Yetiştirme İlk Besleme Zebra balığı için komple ve Güncelleme "Rotifer Polikültür Metodu"

Özet

Larva zebra balıkları zooplanktonlarla beslenmeye adapte edilmiştir. Laboratuvarda bu doğal özellikten yararlanmak, ilk beslenen balıkları canlı tuzlu su rotiferleri ile aynı sistemde birlikte yetiştirerek mümkündür. Bu "polikültür" stratejisi, minimum emek ve larvalara rahatsızlık vererek yüksek büyüme ve hayatta kalmayı teşvik eder.

Özet

Zebra balığı (Danio rerio), bilimin birçok alanında önemi giderek artan bir model organizmadır. Bu türün laboratuvarda yetiştirilmesinin en zorlu teknik yönlerinden biri, ilk beslenen larvaların yüksek büyüme ve hayatta kalma oranları ile gençlik aşamasına yetiştirilmesidir. Bu gelişim döneminin merkezi yönetim zorluğu, su kalitesinden ödün vermeden balıklara neredeyse sürekli olarak son derece besleyici yem maddeleri sağlama etrafında dönmektedir. Larva zebra balığı, su sütunundaki küçük zooplanktonlarla beslenmeye iyi adapte olduklarından, brachionid rotiferler, Artemia ve Paramecium gibi canlı av öğeleri, en azından balıklar gençlik aşamasına ulaşana ve işlenmiş diyetlerle verimli bir şekilde beslenebilene kadar, tercih edilen yemler olarak yaygın olarak kabul edilmektedir. Bu protokol, yumurtadan yeni çıkmış zebra balığı larvalarının aynı sistemde canlı tuzlu su rotiferleri (Brachionus plicatilis) ile birlikte kültürlendiği bir yöntemi tanımlar. Bu polikültür yaklaşımı, balıklara, aksi takdirde performansı sınırlayacak seviyelerde kimyasal atık üretmeden "talep üzerine", besin açısından zengin bir canlı besin kaynağı sağlar. Daha da önemlisi, sistem hem rotiferlerin doğal yüksek üretkenliğini hem de balıkların davranışsal tercihlerini kullandığından, bakımla ilgili işçilik düşüktür. Aşağıdaki protokol, dışsal beslemenin ilk 5 günü boyunca maksimum performansı destekleyen zebra balığı larvaları ve rotiferlerinin bir polikültüründe kullanılmak üzere rotifer üretimini (istenen herhangi bir seviyeye ölçeklenebilir) içeren güncellenmiş, adım adım bir prosedürü detaylandırmaktadır.

Giriş

Zebra balığı (Danio rerio), bilimsel disiplinlerin giderek artan sayıda kullanılan bir seçkin laboratuvar hayvanları da dahil olmak üzere, ancak gelişim genetiği, toksikoloji, davranış, yetiştiricilik, rejeneratif biyoloji ve birçok insan bozukluklarının ¹ modellenmesi ile sınırlı değildir ^{- 5.} Türlerin laboratuarda bakımı nispeten kolay olmasına rağmen, kendi kültürlerine ⁶ ile ilgili yönetim zorlukları bir dizi vardır. Bunların en göze çarpan balık ilk gaz mesane enflasyon ⁷ sonraki beslemeye başlar, özellikle larva yetiştiriciliği olduğunu. Büyüme 5 gün özellikle kritik ⁷ olmak - Normal, kontrollü koşullar altında, bu gelişimsel olay aşağıdaki 3 5 ~ at gün sonrası döllenme (dpf) oluşur. Yem öğeleri, Diges uygun büyüklükte olmalıdır - bu aşamada merkezi teknik zorluk yeterince birinci besleme larvaların beslenme ihtiyaçlarını karşılamak içinkültür tankları aşırı atık oluşturmadan neredeyse sürekli olarak cazip ve uygun ludur,. Tarihsel bu rutin su değişimi ^8,9 ile birlikte, tanklarda balık yem sayısız küçük miktarlarda sunarak genellikle elde edilmiştir. Bu yöntemler, bir dereceye kadar başarılı olsa da, bunlar, verimsiz yüksek işçilik girdileri gerektirir ve sadece değişken ve büyüme ve hayatta kalma ¹⁰ sınırlı fiyat döndürür.

Doğada, Zebra balığı larvaları muhtemelen su kolonu ¹¹ bol küçük zooplankton mevcut beslenirler. Bu nedenle, bu tür Paramecium, rotifer ve Artemia olarak canlı yayınları dahil larva protokolleri genellikle ⁷ en verimli. 2010 yılında, En İyi ve ortak yazarlar bu eksojen beslenme ¹² ilk 5 gün tuzlu su rotifer ile birlikte statik, tuzlu suda larva zebrafish büyümek mümkün olduğunu gösterdi. Koşum Bu yaklaşım,es rotifer kültürlerin doğal yüksek verimlilik, düşük emek girdisi ^12,13 ile larva büyüme ve hayatta kalma verimleri çok yüksek fiyatlar, su kirletmeden bol, oldukça besleyici av sağlamak. Son yıllarda, tüm dünyada laboratuvarlar giderek artan sayıda, bu protokolün varyasyonlarını benimsemiş ve birçok şimdi yetiştirme sistemlerinin ¹⁴ desteklemek için sürekli bir şekilde rotifer kültüre edilir.

Geçtiğimiz birkaç yıl içinde, rotifer / Zebra balığı polyculture ve rotifer üretimi hem yöntemleri rafine ve daha standart ve kolayca ölçeklenebilir olma geliştirilmiştir. Bu makalede, 1 için adım adım yönergeler) sürekli ve sağlam rotifer üretimi ve 2) eksojen beslenmenin ilk 5 gün balık sağlam büyümeyi desteklemek için kullanılan rotifer / Zebra balığı polikültür sisteminin kurulmasını sağlar.

Protokol

1. Rotifer Kültürü

1. 100 L Kültür Gemi kullanarak Kültür Sisteminin Temel Bileşenleri
   1. Rotifer kültür kurulumu için tüm bileşenleri toplayın. Rotifer kültür kurulum rotifer büyümek için bir kültür kabına (CV) oluşur; Benzer bir kap çıktıya da rotatorların (çıktıya da kültür kabı, FCV) korumak; yuvarlak dipli bir kuluçka kavanoz yosun yem karışımı (AFM) depolanması için (Reservoir, FR Yem); bir hava beslemesi (AS) CV, FCV'nin ve FR havalandırmak için; CV ve FCV içine yosun yem verilmesini kontrol etmek için bir ölçüm zamanlayıcısı (PMT) ile bir peristaltik pompa; ve CV içinde oturur bir ipi partikül filtresi (FPF).
      NOT: malzeme ve bileşenlerinin tam listesi Malzeme Listesi'nde sağlanmaktadır.
2. Yapılandırma
   1. Kültürler kolayca toplama cont içine uydurma bir drenaj yoluyla hasat edilebilir ve böylece bir stand veya masa üzerinde CV ve FCV ElevateAiner (Şekil 1). Her bir kültür kabı içinde sert bir boru uzunluğu konusundaki bağlamak için esnek bir hava besleme hortumu kullanın. Boru CV veya FCV altına hava sağlamak için yeterince uzun olduğundan emin olun.
   2. AFM içeren FR altına uzanan sert bir boru uzunluğu AS bağlanmak için bir küçük kapasiteli hava hattı kullanın. Hava akışını düzenleyen, her hava hattına bir valf takın. Besleme boru ile PMT ile FR bağlayın ve üstüne yakın, CV / FCV'nin tarafına açılan bir deliğe PMT hortumunu çalıştırın. Şekil 1.
3. Başlamak
   1. Ters osmoz, su (RO) ile birlikte kullanılabilir hacmi% 90 kültür kabı doldurun. RO mevcut değilse, temiz, dechlorinated belediye su kullanın; Bununla birlikte, bir biyo-güvenlik risk değerlendirmesi herhangi bir potansiyel olarak patojenik organizmalar kaynağı, su içinde mevcut olmasını sağlamak için gerçekleştirilmelidir. NOT: Bu tür bir analiz gerçekleştirilebilirHerhangi bir yetkili su test laboratuarı tarafından.
   2. 15 g / L tuzluluk ulaşmak için akvaryum tuz ile kültür gemi su Doz. Bir "yuvarlanan kaynama" korur, böylece teknenin içine hava akışını alan ve tamamen havalandırma ile eriyene kadar yavaşça kültür teknesine tuz ölçülen miktarını ekleyin. Tam oksijen sağlamak için> 1 saat boyunca su havalandırma devam edin.
   3. Yosun yem karışımı olun. Temiz 3 L için taze (0 ppm) suda NaHCO ₃ 100 g ve amonyak nötrleştirici (sodyum hydroxymethylsulfonate) 100 g ilave kloru giderilmiş. Bu son reajanı kültürü ekipman sterilize musluk suyu ya da ağartma kalıntılarından herhangi bir kalıntı klor nötrleştirme edilmesi ilave yararını sağlarlar. Bu bileşiklerin tamamen eriyene olduğundan emin olmak için önemlidir. Daha sonra yosun konsantresi (biyokütle kuru ağırlık ~% 15) 1 L ilave edin. 4 ° C 'de FR ve saklamak için besleme karışımı ekleyin.
   4. 10 milyon - 5 marş kültürü ekle havalandırılmış 15 g / L tuzluluk su içeren CV Brachionus plicatilis rotifer. Rotiferler nakliye ya da depolama sırasında soğutulmuş, bunlar olmalıdır yavaş yavaş kültür kabı içinde suyun sıcaklığına alıştırıldı (30 dakika ya da daha uzun sırasında) (25-27 ° C).
   5. PMT açın ve rotifer kültürü kabına yosun besleme pompalamaya başlar. PMT zamanlayıcı özelliğini kullanarak, o ~ yosun yem karışımı 1.6 ml günde, kültürde milyon rotifer başına teslim edilir, böylece yosun besleme karışımının doğum hızını ayarlamak. 24 saatlik bir süre boyunca düzenli aralıklarla küçük porsiyonlar halinde beslenmeye dağıtın; besleme daha sık, daha iyi.
   6. El belirli bir süre (örneğin, 1 dakika) için PMT açarak pompanın teslim oranını kalibre ve bir silindire veya behere bu aralık sırasında pompalar yosun toplamak. Örneğin, PMT dozlarının alg 5 ml 1 dakika içinde, o doz hızı olurdu5 ml yosun / dakika.
   7. 1.6 ml, milyonlarca, mevcut rotifer sayısı çarpılarak gerekli günlük beslenme oranını hesaplayın. Örneğin, 100,000,000 rotifer bir popülasyon ile Rotifer kültürü ~ gün (100 x 1.6 mi) başına besleme 160 ml gerektirecektir.
   8. 24 saatlik bir süre boyunca düzenli aralıklarla günlük toplam yem ihtiyacını doz PMT ayarlayın. Örneğin, 160 ml'lik bir toplam günlük besleme miktarı teslim kısımlar halinde teslim edilebilmektedir kez 8 kez günlük 4 dakika boyunca 5 ml / dk'lık bir dozlama pompası oranı ile bir PMT seti kullanılarak bir 24 saatlik bir süre boyunca her 3 st (5 ml / dakika x 4 dak = 20 ml x 8 besleme = 160 ml) eklenmiştir.
   9. Hasat öncesi, 72 saat - bu gerekli nüfus üretir kadar kültür 48, tipik, büyümeye izin verin. 24 saatte, yukarı post-başlatmak kültür kabına ipi parçacık filtreleri eklemek ve normal bakım başlar.
4. Bakım
   NOT: Kültür sürekli olarak çalışır ve rutin gerektirirİdeal aşağıdaki sırayla, her gün aynı saatte yapılmalıdır e bakım.
   1. Temiz mevcut hacmin% 90 FCV'nin doldurun, 10 g / L akvaryum tuzları ile dozda tatlı su, kloru giderilmiş. Su kuyusu karışık olduğunu ve tuz hepsi tamamen çözülür emin olun. Bir "yuvarlanan kaynatın" korur, böylece damar içine hava akışını ayarlayın. Bir refraktometre ile tuzluluk ölçün ve tuzluluk 10 g / L olduğundan emin olun. Bunu aşmak için bu hedefe ulaşmak değil, kritik öneme sahiptir.
   2. Kültür farklı bölgelerinden gelen, 3 ml bir transfer pipet veya autopipettor kullanarak her - daha sonra 2 3 örnekleri toplamak, kültür, iyi karışmış olduğundan emin olun: CV rotifer tadına bakın. Bir tüp içinde, bu örnekleri birleştirin ve uygun boyutu (örneğin, 10 mi) şişesine yerleştirilir.
   3. Aktarım 1 - bir petri kabı üzerine birleştirilen numunenin 2 ml bir tahlil mikroskobu altında görüntülendi böylece. Kültür kalitesini kontrol edin (davranışını yüzmerotiferler, müstakil yumurta varlığı, kirletici protozoa).
   4. Örnek 50% Lugols iyot solüsyonu 100 ul ekleyerek kalan Birleştirilen numunede rotatorların hareketsiz. Saniyeler içinde Lugols eklenmesinden sonra, yüzme durdurmak için rotifer gözlemlemek. Şimdi, kolayca rotifer saymak.
      Not: Etanol, seyreltik ağartma ya da sirke Lugols yerine kullanılabilir. Sirke (2 damla / 10 ml) olmanın avantajları vardır tehlikesiz, ve rotifer sözleşme yapma olamaz ağartıcı ve iyot çözümleri gibi depolama gücünü kaybetme, böylece kirpikler corona ve "ayak" genişletilmiş kalır ve hayvanlar daha doğal görünüyor.
   5. Daha sonra hızlı bir plastik pipet bir ~ 2 ml'lik alt örnek almak, (hareketsiz rotiferler hızla yerleşmek) numune iyice karıştırılır olduğundan emin olun ve bir Sedgewick-Mertek sayma slayt içine 1 ml dağıtmak (20 x 50 1 mm kareler) (Şekil 2 ). Diseksiyon veya bileşik mikroskop kullanarak, bozulmamış rotifer ve t saymakBu rotifer bağlı yumurta otal numarası (Şekil 2). ~ 100 rotifer saymak için gerekli olarak slayt alanının kadar sayın. Ml başına rotifer sayısını hesaplayın ve bir elektronik tablo veya defterine bu kaydedin.
   6. Hasat ~ CV rotifer hacminin% 30: yavaşça CV altındaki vanayı açın, hava temini ve diş ipi filtresini çıkarın ve su 53 mikron elek ile birlikte bir plankton toplayıcıya akmasını sağlayın. Bir kova ya da drenaja filtreleme sonra kolektör altından dışarı akan suyu toplamak. Rotifer zarar görmesini önlemek için orta akışına nazik kullanın. Rotifer ekranda kurumasına izin vermeyin.
   7. Tutarlılık nedenlerden dolayı, rotiferler standart bir sayıda, her gün FCV oluşturulması tavsiye edilir. Bu nedenle, bilinen CV rotifer yoğunluğu ve hasat hacmine göre, tutarlı bir nihai yoğunluk elde etmek FCV toplam hacmini ayarlamak (örn., 1500 rotiferler / ml). Hasat roti ekleFCV için fers: (- 15 g / L 10) yavaşça temiz tuzlu su dolu bir yıkama şişesi kullanılarak tahsilat ekranından rotifer aktarın. FCV üzerinde ekranı ters çevirin ve tuzlu su hafif bir akım ile FCV'nin içine rotifer yıkayın. FCV için (~ günde milyon rotifer başına 1.57 ml) beslemeyi sağlamak için PMT başlatın.
   8. Temiz, yumuşak bir naylon fırça veya ovma pad ile CV tüm içini fırçalayın.
   9. Suyun hacmi, hasat kaybı karşılamak üzere, bir 5 galonluk bir kova temiz RO su ölçülü bir miktarda tuz, uygun miktarının ilave edilmesi ile 15 g / L su için yeni bir karışımını yapın. Kova su tuz ekleyin ve tamamen eriyene kadar kuvvetlice karıştırın ve sonra CV ekleyin.
   10. Bir lavaboda bir yüksek basınçlı püskürtme kullanarak, enkaz serbest kalıncaya kadar ipi filtreyi durulayın ve ardından CV iade.
   11. Rotifer / ml günlük sayımına göre, her dozlama olayın süresini değiştirerek CV teslim alglerin yem oranlarını ayarlayın.Teslim edilecek besleme uygun miktarını belirlemek için, yukarıdaki aşama 1.3.8 verilen hesaplamalar kullanın.
   12. Yaklaşık 24 saat sonra, işlemi tekrarlayın. Yukarıda tarif edilen (- 1.4.10 1.4.2 adımları) ile aynı şekilde (bir önceki gün için gerekli değil) FCV kalan rotatorların hasat başlayın. Taze ve temiz kloru giderilmiş su (5 g / L tuz) 2 L bunları konsantre edin. Bu yedek kaynağı olarak 4 ° C'de saklandı veya bu protokolde tarif edilenin ötesinde, balık sonraki aşamalarını beslemek için de kullanılabilir.
       NOT: Bu protokol 2 kadar izin - CV rotifer ciddi sonuçları olmadan hasat atlandığını tahammül çünkü, (normal otomatik besleme) ile azaltılmış kültür bakımı 3 gün.

2. Polikültür

1. Kurmak
   1. Nazikçe steril fis ile durulama ardından çay-süzgecinden kökenli embriyolar dökülmesi ve bir yumurtlama olayı Zebra balığı embriyolar toplayınh su (veya uygun koşullu çözümün herhangi diğer non-kontamine kaynak; örneğin, embriyo orta, E3, vb) petri kutularının içine bir yıkama şişesinden.
   2. 5 gün süre ile çanak başına 50 embriyo - 40 arasında bir yoğunlukta petri kaplarına 28 ° C - 25 ° embriyolar inkübe edin.
   3. 5 gün sonrası fertilizasyon veya yumurtadan larva% 90 daha aktif su kolonunda kadar yüzme üzerindeki polikültür fazı başlayın.
2. Aşılama
   1. Doğrudan 3.5 L kreş tankına FCV'nin gelen rotifer kültürü 500 ml ekleyin; Rotifer kültür suyun dahil polyculture sırasında rotifer besin içeriği tutar alg besleme sağlar.
   2. Yavaşça kreş tankına tek petri larvaları dökün. Hiçbir larvalar çanak kalmadığından emin olun.
   3. 1 L'lik bir son hacim ve son bir s ulaşmak için tanka bir sirkülasyon sisteminde veya özel su kaynağından, temiz durumunu balık suyu 500 ml ilave edilir5 g / L alinity.
      NOT: Bu tuzluluk Zebra balığı larvaları hayatta olumsuz tuzluluk olumsuz etkiledi olacak> 7 g / L ve rotifer hayatta ise etkilenecek çünkü kritik tuzluluk <2 g / L ise.
3. Polikültür aşaması
   NOT: polikültür fazı (gün 5-9 sonrası fertilizasyon karşılık, 5 gün toplam) en fazla 4 gün sonrası aşılama için sürmelidir.
   1. Rotifer ve balık mevcut ve büyüyen olduğundan emin olmak için, bu dönemde en az bir kez günde polikültür tankı gözlemleyin. Rotifer su kolonu boyunca görünür olduğundan emin olun. Fishs rotifer arasında yüzme, su sütunu içinde de görünür olduğundan emin olun.
   2. Tanktan normal su akışını başlatın. Bir ekran yerleştirin veya tankın dışarı atılır olmadığını larvaların sağlamak için drenaj portu üzerinden bölme.
      NOT: Bu fazın sonunda, balık, Artemia gibi daha büyük avlarını tüketmek için yeterince büyük olacak125 mikron - 75 boyut aralığında nauplii veya işlenmiş yem öğeler.
      Not: Örnek polyculture tankı içindeki rotiferin popülasyon dinamikleri adımları 1.4.2 tarif edildiği gibi aynı şekilde tanktan rotatorların / sayma örnekleme ile ölçüldü - 1.4.5. Tamamlanana kadar bu polyculture aşamasının başından itibaren günde bir kez yapılmıştır.

Sonuçlar

Burada açıklanan sürekli rotifer kültürü sistemi dinamik ve günlük beslenme ve hasat oranlarında farklılıklar varsa rotifer numaraları zamanla küçük bir ölçüde dalgalanması için normaldir. Boston Çocuk Hastanesi su tesislerinde aktif kültürlerin bir rotiferler nüfusu, yukarıda tarif edilen şekilde hazırlanmış, 30 gün (Şekil 3) izlendi. Bu süre içinde ortalama kültür yoğunluğu 1.330 rotiferler / ml'lik bir maksimum ve 510 rotiferler / ml'lik bir minimum, ...

Tartışma

Aynı tankta rotifer birlikte Zebra balığı larvaları ilk besleme balık beslemek için sürekli rotifer kültürü sisteminin kurulması ve bakımı ve kültüre: erken larva zebrafish beslenmesi için rotifer polikültür yönteminin başarılı bir şekilde uygulanması etkili iki görevler için protokoller gerektirir.

İlk Lawrence ve yazarları ¹⁴ tarafından açıklanan Zebra balığı laboratuvarlar için sürekli bir tuzlu su rotifer üretim sistemi kurulum değiştirilmiş ve uygulamada hem daha sağlam ve ev...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Rotifer Kültür Altyapısı
100 L Kültür Kabı	Aquaneering	Özel	Polikarbonat kültür kabı, konik tabanlı, tahliye vanalı
5 Galon Kültür Kovası Kiti	Reed Mariculture	CCS Başlangıç Kiti	Küçük tesisler için küçük hacimli kültür kabı
Sert Şeffaf Boru 1/2 "OD, 36 inç	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Hava dağıtımı için sert şeffaf boru
Mesh tüp	Pentair Aquatic Ecosystems	RT444X	Diş ipi filtresi için örgü tüp desteği
Rotifer Diş İpi	Kamış Marikültür	Rotifer diş ipi 12 "x 42"	Partikül atık tuzağı
Peristaltik Ölçüm Zamanlayıcı Pompası, 5 GPD	Grainger	38M003	Rotiferlere besleme dozajlamak için zamanlayıcılı ölçüm pompası
Peristaltik Ölçüm Zamanlayıcı Pompası, 1-100 mL/saat (daha küçük ölçekli kültür için)	Coral Vue	SKU: IC-LQD-DSR	Rotiferlere besleme dozajlamak için zamanlayıcılı ölçüm pompası
Silikon Boru	Rotifer kabına yosun iletimi için	Cole Parmer
Sert Şeffaf Boru "OD, 36"	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Yosun macununa hava dağıtımı için sert şeffaf boru
Sert Şeffaf Boru OD, 36"	Pentair Aquatic Ecosystems	16025	Yosun dağıtımı için sert şeffaf boru
Rotifers
Live Rotiferler Brachionus plicatilis Tip L	Kamış Deniz Ürünleri	Yetiştiriciliği Tip L Sistem	başlatma için 5 milyon Rotifer stok kültürü
Rotifer Feed
Sodyum hidroksimetilsülfonat	Kamış Deniz Ürünleri Yetiştiriciliği	ClorAm-X® 1 lb küvet	Yosun besleme karışımı için amonyak azaltıcı
Sodyum Bikarbonat	Fisher Scientific	S25533B	Yosun yem karışımı için pH tamponu
Mikroalg konsantresi	Kamış Deniz Ürünleri	Yetiştiriciliği Rotigrow Plus® 1 litrelik torba	Besinsel olarak optimize edilmiş rotifer yemi
RG Komple	Kamış Deniz Ürünleri Yetiştiriciliği	RG Komple 6 oz şişe	Küçük ölçekli kültürler için hepsi bir arada mikroalg bazlı yem
Water Hazırlama
Reef Crystals Reef Salt	That Fish Place	198210	Kültür suyu yapmak için tuz (NOT: bu öğe yalnızca bir örnektir; herhangi bir kirletici içermeyen tuz formülasyonu kullanılabilir).
Refraktometre	Pentair Sucul Ekosistemler	SR6	tuzluluk
ölçümü < güçlü > Rotifer Kültür Ekipmanları< / strong>< / em >
Plankton Kollektörleri 12" Çap, 53 mikron	Pentair Su Ekosistemleri	BBPC20	Rotiferleri toplamak için örgü elek
Ovma Pedleri	Pentair Su Ekosistemleri	SCR-58	Kültür gemilerinin içini temizlemek için ovma pedi
Ovma Fırçası
Kovası	Grainger Kaynağı	43Y530	Kültür suyunu karıştırmak için dereceli kova
Kuluçka Kavanozu	Pentair Su Ekosistemleri	J30	Yosun yem karışımının depolanması
Lugol' s Çözelti, Seyreltik	Fisher Scientific	S99481	saymak için canlı rotiferleri hareketsiz hale getirmek için kullanılır
	Pentair Aquatic Eco-Systems	M415	Sayma rotiferleri
Çeşitli
Çay Süzgeci	Mutfak İşleri	971972	Yumurtlamadan sonra zebra balığı embriyolarını toplamak için kullanılır