可卡因诱导行为敏和小鼠位置偏爱评估

这些行为任务的总体目标是让研究人员能够分析与药物相关的行为，例如奖励和致敏。这些方法可以帮助回答药物成瘾领域的关键问题，例如哪些分子或途径有助于药物诱导的可塑性。这些技术的主要优点是吞吐量高，可以使用自制或购买的设备进行。当我们使用不同的药物剂量进行条件性位置偏好分析时，这种方法可以发现药物敏感性改变导致的差异，并为您的研究结果提供额外的信心。该实验利用三个装有光电束的腔室 CPP 盒进行自动数据收集。手头有四个或更多。该仪器有两个大腔室，A 和 B，可以通过盖子将小鼠引入其中。A 室和 B 室在视觉上是不同的，例如白色与黑色，在触觉上也是不同的，例如具有不同的地板纹理。两个大腔室之间是一个较小的、相互连接的中性腔室，或 C，可通过滑动门进入。有关 CPP 框的更多详细信息，包括有关如何设置平衡设计的重要信息，请参阅文本协议。对于这些实验，使用经过常规处理的小鼠，以尽量减少可变动物处理对结果的影响。准备测试室，彻底清洁 CPP 盒。打开设备并调暗房间的灯光。然后，在试验前 60 至 90 分钟将小鼠移至测试区域。在第一个测试日，执行预测试。通过打开腔室间门来准备腔室。接下来，打开计算机程序。加载测试程序。在其中，输入动物 ID 并发出 start 命令。准备好后，轻轻地将每只老鼠放入其指定设备的中间腔室中。预审后，将小鼠放回它们的家笼并导出数据。从预测试结果中，确定每只动物对腔室 A 和 B 的偏好，从另一个腔室中减去在每个腔室中花费的时间，并将差异用作指标。特别考虑具有强烈测试前偏好的动物，此处以红色显示，如文本协议中所述。根据此结果为每只小鼠选择药物配对室。每个测试组的指数分数之和应相等且接近零。换句话说，为大约一半的小鼠选择首选的一侧。此外，将动物均匀分配到每组内的 A 室和 B 室。如果需要同时调节多个组，请尝试将使用相同设备的动物分配到相对的腔室。有关更多详细信息，请参阅文本协议。使用平衡设计时，条件位置偏好的一个关键步骤是分配药物配对室，以便所有测试组的验前分数几乎相等，并且尽可能接近零或无偏好。首先，请务必在调节阶段之前称量每只小鼠。在第一个调节日，根据每只动物的体重准备装有可卡因或所选测试药物的注射器。隔天准备装有生理盐水或其他适当载体的注射器。通过关闭腔室间门来准备盒子。在计算机上加载调节程序，输入 ID，然后启动程序。接下来，给动物注射药物或载体推注，并将它们装入指定的盒子中。确保每天按照分配在每只小鼠的适当 A 室或 B 室中进行调节至关重要，因为此步骤中的错误会迫使动物从研究中删除。经过不超过 30 分钟的调节后，将小鼠放回它们的家笼中。所有试验完成后，导出数据并将小鼠放回菌落。该分析使用 20 英寸 x 11.5 英寸的 4 x 8 光电束阵列。手头有 4 到 16 个。将每个阵列安装在一个敞篷黑色 Plexiglas 腔室中。在测试室中，准备一盏红灯来照亮测试室。在软件中，为日常习惯化和注射试验准备程序会话。首先，将习惯试验时长设置为 30 到 60 分钟。一个小时是一个很好的起点。将光束中断记录在 5 分钟或更短的分箱中。其次，将每个暗室中的试验时间设置为在第一束光跳闸时开始，这是在试验以开始信号启动之后。第三，将注射试验时间设置为 60 到 120 分钟。如果可能，对于注射试验，请选择单独而不是同时从光束阵列启动开始信号。运动致敏需要连续 10 或 11 天的初始测试运行。每天，在测试前 30 到 60 分钟将小鼠带入行为前厅。现在，将一个新的半透明小鼠笼放入每个腔室中。确保摄影光束在每个笼子的长轴上居中。准备好后，以随机顺序从家笼中取出老鼠。首先，对它们进行粗略和称重。然后将每个放入指定的运动测试笼中进行习惯化试验，并盖上盖子。每天进行一次不注射的习惯化试验，然后是注射试验。在习惯化试验期间，根据每只小鼠的当前体重准备注射器。所有习惯试验结束后，加载注射试验程序并悄悄进入测试室。注入鼠标后，在软件中快速发出笼启动信号，然后将该鼠标返回到其测试笼。在最初的三到四天测试中，给予生理盐水或其他合适的载体。在接下来的 7 天内，服用可卡因或选定的测试药物。所有注射试验结束后，将小鼠送回它们的饲养室。在 CPP 测定中，野生型 C57 黑色 6n 小鼠仅用生理盐水或两种不同浓度的可卡因进行条件处理。正如预期的那样，纯盐水组在调节后表现出偏好没有变化，而在可卡因治疗组中观察到偏好增强。测试前后在不同腔室中花费的时间表明，经可卡因处理的小鼠在可卡因配对腔室中花费的时间比其他任何腔室都多。正如预期的那样，仅接受生理盐水的小鼠在腔室偏好方面没有表现出显着差异。接下来，对 C67 黑色 6n 小鼠进行运动测定。生理盐水注射 3 到 4 天，然后注射四种不同剂量的可卡因，持续 7 天。正如预期的那样，随着可卡因剂量的增加，观察到更明显的行为变化。对于激发试验，在停药 1 到 2 周后，每组都给予原始剂量的可卡因。然后给予不同的停药期和剂量的额外激发。尽管该视频使用市售设备演示了这些技术，但许多实验室使用自制设备成功地执行了这些技术。在尝试这些程序时，重要的是要确保所有动物都得到平等的治疗，以减少压力、错误和实验间的差异。需要考虑的变量包括处理时间和在测试室和试验室中花费的时间。可能需要扩展这些检测方法，包括 CPP 的消退和恢复以及运动致敏的长期或交叉致敏挑战。此外，使用药物 na 也很重要