu için mevcut en bol hammaddelerden biridir.
Hücre duvarları, yüksek oranda çapraz bağlı polimer, lignin ve iki kompleks karbonhidrat, hemiselüloz ve selülozdan oluşur. Selüloz, glikoz gibi fermente edilebilir şekerlerin birincil kaynağıdır, ancak önce lignin ve hemiselüloz bileşenlerinden ayrılmalıdır.
Lignoselülozik malzemenin işlenmesinde ilk adım, kuru bitki maddesinin ince bir şekilde öğütülerek toz haline getirilmesidir. Öğütülmüş besleme stoğu daha sonra hücre duvarındaki lignin ve hemiselüloz bariyerini parçalamak ve selüloza erişim sağlamak için ön işleme tabi tutulur.
Daha sonra selüloz, selülaz ve hemiselülaz gibi hidrolitik enzimlerle muamele edilir. Enzimatik hidroliz, selülozu glikoza parçalar. Son olarak, glikoz, etanol üretmek için maya ile fermente edilir.
Aşağıdaki deney, lignin ve hemiselülozun uzaklaştırılması, ardından selülozun enzimatik muamelesi ve etanol üretmek için glikozun fermantasyonu yoluyla selülozik biyokütleden etanol üretmenin bu adım adım yöntemini göstermektedir.
Bu deneyde, mısır sobasından etanol, mısır bitkilerinden elde edilen yaprak ve saplardan etanol üretilecektir. Bir bilyalı değirmen değirmeni kullanarak, hammaddeyi ince bir toz haline getirin ve büyük parça kalmadığından emin olun.
1 g hammaddeyi tartın, 50 mL'lik bir santrifüj tüpüne yerleştirin ve etiketleyin. İkinci bir tüpü kontrol numunesi olarak etiketleyin ve herhangi bir hammadde eklemeyin. Numuneleri ön işleme tabi tutmak için, yaklaşık 400 mL su ile 500 mL'lik bir beher ayarlayın ve hafifçe kaynatın.
Hazırlanan iki santrifüj tüpüne 25 mL damıtılmış su ekleyin ve gevşek bir şekilde kapatın. Karıştırmak için tüpleri döndürün. Tüpleri kaynar suya yerleştirin ve banyodan gelen suyun tüplere sızmadığından emin olun. 30 dakika kaynatın, ardından çıkarın ve oda sıcaklığına soğumaya bırakın.
Tüpler soğuduktan sonra, her iki tüpe de 1 mL selülaz enzimi ekleyin. Tüpleri 24 saat boyunca bir inkübatöre yerleştirin. 24 saat sonra tüpleri çıkarın ve oda sıcaklığına soğumaya bırakın. Etanol, sindirilmiş selülozik malzemeden maya ile fermantasyon yoluyla üretilir. Bu işleme başlamak için, santrifüj tüplerinin her birine 1 g aktif maya ekleyin ve karıştırmak için döndürün.
Santrifüj tüplerine bir hava kilidi yerleştirin. Hava kilidi, fermantasyon sırasında oluşan karbondioksitin kaçmasına izin verir, böylece tüpte basınç oluşmaz. Santrifüj tüplerini bir rafa yerleştirin ve 37 °C'de bir inkübatöre yerleştirin. Fermantasyon tamamlandıktan sonra, kontrol ve numune tüplerindeki etanol konsantrasyonunu ölçmek için bir etanol sensörü kullanın.
Biyoyakıtları rekabetçi bir enerji kaynağı haline getirmek için, hammaddelerin yapısı ve performansı ile ilgili bazı soruların cevaplanması gerekir.
Ligninin çeşitli bitkilerdeki dağılımını anlamak önemlidir, böylece uzaklaştırılması verimli bir şekilde gerçekleştirilebilir. Bu örnekte, bitki hücre duvarlarındaki lignin dağılımı, bir bitki sapından ince tabakaların dilimlenmesiyle analiz edildi. İnce dilimler daha sonra bitki sapının üç boyutlu görüntülerini oluşturmak için 532 nm lazer ışığı ile konfokal mikroskopi kullanılarak görüntülendi.
Lignin içeriği Raman spektroskopisi kullanılarak belirlendi. Konfokal görüntüleri ve Raman spektrumlarını birleştirerek, lignin dağılımının üç boyutlu bir haritası oluşturuldu.
Bitki hammaddelerinden elde edilen biyoetanol miktarını en üst düzeye çıkarmak için, hammadde türlerinin karşılaştırılması gerekmektedir. Bu örnekte, etanol kartondan üretildi ve mısır sobası ile karşılaştırıldı. Karton, daha önce gösterildiği gibi hazırlandı, burada öğütülmüş karton, malzemeden lignin ve hemiselülozu ayırmak ve selülozu glikoza parçalamak için enzimatik sindirime tabi tutuldu. Ekstrakte edilen glikoz daha sonra etanol üretmek için maya ile fermente edildi. Karton, çözeltideki etanol konsantrasyonunun iki katından fazlasını ürettiği için mısır sobasından daha üstün bir hammadde olduğunu kanıtladı.
Amerika Birleşik Devletleri'nde biyoetanolün büyük çoğunluğu mısırdan üretilmektedir. Mısırdan etanol üretimi enerji yoğun olsa da, selülozik biyokütleden etanol üretiminden daha az karmaşıktır.
Mısır hammaddelerinden uzaklaşmak için, selülozik biyokütleden elde edilen verimin mısırdan daha iyi olması gerekir. Bu örnekte, mısır unu ve mısır sobası, daha önce gösterildiği gibi aynı prosedür kullanılarak karşılaştırılmıştır.
Mısır unu, mısır sobasından daha yüksek konsantrasyonda etanol üretti, bu da mısırın mısır saplarının kendisinden biraz daha iyi bir hammadde olduğunu gösteriyor. Bununla birlikte, mısır sapları ve diğer selülozik hammaddeler daha bol ve ucuzdur ve uygun bir alternatif sağlayabilir.
JoVE'nin Biyoyakıtlara Giriş kitabını yeni izlediniz. Artık bitki hammaddelerinden etanol üretimini ve süreçle ilgili zorlukları anlamalısınız. İzlediğiniz için teşekkürler!
Çözeltideki % etanol, kullanılan etanol sensörünün markasıyla ilgili yazılım kullanılarak elde taşınan tablet ekranında görüntülenecektir (Şekil 2).
Çeşitli hammaddeler tarafından üretilen etanol yüzdesinin temsili sonuçları Tablo 1'de görülebilir.
...| Hammadde | Üretilen etanol |
| Talaş | 0.70% |
2007 Enerji Bağımsızlığı ve Güvenliği Yasası, yenilenebilir bir yakıt standardını yasalaştırdı. 2008'de 9 milyar galondan başlayıp 2022'de 36 milyar galona ulaşan yenilenebilir yakıt hacimleri için bir aşama oluşturdu. Bu 36 milyarın 16 milyarının selülozik malzemelerden gelmesi bekleniyordu. 2014 için, Orijinal teklif, 18.15 milyar galon yenilenebilir yakıt içindi ve bunun 1.75 milyarı selülozik malzemeden geliyordu. Ne yazık ki, şu anda üretilmesi mümkün olan selülozik etanol hacmine bağlı olarak, yakın tarihli bir EP...
Chapters in this video
0:00
Overview
1:17
Principles of Biofuel Production
2:46
Sample Preparation
3:52
Enzymatic Digestion and Fermentation
4:55
Applications
7:14
Summary
Videos from this collection:
Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved