Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells from Peripheral Blood Using the STEMCCA Lentiviral Vector

Andreia Gianotti Sommer; Sarah S. Rozelle; Spencer Sullivan; Jason A. Mills; Seon-Mi Park; Brenden W. Smith; Amulya M. Iyer; Deborah L. French; Darrell N. Kotton; Paul Gadue; George J. Murphy; Gustavo Mostoslavsky

doi:10.3791/4327

STEMCCA lentiviral Vektör Kullanma Çevresel Blood İnsan İsteyerek Pluripotent Kök Hücre Üretimi

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells from Peripheral Blood Using the STEMCCA Lentiviral Vector

STEMCCA lentiviral Vektör Kullanma Çevresel Blood İnsan İsteyerek Pluripotent Kök Hücre Üretimi

Full Text

27,474 Views

12:03 min

October 31, 2012

DOI: 10.3791/4327-v

Andreia Gianotti Sommer¹, Sarah S. Rozelle¹, Spencer Sullivan², Jason A. Mills³, Seon-Mi Park¹, Brenden W. Smith¹, Amulya M. Iyer¹, Deborah L. French³, Darrell N. Kotton¹, Paul Gadue³, George J. Murphy¹, Gustavo Mostoslavsky¹

¹Center for Regenerative Medicine (CReM),Boston University School of Medicine, ²Department of Hematology,Children's Hospital of Philadelphia, ³Center for Cellular and Molecular Therapeutics,Children's Hospital of Philadelphia

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Burada tek bir lentiviral yeniden programlanması vektörü kullanılarak periferal kan 3-4 ml insan iPSCs üretimi için basit ve etkili bir protokol göstermektedir. Hazır kan hücrelerinin yeniden programlanması daha geniş bir araştırma toplum için erişilebilir kılarak IPSC teknoloji kullanımı hızlandırmak için vaat ediyor.

Protokol, dört mililitre periferik kandan insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerin nasıl verimli bir şekilde üretileceğini göstermektedir. Sıfırıncı günde, periferik kan örneğinden mononükleer hücreleri izole edin ve genişletin. Yeniden programlama kök co vektörü ile birincil hücreleri dönüştürün.

Dokuzuncu günde, transdüksiyonlu hücreleri yaklaşık üç hafta boyunca inaktive edilmiş fare, embriyonik, fibroblastlar ve kültür üzerine plakalamaya devam edin. Genişleme ve karakterizasyon için HESC benzeri kolonileri seçin. SS EEA dört, deneme bir 60 ve deneme 180 1 gibi pluripotens belirteçlerinin ekspresyonu için immünofloresan boyamanın sonuçları.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Hücre Biyolojisi Sayı 68 İndüklenmiş pluripotent kök hücreler (iPSCs) periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC) yeniden programlayarak tek vergiye tabi lentiviral vektör STEMCCA Stem