Isolering och odling av primära synoviala makrofager och fibroblaster från murin artritvävnad

Cellbaserade analyser krävs för att klargöra molekylära funktioner. I artritstudier är metoden att isolera primära celler väl etablerad i synoviala fibroblaster, men inte i synoviala makrofager. Därför utvecklade vi ett protokoll för att isolera och expandera både synoviala makrofager och synoviala fibroblaster från artritmodeller.

Primära synoviala fibroblaster från murin artritvävnad har bidragit till klarläggandet av molekylära mekanismer vid artritpatogenes. Å andra sidan har benmärgshärledda makrofager, blodmonocyt-härledda makrofager och makrofagcellinjer ofta använts som makrofagresurser för artritstudier. Eftersom makrofager kan förvärva funktioner associerade med deras mikromiljö kan allmänna källor till makrofager sakna svar som är specifika för artritvävnad.

Dessutom är det svårt att få tillräckligt med synovialceller genom sortering, eftersom murin synovium är en mycket liten vävnad även i artritmodeller. I den tidigare metoden för att isolera synoviala fibroblaster kasserades synoviala makrofager. Dessutom rapporterades en metod för att isolera och expandera bosatta makrofager från vissa organ.

Därför modifierades befintliga protokoll i kombination för att isolera och expandera både synoviala makrofager och synoviala fibroblaster från murin artritvävnad. Denna metod kan isolera både makrofager och fibroblaster från inflammatoriskt synovium med hög renhet, och det är enkelt och reproducerbart. Denna metod möjliggör expansion av synoviala makrofager under samodling med synoviala fibroblaster.

Metoden ger också en fördel, eftersom synoviala fibroblaster kan användas med färre passager. Det etablerade protokollet skulle vara en fördel för att belysa patologiska mekanismer vid reumatoid artrit.