Why is proper rodent handling training important for research?

Even minimal handling of mice and rats causes stress, increasing heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels for several hours. Restraint procedures for injections and blood withdrawals also cause physiological changes that can affect scientific data. Proper training minimizes these effects, ensuring animal welfare and data integrity in research.

What is the correct way to lift a rodent by its tail?

Grasp the tail at the base near the rump, never at the end, to prevent skin from being pulled off and causing tail amputation. Move the animal quickly and steadily without suspending it in air for extended periods, as this causes distress and struggling. Never place a hand under the animal, as it may bite while seeking security.

How do forceps compare to other methods for handling multiple rodents?

Forceps minimize cross-contamination between animals and are quicker and less expensive than changing gloves between cages. Long-dressing or tongue forceps with rubber, plastic, or silicone tubing cushioning can grasp mice at the scruff or tail base. Handlers must be trained on proper grip pressure to avoid interfering with breathing.

What is the two-handed restraint method for mice?

Place the mouse on a grippable surface like a wire bar lid. Hold the tail base with your dominant hand and gently tug backward to stretch the body. With your other hand, pin the skull base with index and thumb, grasp neck skin to lift, and stabilize the back against your thumb base. Secure hindquarters by pinning the tail with your ring finger.

How does the T-rex grip restrain adult rats?

Place the rat on a grippable surface and hold the tail base with one hand. Position your other hand over the shoulder with index and middle fingers split on either side to restrict head movement. Encircle the body behind forelegs with middle and ring fingers and thumb, avoiding chest compression. Grasp the tail base with or without hind feet depending on the procedure.

What are the key features of a Broome-style restraint device?

The Broome-style device has a slot running its full length and a plastic nosepiece for holding animals. Insert the animal hindquarters first by gently pulling at the tail base. Slide the nosepiece back to secure the animal with its nose centered in the opening, ensuring it can still breathe freely.

When should manual restraint methods be used versus restraint devices?

Manual restraint methods like scruffing are used for marking procedures such as ear punching and for common injection procedures including subcutaneous and intraperitoneal administration. Restraint devices should be used for procedures requiring minimal animal movement, such as intravenous administration and microchip insertion, where compound administration rodents injection techniques demand precise positioning.

Kemirgen Taşıma ve Kısıtlama Teknikleri

0 görüntülenme15:57 dk.

1. Tırmalama

Fareler çoğunlukla tırmalama tekniği kullanılarak kısıtlanır, ancak genç sıçanlar da bu yöntemle kısıtlanabilir. Yetişkin sıçanlar, daha kaslı bir boyun, daha az miktarda gevşek deri ve bu yönteme karşı isteksizlik nedeniyle bu teknikle dizginlemek daha zordur.

Tek elle kısıtlama yöntemi, en sık atimik çıplak, SCID ve bazı GEM suşları gibi çok sakin olan fare suşlarında kullanılır. Ancak bu yöntemle ısırılma riski daha yüksektir. Acemi hayvan bakıcıları, tek elle yöntemi denemeden önce iki elle kısıtlama tekniği konusunda rahat olmalıdır.
1. Hayvanı, tel çubuk, kafes üstü veya paspas gibi kavrayabilecekleri bir yüzeye yerleştirin.
2. Kuyruğu baskın olmayan elin üçüncü ve dördüncü parmakları arasında tutun ve geriye doğru hafifçe çekiş uygulayın. Bu, hayvanın yüzeye tutunmasına neden olur ve vücudun gerilmesine ve uzamasına neden olur.
3. Avuç içi hayvanın vücuduna bakacak şekilde elinizi çevirin.
4. İşaret parmağı ve başparmağınızla kemirgeni omuzların üzerine sabitleyin.
5. Başparmağınızı ve işaret parmağınızı yavaşça öne kaydırın ve kafatasının tabanına yerleştirin. Boynundaki gevşek cildi kavrayın ve hayvanı kaldırın.
6. Sırt deriyi başparmağın tabanına sabitleyerek hayvanı sırt boyunca sabitlemek için orta parmağınızı kullanın.
İki elle emniyet
1. Hayvanı kavrayabilecekleri bir yüzeye yerleştirin.
2. Baskın elinizle kuyruğu tabanda (vücudun 1-2 cm yakınında) tutun ve geriye doğru hafifçe çekiş uygulayın. Bu, hayvanın yüzeye tutunmasına neden olur ve vücudun gerilmesine ve uzamasına neden olur.
3. Diğer elin işaret parmağı ve başparmağı ile kemirgeni omuzların üzerinden sabitleyin.
4. Başparmağınızı ve işaret parmağınızı yavaşça öne kaydırın ve kafatasının tabanına yerleştirin. Boynundaki gevşek cildi kavrayın ve hayvanı kaldırın.
5. Sırt deriyi başparmağın tabanına sabitleyerek hayvanı sırt boyunca stabilize etmek için kalan parmakları kullanın.
6. Kuyruğu dördüncü parmağınızla avuç içine doğru sabitleyerek veya arka bacakların sağlam bir yüzeye dayanmasına izin vererek arka kısımları sabitleyin.

Şekil 1: Fareler için tek elle ve iki elle kısıtlama yöntemi

2. Eldivenler

İşleyicilerin fare ısırıklarından korunmak için giyebilecekleri çeşitli eldivenler mevcuttur. El becerisi kaybı nedeniyle genellikle farelerle çalışmak için uygun değildirler. Çoğu zaman, birçok eldiven tipinin dezavantajları avantajlarından daha ağır basar.

Pamuklu kanvas iş eldivenleri ısırmaya karşı dayanıklı değildir, ancak dişlerden ve tırnaklardan az miktarda koruma sağlar. Kürk üzerinde kolayca kaydıkları için iyi bir tutuş sağlamazlar.
Kaliteli deri eldivenler ısırmaya karşı dayanıklıdır. Bununla birlikte, sertlikleri el becerisinde bir azalmaya neden olur. Derinin kalınlığı koruyucu olmasına rağmen dokunma keskinliğini ve el hareketliliğini azaltır.
Zincir posta eldivenleri, hayvan bakıcısı için psikolojik bir güvenlik duygusu sağlar. Bununla birlikte, ağırdırlar ve çoğu farenin dişleri bağlantılar arasına girebilir. Ek olarak, bu eldivenler el becerisini azaltır ve yanlış kullanıldığında hem hayvan hem de işleyici için daha tehlikelidir.
Evlerde bulaşık yıkamak için yaygın olarak kullanılan kauçuk yalıtımlı eldivenler, dokulu bir palmar yüzey sağlar ve kemirgenlerin tüyleri üzerinde güvenli bir tutuş sağlar. Esnek lateks yüzey, kemirgen kesici dişlerin delinmesine direnecek kadar kalın ve hayvanı hissedebilecek ve kontrol edebilecek kadar incedir. En büyük dezavantajı, lateks alerjisi olan kişiler için bir endişe kaynağı olan lateksten yapılmış olmalarıdır. Ayrıca, bu eldivenler ışıkta bozulur ve düzenli olarak değiştirilmeleri gerekir.

3. Vücut Kısıtlaması

"T. rex tutuşu", sıçanlar için iki elle kullanılan bir kısıtlama yöntemidir.
1. Kavranabilecek bir yüzeye bir fare yerleştirin.
2. Bir elinizle kuyruğun tabanını tutarak, diğer elinizi işaret ve orta parmaklar bölünmüş olarak yukarı ve sırtın üzerine getirin.
3. İşaret parmağı başın bir tarafında ve orta parmağınız diğer tarafında olacak şekilde elinizi omzunuzun üzerine yerleştirin. Başın her iki yanındaki parmaklar, başın yan yana hareketini kısıtlar.
4. Üçüncü parmak, dördüncü parmak ve başparmak ile vücudu ön ayakların arkasına sarın. Göğsü sıkıştırmaktan ve solunumdan ödün vermekten kaçınmak için özen gösterilmelidir. Bu tutuş, farenin elden ileri veya geri hareket etmesini önler.
5. Arka ayaklara tutunarak veya tutmadan kuyruğun tabanını kavrayarak kuyruğu ve arka kısımları sabitleyin.
6. Bu kısıtlama, daha büyük sıçanlarla ve kafaya erişim gerektiğinde iyi çalışır.
Ön bacak çapraz yöntemi, iki elle yapılan bir kısıtlama yöntemidir.
1. Hayvanı kavrayabilecekleri bir yüzeye yerleştirin.
2. Baskın elinizle kuyruğu tabanda (vücudun 1-2 cm yakınında) tutun ve geriye doğru nazikçe çekiş uygulayın. Bu, hayvanın yüzeye tutunmasına neden olur ve vücudun gerilmesine ve uzamasına neden olur.
3. Diğer elinizi arkadan arkaya getirin.
4. Fareyi doğrudan omuzların arkasında, parmaklar bir tarafta ve başparmak göğsün diğer tarafında olacak şekilde kavrayın ve elinizi öne doğru kaydırın, böylece ön ayakları öne doğru itin.
5. Ön ayaklar farenin çenesinin altından geçecek, fiziksel bir bariyer oluşturacak ve farenin başını parmaklara doğru hareket ettirmesini önleyecektir.
6. Göğsü sıkıştırmaktan ve solunumdan ödün vermekten kaçınmaya dikkat edin.

Şekil 2: Sıçanları dizginlemek için T-rex kavrama ve ön ayak çapraz yöntemi

4. Kısıtlama cihazları

Şekil 3: Broome tarzı sınırlama cihazı

Şekil 4: Düz tabanlı kemirgen sınırlayıcı

Sert cihazlar çeşitli tiplerde gelir ve genellikle kolayca dezenfekte edilebilen gözeneksiz malzemeden yapılır.
1. Broome tarzı kısıtlama, intravenöz enjeksiyonlar için kuyruğa erişim sağlamak üzere tasarlanmıştır. Cihazın tüm uzunluğu boyunca uzanan ve hayvanın önce kısıtlayıcının arka kısmına çekilmesine izin veren bir yuva ile inşa edilmiştir. Hayvanı yerinde tutmak için plastik bir burunluk yerleştirilir.
  1. Vidayı gevşeterek burunluğu emniyet borusunun gövdesinden çıkarın.
  2. Hayvanı kuyruğun tabanından kavrayın ve kısıtlama borusunu, borunun uzunluğu boyunca uzanan yarık yukarı bakacak şekilde yönlendirin. Hayvanı önce emniyet tertibatının arka kısmına nazikçe çekin.
  3. Tüpün içine yerleştirilmesini kolaylaştırmak için hayvanı pürüzsüz bir yüzeye yerleştirmek genellikle avantajlıdır.
  4. Hayvan tüpün içine tamamen girdikten ve kapalı uca çekildikten sonra, açıklığı kapatmak için plastik burunluğu tüpün içine kaydırın.
  5. Burunluk düzeneğini, hayvanın burnu orta açıklıkta olacak şekilde yerleştirin. Burunluğu, hayvanın nefes alamayacağı kadar sıkı yerleştirmeyin.
2. Düz tabanlı kemirgen tutucu, kısıtlama cihazının üstünden ve altından erişime izin veren açıklıklara sahip yarım silindirdir. Hayvanı cihazın içinde tutmak için birkaç dereceli yuvadan birine sert bir plastik kapı yerleştirilmiştir.
  1. Hayvanı kuyruğun tabanından baskın elinizle düz bir yüzeyde veya bir kafes üstünde tutun.
  2. Düz tabanlı emniyet borusunu diğer elinizle tutun ve açık ucu hayvanın kafasında masa/kafes üst yüzeyine 45°'lik bir açıyla gelecek şekilde açın.
  3. Bazı hayvanlar hemen tüpe girerken, diğerleri isteksizdir ve işleyicinin onları tüpe yönlendirmesini gerektirir.
  4. Tüpü hayvanın başının üzerine yerleştirin. Hemen hayvanın kıçına dokunun ve hayvanın geri çekilmesini önlemek için basıncı koruyun.
  5. Hayvan emniyet cihazına girdikten sonra, hayvanı emniyet cihazında tutmak için plastik kapıyı uygun yuvaya kaydırın.
3. Tüp tutucular, hava sirkülasyonu için delikler veya yarıklar içeren bir kapalı ucu olan Pleksiglas silindirlerdir. Bazıları geniş bir yuva ile modifiye edilirkas içi enjeksiyonlar, safen ve femur kan toplanması veya deri altı enjeksiyonlar için sırt yüzeyine erişim için bir arka uzuvun maruz kalmasını sağlamak için silindirin uzunluğunun yarısı.
  1. Hayvanı kuyruğun tabanından baskın elinizle pürüzsüz bir yüzeyde veya bir kafes üstünde kavrayın.
  2. Emniyet borusunu diğer elinizle tutun ve açık ucu hayvanın kafasında masa/kafes üst yüzeyine 45°'lik bir açıyla gelecek şekilde açı verin.
  3. Bazı hayvanlar hemen tüpe girecektir. Diğer hayvanlar isteksizdir ve işleyicinin onları tüpe yönlendirmesini gerektirir.
  4. Tüpü hayvanın başının üzerine yerleştirin. Hemen hayvanın kıçına dokunun ve hayvanın geri çekilmesini önlemek için basıncı koruyun.
  5. Yönetilemeyen hayvanları tüpe tırmıklayın ve manuel olarak yönlendirin, böylece tutulan derinin tüpteki yarıktan kaymasına izin verin.
  6. Hayvan emniyet tertibatına girdikten sonra, hayvanın geri çekilmesini önlemek için açıklığı kapatmak gerekir.
  7. Prosedüre bağlı olarak, açıklık boyunca birkaç parmak yerleştirilir.
  8. Açıklığa büyük bir lateks eldiven doldurun. Eldivenler genellikle dokuludur ve Pleksiglas yüzeyi kavrar.
  9. Bazı kısıtlama tüpleri, bu stile veya boyuta özgü kapaklara sahip olacaktır.

Şekil 5: Tüp sınırlama cihazı

Esnek tutucular tek kullanımlık esnek plastik konilerdir. Şeffaf veya opak plastik olarak mevcutturlar. Plastik, hayvanı kısıtlama cihazından çıkarmadan enjeksiyonları gerçekleştirmek için bir iğnenin nüfuz etmesine izin verecek kadar incedir. Hem yetişkin hem de sütten kesilen farelere ve sıçanlara uyacak şekilde çeşitli boyutlarda gelirler.
1. Uzuvlara, kuyruğa ve diğer enjeksiyon bölgelerine erişim sağlamak için plastiği makasla kesin.
2. Hayvan için uygun bir koni boyutu seçin. Koni, hayvanın kıçının 2-3 inç ötesine uzanacak kadar uzun olmalıdır.
3. Hayvanı koninin içine yerleştirin
  1. Koniyi açın ve üst yarısından kavrayın.
  2. Hayvanı baskın elinizle kuyruğun tabanından kavrayın, pürüzsüz bir yüzeye veya bir kafes üstüne yerleştirin.
  3. Emniyet konisini diğer elinizle tutun ve açık ucu hayvanın kafasında masa/kafes üst yüzeyine 45°'lik bir açıyla gelecek şekilde açı verin.
  4. Bazı hayvanlar hemen koniye girecektir. Diğer hayvanlar isteksizdir ve işleyicinin onları emniyet konisine yönlendirmesini gerektirir.
  5. Koniyi hayvanın başının üzerine yerleştirin. Hemen hayvanın kıçına dokunun ve hayvanın geri çekilmesini önlemek için basıncı koruyun. Koni açıklığının daha büyük çapı nedeniyle, hayvanların koniden çıkmak için dönme olasılığı çok daha yüksektir.
  6. Hayvan koniye girer girmez, açık ucu kavrayın ve hayvanı sonuna kadar zorlamak için kapatın.
  7. Plastiği kuyruğun bir tarafına katlayarak ve bağlayıcı klipsi katlanmış plastiğe uygulayarak, kuyruğu veya cildi sıkıştırmamaya dikkat ederek açıklığı sabitleyin. Alternatif olarak, plastiği kuyruğun etrafına eşit şekilde toplayın ve açıklığı sabitlemek için büküm bağını vücuda mümkün olduğunca yakın yerleştirin.

Şekil 6: Esnek sınırlayıcı

5. Belirli teknik prosedürler için kısıtlama yöntemleri

İntraperitoneal enjeksiyonlar için ventral maruziyet gereklidir.
1. Tırmalama
  1. Hayvanı tırmıklayın ve elinizi karın açıkta kalacak şekilde çevirin.
  2. Hayvanı, başı 30°'lik bir açıyla aşağı bakacak şekilde eğin.
  3. Dördüncü parmağınızı kullanarak kuyruğu avuç içine doğru sabitleyerek arka kısmı sabitleyin.
  4. Alternatif olarak, arka kısım, fazla deriyi sırt boyunca parmaklar ve başparmağın tabanı arasına sıkıştırarak hareketsiz hale getirilebilir.
2. T. rex kavrama ve ön ayak çapraz kısıtlama yöntemleri
  1. Yukarıdaki tekniklerden herhangi birini kullanarak hayvanı (yalnızca sıçanlar) kavrayın.
  2. Serbest eliyle, her iki arka bacağınızı da kancanın üzerinde tutun ve kaudal olarak uzatın.
  3. Hayvanın ağırlığını elinizin avuç içi sırtında olacak şekilde destekleyin.
  4. Hayvanı, başı 30°'lik bir açıyla aşağı bakacak şekilde eğin.
  5. Enjeksiyonu ikinci bir kişi gerçekleştirir.
3. Sert kısıtlayıcı
  1. Çoğu sert kısıtlama cihazı, hayvanın dik durmak için içgüdüsel olarak yuvarlanmasını engelleyemez.
  2. Sert bir tutucu kullanılıyorsa, hayvanı başı aşağı bakacak ve masaya dik olacak şekilde çevirin.
4. Esnek tutucu
  1. Esnek bir plastik koni içine düzgün bir şekilde yerleştirildiğinde, hayvan dönemez veya etrafta dönemez.
  2. Hayvanı, karın içine erişime izin vermek için arka bacaklar yeterince ayrılacak şekilde konumlandırmaya özen gösterilmelidir.
  3. Hayvan sıkıştırıldığından, dalak, karaciğer, böbrek veya midenin delinmesini önlemek için enjeksiyonun ventral yüzeyde yeterince düşük olması zorunludur.
Deri altı boşluğuna yapılan enjeksiyonlar için dorsal maruziyet gereklidir.
1. Tırmalama
  1. Hayvanı tırmıklayın ve arka ayaklarının sağlam, düz bir yüzeyde durmasına izin verin.
  2. Boyun ve omuzlar üzerinde bir deri çadırı oluşturmak için tırnağı kaldırın.
  3. Fareleri enjekte ederken elin ağırlığını masanın üzerine koyun. Farenin üzerine ağırlık koymak boğulmaya neden olabilir.
  4. Fareleri arka kısımda ağırlık ile yerinde tutun, ancak asla göğsü tutmayın.
  5. Maddeyi, hayvanın vücudundaki parmakların altındaki boşluğa enjekte edin.
2. Sert sınırlayıcılar
  1. Hayvanı, cildi yukarı çekecek kadar büyük bir açıklığa sahip bir emniyet cihazına yerleştirin.
  2. Cildi kavramak için forseps kullanmak gerekebilir.
  3. Çoğu hayvan, kısıtlama döndürülmedikçe uygun duruşta kalır.
  4. Enjeksiyon tamamlandıktan sonra cildin açıklıktan çekilmesini önleyen bir hacim enjekte etmeyin.
Kas içi enjeksiyon için arka uzuvun kısıtlanması gereklidir; safen ven, femoral ven veya femoral arterden kan çekilmesi; ve ayak tabanına enjeksiyon.
1. Farelerin ve küçük sıçanların taranması (200 g'ın altında)
  1. Hayvanı tırmıklayın ve elinizi karın açıkta kalacak şekilde çevirin.
  2. Ayağı parmakların arasına yerleştirerek arka ayağa erişin.
  3. Bu yöntem en iyi şekilde sadece ayak pedi enjeksiyonları için kullanılır.
2. T. rex kavrama veya ön bacak çapraz
  1. Bu yöntem iki kişi gerektirir: biri vücudun kısıtlanması için, diğeri uzuvun kısıtlanması ve enjeksiyonun performansı için.
  2. Safen ven, femoral ven veya artere veya enjeksiyon için kaslara erişim için ayağı kavrayarak farenin arka bacağını uzatın.
  3. Ayak tabanının enjeksiyonu için bacağınızı kancanın hemen üzerinde tutun.
3. Sert sınırlayıcılar
  1. Hayvanı önce bir emniyet tüpü kafasına yerleştirin.
  2. Kuyruğu ve arka kısımları tüpten geriye doğru nazikçe çekerek açığa çıkarın.
  3. Böğrün derisini kavrayarak ve dizini düz bir şekilde kilitleyerek bacağı hareketsiz hale getirin. Bu, fare veya sıçanda enjeksiyon için kuadriseps kasına erişim sağlar ve hayvanın kısıtlama cihazından çıkmasını önler.
  4. Büyük yuvaları olan cihazlarda, numune alma veya ayak pedi enjeksiyonu için kan damarlarına erişim için bacağı tüpün dışına yerleştirin.
  5. Düz uçlu parçalara sahip bu kısıtlama tüpleri, tüpün masanın üzerinde durmasına ve işlem sırasında cihazı stabilize etmesine izin verir.
  6. Hayvan bu şekilde güvence altına alındığından, tek bir teknisyen tarafından sıçanların enjeksiyonlarını veya kan örneklemesini yapmak mümkündür.
4. Esnek kısıtlama
  1. Esnek plastik kısıtlamalar, uzuvların maruz kalmasına uyum sağlamak için açıklıklar kesilerek değiştirilebilir.
  2. Yapılan açıklıklar her hayvan için veya belirli prosedürler için özelleştirilebilir.
  3. Hayvan bu şekilde güvence altına alındığından, tek bir teknisyenin sıçanlara enjeksiyon veya kan örneklemesi yapması mümkündür.