Name: Mikroakışkan Perifusion Cihaz içindeki Multi-Parametrik Islet Perifusion Sistemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-26T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Öğrenin, mikroakışkan perifüzyon cihazı kullanarak pankreatik adacıklardan dinamik insülin salınımı, kalsiyum akışı ve mitokondriyal potansiyel değişikliklerini eşzamanlı olarak nasıl ölçebilirsiniz. Bu yöntem diyabet ve metabolik bozukluklar araştırmalarında değerlidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Adeola Adewola, NIH / NCRR (U42RR023245) Jose Oberholzer ve Chicago Diyabet Proje AAUW uluslararası burs tarafından desteklenmiştir.

3-katmanlı mikroakışkan perifusion cihazın A. mikroimalat Alt Eh Master Protokolü (150 mm derin kuyu) <ol><li> Gofret gerekirse bir jilet kullanarak temizleyin. Aseton, Metanol ve IPA ile temizleyin. 30 saniye için 50 Watt plazma işlemi gerçekleştirin </li><li> Spin SU8-100 @ 2000 rpm. Adım 1: 500 dak, 10 sn, 100 dev / s, Adım 2: 2000 rpm, 30 s, 300 devir / s]. [NOT: SU8 iplik sonra cımbız ile gofret tutmayın] </li><li> Yumuşak fırında 65 gofret ° C 20 dakika ve 95 ° C de 50 dk. </li><li> Gofret, istenilen bir maske aracılığıyla UV ışınlarına maruz kalmaktadır. Doz 150 mikron yükseklik için 650 mJ / cm 2. </li><li> Mesaj maruz gofret 65 ° C 1 dakika ve 95 ° C de 12 dakika pişirin. </li><li> 15 dakika SU8 geliştirici gofret geliştirin. </li></ol> Mikrokanal Yüksek Lisans Protokolü (500 mm derin kuyu) <ol><li> Gofret gerekirse bir jilet kullanarak temizleyin. Aseton, Metanol ve IPA ile temizleyin. 30 saniye için 50 Watt plazma işlemi gerçekleştirin </li><li> Spin SU8-2150 @ 1000 rpm. Adım 1: 500 dak, 10 sn, 100 dev / s, Adım 2: 1000 rpm, 30 s, 300 devir / s]. </li><li> Yumuşak fırında 65 gofret ° C'de 15 dakika ve 95 ° C 2 saat ve 30 dakika. </li><li> Gofret, istenilen bir maske aracılığıyla UV ışınlarına maruz kalmaktadır. 650 mikron yükseklik için maruz kalma dozu 685 mJ / cm 2 . </li><li> Mesaj maruz gofret 65 ° C 5 dakika ve 95 ° C de 35 dakika pişirin. </li><li> 20-30 dakika süreyle SU8 geliştirici gofret geliştirin. </li></ol> PDMS çözüm hazırlığı <ol><li> Polidimetilsiloksan (PDMS) çözümü 10 parça silikon elastomer standart bir Sylgard 184 kiti 1 kısım sertleştirici iyice karıştırılarak hazırlanır. </li><li> PDMS çözüm karıştırma işlemi sırasında oluşturulan kabarcıklar, bir vakum desikatörde kullanarak kaldırılır. </li><li> Kabarcık PDMS çözüm yavaş SU8 yüksek lisans ve üçüncü katman için boş bir Petri kabı üzerine sürülür. </li><li> Sıcak plaka sıcaklığı 75 ° C ve PDMS 2 saat bu sıcaklıkta kür </li><li> Uygun boyutta delgeç kullanılarak girişleri, çıkışları ve döviz kuyu açılmıştır. </li><li> Katmanları, bir el plazma cihazı kullanılarak bir cam slayt (büyüklüğü 0.1 mm) bir araya yapıştırılır. </li></ol> B. deney düzeneği <ol><li> Mikro cihaz üzerinden akış% 70 etanol sterilize etmek. Akış DI su etanol yıkayın. Mikrokanallı duvarları olmayan insülin özel adsorpsiyon önlemek için cihaz üzerinden 50 ml% 0.5 BSA serpmek. </li><li> Glukoz rampa degrade ve pompaları gradyanlar kararlı olduğundan emin olmak için test şırınga ile iletişim LabView yazılımı tarafından oluşturulan diğer ilgili gradiyent. </li><li> 37 ° C de 30 dakika boyunca 5 mcM Fura-2/AM (bir kalsiyum göstergesi, Moleküler probları, CA) ve 2.5 mcM rodamin 123 (Rh123, mitokondriyal bir potansiyelleri göstergesi, Sigma, MO) 25-30 fareler adacıklar ile inkübe edildi. 2 mM glukoz içeren Krebs-Ringer tampon (KRB) </li><li> Fareler adacıklar dikkatle giriş bağlantı noktası üzerinden mikroakışkan perifusion cihazı pipetlenir. </li><li> Tygon tüp ve bir Y-konektör ve fraksiyon toplayıcı çıkış kullanarak şırınga pompaları için giriş bağlayarak mikroakışkan ağ kurulumu. Cihaz mikroskop (37 ° C) ısıtma aşamasında oturur ve giriş tüp, 37 oda ve çözüm sıcaklığı tutmak için bir ocak ısıtmalı ° C </li><li> Hemen kurulumdan sonra, farelerin adacıklar KRB sonra, 10 dakika ve 25 dakika glukoz rampası (2mm 25mm) için 2 mM glukoz içeren perifused. </li><li> Zaman atlamalı görüntüleri her 15 sn SimplePCI yazılım tarafından toplanır ve analiz edilir. Perifusate da insülin salgılanması ELISA kiti kullanılarak analiz etmek için bir fraksiyon toplayıcı kullanarak her dakika toplanır. </li></ol> Temsilcisi Sonuçlar Fare adacıklar 2-25 mM glukoz doğrusal bir degrade ile perifused. Şekil 1'de gösterildiği gibi, kalsiyum akını ve insülin salgılanması 6 mM glukoz ilgili perifusion yaklaşık 13 dakika sonra tetiklenir. Mitokondrial potansiyelleri değişiklikler, yaklaşık 11 dakika beklendiği gibi daha erken görülür. Bu veri, adacık fizyoloji karakterize etmek için bu mikroakışkan ağını kullanarak avantaj göstermektedir. <img src="/files/ftp_upload/1649/1649fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1: Adacık hücre stimülasyonu için fizyolojik tepkiler .

<ol><li>Mohammed, J. S., Wang, Y., Harvat, T. A., Oberholzer, J., Eddington, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+device+for+multimodal+characterization+of+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Microfluidic device for multimodal characterization of pancreatic islets.</a> Lab Chip. 9, 97-106 (2009).</li>
</ol>

Geleneksel adacık perifusion sistemleri (macroscale ve microscale), kurulum ve tasarım, yüksek teknik gereklilikler ve sistem kullanıcı öngörülen kimyasal degradeler oluşturmak için zorluk karmaşık dahil olmak üzere, bazı kısıtlamalar var. Burada açıklanan mikroakışkan perifusion sistemi basit tasarım ve imalat geometri ile bu sınırlamaların üstesinden gelir. Daha da önemlisi, bu sistem adacık fizyoloji çalışmak için benzersiz bir araç olarak sağlayan floresan görüntüleme yaklaşımı ile entegre edilebilir. Yüksek sinyal-...

<table><tbody><tr><td>60ml Şırıngalar</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fura-2 floresan boyası</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rhodamine123 Floresan boyası</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glikoz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serum Albumini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>30&quot; Silikon borular</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16 x 1/8in</td></tr><tr><td>1.5ml Eppendorf tüpleri</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Y-konnektörler</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221; &amp;amp; 4mm</td></tr><tr><td>Şırınga konnektörleri</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>dişi luer tapa 1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>Düz konnektörler</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>Dirsek konnektör</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>Havard şırınga pompası</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Perifüzyon cihazı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isıtıcı tabla</td><td>PMC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Termometre</td><td>Omega Engineering, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fraksiyon toplayıcı</td><td>Gibson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipetleyici</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Evirme epifloresan mikroskop</td><td>Olympus Corporation</td><td>IX71</td><td></td></tr><tr><td>Yükleme bağlılı cihaz (CCD)</td><td>QImaging</td><td></td><td>Retiga-SRV, Fast 1394</td></tr></tbody></table>

mikroakışkan perifusion cihaz içindeki multi-parametrik islet perifusion sistemi

A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device

Mikroakışkan bir adacık perifusion cihazı, çok sayıda adacık ve kalsiyum girişini ve mitokondriyal potansiyel değişiklikleri eş zamanlı olarak floresan görüntüleme dinamik insülin salgılanması değerlendirilmesi için geliştirilmiştir. Cihaz üç tabakadan oluşur: İlk katman maruz kaldığında, maruz kalan yüzey alanını adacıklar akışı ve en üst düzeye çıkarmak için adacıklar hareketsiz yardımcı microscale kuyular (500 mikron çapında ve 150 mikron derinliğinde) bir dizi içerir; ikinci kat bir genelge içerir perifusion odası (3 mm derinliğinde, 7 mm çapında) ve üçüncü katman bir giriş karıştırma kanal içerdiğini fanlar önce optimize etmek için perifusion odasına enjeksiyon (genişliği 2 mm, 19 mm uzunluğunda, ve yüksekliği 500 mm) karıştırma verimlilik perifusion odasına girmeden önce. Doğrusal bir çan şekli de dahil olmak üzere çeşitli glukoz degradeler, ve kare şekiller oluşturma mikroakışkan perifusion ağı oluşturulacak ve gösterilmiştir.

Mikroakışkan bir adacık perifusion cihazı, çok sayıda adacık ve kalsiyum girişini ve mitokondriyal potansiyel değişiklikleri eş zamanlı olarak floresan görüntüleme dinamik insülin salgılanması değerlendirilmesi için geliştirilmiştir.

Mikroakışkan Perifusion Cihaz içindeki Multi-Parametrik Islet Perifusion Sistemi

Birden fazla adacığın dinamik insülin sekresyonunun değerlendirilmesi ve eş zamanlı floresan ... için mikroakışkan bir adacık perifüzyon cihazı geliştirilmiştir.

Bu sunumda, insülin sekretagoglarına yanıt olarak pankreas adacıklarının dinamik insülin salgısının, kalsiyum girişinin ve mitokondriyal potansiyel değişimlerinin eş zamanlı ölçümü için mikroakışkan tabanlı bir adacık perfüzyon sistemini tanıtacağız. Perfüzyon sistemi; üç katmanlı bir mikroakışkan cihaz, şırınga pompaları ve bir fraksiyon toplayıcıdan oluşmaktadır. Sekretagogların tetiklediği kalsiyum girişi ve mitokondriyal potansiyeller, floresan mikroskop düzeneği kullanılarak görüntülenmektedir.Merhaba, benim adım Ola, Illinois Üniversitesi Chicago Kampüsü Transplant Cerrahisi Bölümü'nde Dr. Val Holter'in laboratuvarından bir araştırmacıyım. Merhaba, ben de Holter'in laboratuvarından Don Lee. Merhaba, ben de Dr. Val Holter'in laboratuvarından Tricia Hart.Bugün sizlere doğrusal bir glikoz gradyanı kullanarak eş zamanlı göz kapağı görüntüleme prosedürünü göstereceğiz. Göz kapağı görsellerini ve fonksiyonlarını incelemek için laboratuvarımızda bu prosedürü kullandık. Öyleyse başlayalım.Bu prosedür için kullanılan mikroakışkan aygıt, standart fotolitografi ile oluşturulmuş kürlenmiş PDMS'in üç katmanından monte edilmiştir. Silikon bir mastardan oluşturulan ilk katman, gözcükleri nazikçe yerinde tutacak, 150 mikrometre derinliğinde ve 500 mikrometre çapında mikroakışkan aygıt kuyucuklarına sahiptir. İkinci katman, 500 mikrometre yüksekliğinde ve iki milimetre genişliğinde kanallara sahiptir.Çözelti değişimini iyileştirmek için akışı yaymak amacıyla kanalın orta kısmı genişletilmiştir. Cihazın içinde, katmanın ortasına üç milimetre yüksekliğinde ve yedi milimetre genişliğinde bir delik açılarak değişim kuyusu oluşturulur. Üçüncü katman, kalın bir PDMS plakadır. Bu katmanı hazırlamak için, kanalın giriş ve çıkışıyla hizalı olacak şekilde her iki tarafa küçük delikler açın.Üç katmanın tamamı oluşturulduktan sonra, ikinci katman aşamasında, kuyucuklar yukarı bakacak şekilde ilk katman bir lam üzerine yapıştırılır. Ardından, kanal aralıkları yukarıya gelecek şekilde ikinci katman, ilk katmana yapıştırılır. Son olarak, üçüncü katman ikinci katmana yapıştırılır.Katmanlar birbirine bağlandığında, cihaz deneylerde kullanılmaya hazır hale gelir. 70% etanol ile doldurulmuş ve Tygon borularla cihazın giriş portuna bağlanmış 10 mililitrelik bir şırınga kullanarak, etanolü cihaz kanallarından geçirerek mikroakışkan cihazı sterilize edin. Ardından, aynı düzeneği kullanarak etanolü temizlemek için deiyonize su akıtın.Cihaz sterilize edildikten sonra, tigon borular kullanılarak ısıtmalı bir mikroskop tablasına yerleştirin; yüksek ve düşük glikoz çözeltileri içeren şırınga pompalarını bir Y konnektöre bağlayın. Ardından, bu konnektörü mikroakışkan cihazın girişine bağlayın. Mikroakışkan cihazın çıkışını ise bir fraksiyon toplayıcıya bağlayın.Hortumun 37 °C'lik bir ısıtıcı tabla üzerinde olduğundan emin olun. Çözeltilerin deney boyunca fizyolojik sıcaklıkta tutulması oldukça önemlidir. Ardından, deney sırasında mikroakışkan ağ üzerinden perfüze edilecek glikoz gradyanını başlatmak için LabVIEW programını kullanın.Bu yazılım, iki glikoz çözeltisinin akış hızını değiştirir. Şırınga pompaları kontrol edilerek burada doğrusal, çan şeklinde ve kare şeklinde çeşitli glikoz gradyan profilleri oluşturulabilir. Bu deneyde, hesaplanan beklenen değerlerle karşılaştırmalı olarak; iki glikoz çözeltisinin 0,01 milliliters per minute değişken akış hızıyla ve çözeltiler karıştırıldıktan sonra cihaza giren 0.25 milliliters per minute sabit akış hızıyla, 2 millimolar ile 25 millimolar arası doğrusal glikoz gradyanı kullanılacaktır.Uygun gradyan profili seçildikten sonra, gradyanın stabilitesini test edin. İlk olarak gradyan sistemini başlatın. Ardından fraksiyon toplayıcıyı başlatın ve sekiz adet bir mililitrelik eppendorf tüpüne perfüzyon toplayın.Ardından, bir glukometre kullanarak her tüpteki glukoz konsantrasyonunu test edin ve verileri Excel'e kaydedin. Glukometreden elde edilen sonuçları analiz edin. Daha sonra, yüksek glukoz içeren şırıngayı, Krebs ringer tamponu içinde %0.5 BSA çözeltisi içeren bir şırıngayla değiştirin ve cihazdan dakikada 1 mL hızla 50 mL PERFÜZYON gerçekleştirin.Bu işlem, BSA ile perfüzyon sonrası salgılanan insülin seviyeleri daha sonra ölçülürken doğruluğu sağlamak amacıyla, insülinin mikrokanal duvarlarına spesifik olmayan absorbsiyonunu önleyecektir. Bunu yüksek glikoz çözeltisi ile değiştirin. Elle seçilmiş 25 ila 30 fare gözletini, kalsiyum indikatör boyası fira 2:00 AM ve mitokondriyal potansiyel indikatör boyası rumine 1 2 3 içeren 2 mM glikozlu Krebs ringer tamponu içinde süspande edin ve 37 °C'de 30 dakika inkübe edin.İnkübasyonun ardından, cihazı perfüzyon sisteminden ayırın ve adacıkları içeren pipet ucunu giriş portuna yerleştirerek adacıkları mikroakışkan cihaza dikkatlice yükleyin; yükleme işlemi tamamlandıktan sonra adacıkları yavaşça dağıtın ve cihazı perfüzyon sistemine yeniden bağlayın. Hava kabarcığı oluşmamasına özen gösterin. Ardından, adacıkları 2 mM glukoz içeren KRB ile perfüze etmeye başlamak için şırınga pompasını çalıştırın.Bu adımda, ortamdaki fazla boya yıkanacak, deney sırasında kullanılacak eksitasyon ve emisyon filtre setleri ile pozlama süreleri belirlenecektir. Ardından, düşük glukoz çözeltisiyle gözlemleri yaparken, fraksiyon toplayıcıyı bir dakikalık aralıklarla toplama yapacak şekilde ayarlayın. Görüntülemek istediğiniz alanları veya göz açıklıklarını tanımlamak için basit PCI görüntüleme yazılımındaki ilgi alanı veya ROI aracını kullanın.Ayrıca, hücreler 10 dakika boyunca yıkandıktan sonra çıkarılacak olan arka plan alanını daire içine alın, glikoz gradyan fraksiyon toplayıcıyı başlatın ve zaman ayarlı (time-lapse) görüntülemeyi başlatın. 30 dakika sonra, yazılımı ve yüksek glikoz şırınga pompasını kapatın. Yüksek glikozun etkisini temizlemek için düşük glikoz ile perfüzyona devam edin.10 dakika sonra, şırınga pompasını kapatarak düşük glikoz akışını durdurun. Perfüzyonun ardından, analiz için verileri excel'e aktarın. Perfüzata salgılanan insülin miktarı, ELA fare adacık kiti ile belirlenebilir.Burada gösterildiği gibi, 2 ile 25 millimolar glikozdan oluşan doğrusal bir gradyan ile perfüze edildi. Kalsiyum girişi ve insülin salınımı, altı millimolar glikozla uyumlu olan yaklaşık 13 dakikalık perfüzyondan sonra tetiklenir. Mitokondriyal potansiyellerdeki değişimler, beklendiği üzere daha erken, yaklaşık 11. dakikada görülür.Bu veriler, eyelet fizyolojisini karakterize etmek için bu mikroakışkan ağın kullanılmasının avantajını ortaya koymaktadır. Eyelet fizyolojisi çalışması için mikroakışkan parafüzyon cihazımızın nasıl kullanılacağını göstermiş olduk. Bu prosedürü uygularken, cihazda hava kabarcığı bulunmadığından emin olmak önemlidir; çünkü bu durum, deney sırasında eyeletlerin hareket etmesine neden olabilir.Ayrıca, gözlemlere müdahale etmeden akış hızı dakikada 1 ml'ye kadar ayarlanabilir. İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler, deneyinizde başarılar dileriz.

a-multi-parametric-islet-perifusion-system-within-microfluidic

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz elastomerik polidimetilsiloksan (PDMS)-tabanlı photolithographically tanımlanan hassas birimleri kapatın ve özellik için ekstra enerji ihtiyacını Mikrovalf dizileri imalat ve otomatikleştirmek için protokolleri göstermektedir. Bir paralel subnanoliter ses mikseri ve entegre bir mikroakışkan perfüzyon sistemi sunulmaktadır.

Elastomerik Mikrovalf Diziler Kontrollü mikroakışkan Chips

Biz farklı nörotransmitterlerin iyi kontrollü bir şekilde bir beyin dilim microscale yüzeyleri açığa çıkarmak için standart elektrofizyoloji kurulumları ile entegre edilebilir basit bir mikroakışkan cihaz imalatı göstermektedir.

Beyin Dilim Uyarım mikroakışkan Ağ ve Standart Perfüzyon Odası

Mikrovasküler ölçekli kanallar (&lt;30 um) ile bir mikroakışkan cihazın bütün iç yüzeyi boyunca kültürün 3B, endotel hücre mono tabakasında için bir yöntem tarif edilmiştir.

Hematolojik Hastalıklarında Mikrovasküler Etkileşimleri Öğrenmenin Endothelialized Mikroakiskan

Kaynak: Vanegas, M. I., et al. Kombine İlaç İnfüzyonu ve Elektrofizyolojisi için Mikroinjectrode Sistemi. J. Vis. Uzm. (2019)Bu videoda, hassas hacim takibi için yağ bazlı bir işaretleyici solüsyon kullanan ve eş zamanlı nöral kayıt ve ilaç infüzyonu sağlayan bir kılcal tüp aracılığıyla ilaç solüsyonu sağlayan mikroelektrot tabanlı bir mikroakışkan cihaz gösterilmektedir.

Kombine İlaç İnfüzyonu ve Elektrofizyolojisi için Mikroakışkan Tabanlı Mikroinjectrode Sistemi

Mikroakışkan oksijen kontrol biyolojik deneyler için hipoksik odaları üzerinde sadece kolaylık ve hız daha fazla bahşeder. Bir zarından difüzyon yoluyla uygulanan, özellikle mikrofluidik oksijen mikro-düzeyde eşzamanlı sıvı ve gaz fazı modülasyon sağlayabilir. Bu teknik, adacık patofizyolojisi çalışmak için dinamik çok kritik parametre deneyler sağlar.

Tek Adacık Düzeyde Oksijen mikroçevresinin Nicel ve Geçici Kontrol

PdMS tabanlı, çok katmanlı, mikroakışkan bir cihazın in vitro transkripsiyon ve çeviri (IVTT) reaksiyonlarının uzun süreler boyunca gerçekleştirilmesine olanak sağlayan üretim süreci anlatılmaktadır. Ayrıca, bu reaksiyonları uzun süre ler boyunca otomatikleştirmek ve korumak için gereken donanım ve yazılıma kapsamlı bir genel bakış sağlanır.

Uzun Süreli Hücresiz Gen Ekspresyonunun İletimi için Çok Katmanlı Mikroakışkan Platform

Bu yazıda, hücresel proseslerde çözünenlerin sekresyon dinamiklerini ve absorpsiyon oranlarını ölçmek için düşük maliyetli, çok kanallı bir perfüzyon hücre kültürü sistemi kurmak ve çalıştırmak için bir yöntem sunulmaktadır. Sistem ayrıca hücreleri dinamik uyaran profillerine maruz bırakabilir.

Dinamik Hücre Kültürü için Çıkış Fraksiyonasyonu ile Entegre Çok Akışlı Perfüzyon Biyoreaktörü

Bu protokol, bir siklik adenozin monofosfat (cAMP) biyosensörünün, bir cAMP fark detektörünün in situ (cADDis) ve bir mikroperifüzyon sisteminin adenoviral iletimini kullanarak hücre içi sinyal olaylarının senkron edinimi ve birlikte kaydı ve birincil insan psödoisletleri tarafından insülin ve glukagon salgılanması için bir yöntemi açıklar.

Floresan Biyosensör Dinamiğinin ve Hormon Salgı Profillerinin Senkron Değerlendirmesi için İnsan Psödoislet Sistemi

Canlı dokunun gerçek zamanlı analizi, önemli fonksiyonel ve mekanik veriler sağlar. Bu makale, çok çeşitli doku ve hücre modellerini koruyan ve değerlendiren yeni ve pompasız çok kanallı akışkan bir sistem tarafından doğru ve tekrarlanabilir veri üretimini sağlamak için protokolleri ve kritik değişkenleri açıklamaktadır.

Yeni bir pompasız akışkan sistemi kullanarak gözün çeşitli doku ve hücre tiplerinin bakımı ve değerlendirilmesi

Bu protokol, açık kuyu formatını sıvı akış yetenekleriyle bütünleştiren yeniden yapılandırılabilir bir membran tabanlı hücre kültürü platformunu açıklar. Bu platform standart protokollerle uyumludur ve hem mühendislik hem de biyobilim laboratuvarlarının ihtiyaçlarını karşılayarak açık kuyu ve mikroakışkan kültür modları arasında tersine çevrilebilir geçişlere izin verir.

Statik Bariyer Doku Modellerinin Dinamik Mikrofizyolojik Sistemlere Dönüştürülmesi

Yağda su emülsiyonlarında (tapalar) kombinatoryal kütüphanelerin üretimi için polidimetilsiloksan (PDMS) bazlı iki katmanlı bir cihazın imalatı burada sunulmaktadır. Fiş üretimini otomatikleştirmek için gerekli donanım ve yazılım protokolde detaylandırılmıştır ve kantitatif bir floresan fiş kütüphanesinin üretimi de gösterilmiştir.

Kombinatoryal Fiş Üretimi için İki Katmanlı Mikroakışkan Cihaz

Öğrenin, mikroakışkan perifüzyon cihazı kullanarak pankreatik adacıklardan dinamik insülin salınımı, kalsiyum akışı ve mitokondriyal potansiyel değişikliklerini eşzamanlı olarak nasıl ölçebilirsiniz. Bu yöntem diyabet ve metabolik bozukluklar araştırmalarında değerlidir.

Mikroakışkan Perifusion Cihaz içindeki Multi-Parametrik Islet Perifusion Sistemi

Daha fazla video keşfet