Hammadde olarak kullanılacak selülozik malzemeyi seçin. Bu mısır sapları, otlar, yapraklar, evcil hayvan yatakları veya kağıt olabilir.
Bir bilyalı değirmen öğütücü (veya bilyalı değirmen öğütücü yoksa kahve değirmeni) kullanarak, besleme çubuğunu büyük parça kalmayacak şekilde ince bir toz haline getirin.
1,0 g hammadde ölçün ve 50 mL'lik bir santrifüj tüpüne yerleştirin. Tüpü seçilen hammadde ile etiketleyin.
İkinci bir 50 mL santrifüj tüpünü "Kontrol" olarak etiketleyin. Bu tüpe herhangi bir hammadde koymayın.
2. Ön arıtma
Bir ocak gözüne yaklaşık 400 mL su ile 500 mL'lik bir beher yerleştirin ve hafifçe kaynatın.
2 santrifüj tüpüne 25 mL damıtılmış su ekleyin. Karıştırmak için döndürün. Kapağı santrifüj tüplerinin üzerine gevşek bir şekilde yerleştirin.
Santrifüj tüplerini hafifçe kaynar su ile dolu behere koyun. Su banyosundan gelen suyun tüplere sızmadığından emin olun. 30 dakika kaynatın.
Tüpleri oda sıcaklığına soğumaya bırakın.
3. Enzimatik Sindirim
Her iki tüpe de 1 mL selülaz enzimi ekleyin.
Tüpleri 24 saat boyunca 50 °C'de bir inkübatöre koyun.
Tüplerin oda sıcaklığına soğumasını bekleyin.
4. Fermantasyon
Santrifüj tüplerinin her birine 1.0 g aktif maya (normal market mayası tamam) ekleyin. Karıştırmak için döndürün.
Santrifüj tüpünün üstüne bir hava kilidi koyun. Hava kilidi, CO2'nin kaçmasına izin vererek santrifüj tüpündeki basıncı düşük tutar.
Santrifüj tüplerini bir rafa yerleştirin ve 37 °C'de 24 saat boyunca bir inkübatöre koyun.
Bir etanol sensörü kullanarak, kontrol tüpündeki etanol konsantrasyonunu ölçün (Şekil 1). Etanol sensörleri, Vernier veya PASCO aracılığıyla her biri yaklaşık 100 $ karşılığında satın alınabilir. Şekil 1. Kontrol tüpündeki etanol konsantrasyonunu ölçen etanol probu.
Bir etanol sensörü kullanarak, numune tüpündeki etanol konsantrasyonunu ölçün (Şekil 2). Şekil 2. Etanol yüzdesini gösteren el tipi tablet.
Kaynak: Margaret Workman ve Kimberly Frye Laboratuvarları - Depaul Üniversitesi
Bu deneyde, selülozik malzeme (mısır sapları, yapraklar, otlar vb.) et…