Visualisation de la dégénérescence de l'articulation du genou après une blessure non invasive du LCA chez le rat

Blessures non invasives au LCA

1. Portez un équipement de protection personnelle approprié. Vous pouvez utiliser un masque respiratoire, mais il n'est pas obligatoire pour ce protocole.
2. Anesthésiez les rats à l'aide d'une chambre à induction avec 5% d'isoflurane et 1 L/min d'oxygène. Maintenir le flux d'anesthésie à l'aide d'un cône nasal avec 1 - 3% isoflurane et 500 ml/min d'oxygène. Si l'appareil n'est pas installé sur une table à courant arrière ou à contre-courant, assurez-vous que les déchets de gaz sont récupérés à l'aide d'un système de table et de filtres à charbon de bois.
3. Effectuer un pincement d'orteil pour s'assurer qu'une profondeur adéquate d'anesthésique a été atteinte. Notez qu'il n'est pas nécessaire d'appliquer du lubrifiant pour les yeux, le protocole est exécuté rapidement (3 min) et qu'il y a un risque minimal de sécheresse de la cornée.
4. Placez le membre arrière droit à 30 degrés de dorsiflexion et à 100 degrés de flexion du genou tout en offrant de la place pour la subluxation antérieure du tibia par rapport au fémur.
5. Montez rigoureusement l'étage supérieur du genou à un actionneur linéaire.
6. Placez le genou fléchi sur l'étage inférieur, qui est monté directement au-dessus d'une cellule de charge.
7. Induire une blessure au LCA à l'aide d'une seule charge de compression tibiale à une vitesse de 8 mm/s.
8. Les dommages d'ACL sont notés par un dégagement de force compressive. Ceci est surveillé via un programme personnalisé.
9. Après la blessure, alors que l'animal est encore sous le plan de l'anesthésie, effectuer un test lachman pour confirmer cliniquement une rupture de LCA a eu lieu. Un test de Lachman est un test clinique utilisé pour évaluer l'intégrité de l'ACL en évaluant la stabilité du plan sagittal. Tout en stabilisant le fémur, tirez le tibia vers l'avant (dans une direction antérieure) pour évaluer la quantité de mouvement. Un LCA intact produira une « fin-sentir ferme » où le chercheur ne sera pas en mesure de traduire le tibia vers l'avant. Un ACL blessé produira une « sensation de fin douce ou molle », indicatif d'un LCA déchiré.
10. Palpate le fémur et le tibia pour détecter tout dommage grave osseux. Si aucune contre-indication n'est identifiée, transférez l'animal dans sa cage et laissez-le récupérer. Pendant ce temps, surveillez l'animal pour vous assurer qu'il ne présente aucun signe de douleur, comme une réticence à se déplacer, une vocalisation ou une posture anormale.

Imagerie cT de la dégénérescence articulaire

Les images 2D sont obtenues à l'aide de réglages de scanner de 70 kV, courant 85,5 'A (Figure 2B). Les données sont recueillies chaque étape de rotation de 0,6 degrés à une résolution de 11,5 m à travers un 180 'complet. Les images transversales sont reconstruites à l'aide d'un algorithme de rétroprojection lissé et sur la pile d'images reconstruites (Figure 2C). La structure trabéculaire est ensuite analysée par segmentation dans un logiciel, où une sphère de 1,53 mm est centrée dans la plaque épiphysaire des plateaux tibials et du fémur médial et latéral pour déterminer l'épaisseur trabéculaire (m), la séparation trabéculaire (m) et le nombre trabeculaire (1/mm). ^5,6

1. À 4 semaines de dommages post-ACL, euthanasiez le rat avec l'exposition prolongée au CO₂ dans la chambre d'induction.
2. Étendre et sécuriser l'ACL blessé dans un appareil imprimé en 3D personnalisé (figure 2A).
3. Acquérir des images à l'aide de cT.
4. Obtenir des radiographies de plan frontal pour déterminer l'espace articulaire. rétrécissement (entre le condyle fémoral et le plateau tibial [mesuré en mm]) par rapport au membre non blessé.
5. Obtenir des images 2D en utilisant les paramètres suivants du scanner : 70 kV et courant 85,5 'A.
6. Recueillir les données chaque étape de rotation de 0,6 degrés à une taille de pixel de 11,5 m à travers un 180 'complet.
7. Reconstruire des images transversales à l'aide d'un algorithme de rétroprojection lissé sur la pile d'images reconstruites.
8. Pour s'assurer qu'une région d'intérêt cohérente est mesurée, placez une sphère de 1,53 mm dans la plaque épiphysée des plateaux tibials et du fémur médial et latéral pour déterminer l'épaisseur trabeculaire (m), la séparation trabéculaire (m) et le nombre trabeculaire (1/mm).

Figure 2 : A) Appareil imprimé personnalisé pour tenir le membre postérieur pendant les images 2D de CT, B) et C) 3-D 'CT.