1,227 Views
•
01:52 min
•
June 09, 2023
DOI:
Transcript
Automatically generated
אנו מעוניינים בהצלבה בין שריר מתכווץ לבין האדיפוציטים הנוצרים בין סיבי שריר בפציעה ובמחלה הנקראת רקמת שומן תוך שרירית, או IMAT. הנדסה גנטית בתאים בעכברים היא כלי רב עוצמה לניתוח מכניסטי של דיבור צולב של שרירי שומן. ניתוח של איתות באמצעות תעתיק ופרוטאומיקה מזהה מתווכים, ואז אספקת תרופות מבוססות ביו-חומרים יכולה להתערב במסלולים אלה.
אחד האתגרים העיקריים הוא בידוד וכימות אדיפוציטים של IMAT. במיוחד במודלים של בעלי חיים קטנים, אות ה- IMAT נשטף על ידי ניתוח שרירים שלמים כמו שעתוק או ליפידומיה, וכימות IMAT על ידי הדמיה לא פולשנית סובל משטיפה דומה, מכיוון שרוב הווקסלים מכילים תערובת של שרירים ו- IMAT. לאחרונה השתמשנו בטכניקה זו המתוארת במאמר זה כדי להדגים כי IMAT פוגע ישירות בהתכווצות השרירים.
עם מדידות מדויקות של שקיעת IMAT, הראינו שהוא לא רק מחליף חומר מתכווץ, אלא מעכב התכווצות בשריר הרזה שנותר. פרוטוקול זה מטפל באתגרים בכימות IMAT. התקן הנוכחי למדידת IMAT בבעלי חיים קטנים הוא היסטולוגיה של חתך יחיד, שאינה הדמיה מקיפה או לא פולשנית, שהיא יקרה וברזולוציה נמוכה.
אנו מאמינים שזה הגביל את הבנתנו את ה- IMAT muscle crosstalk. טכניקה זו מספקת שיטה מקיפה וזולה להערכת IMAT על ידי הדמיה איכותית וכימות בקנה מידה רב. אנו מקווים שהפשטות של טכניקה זו תעודד חוקרים נוספים למדוד IMAT במודלים של בעלי החיים שלהם.
כמו כן, טכניקה זו תספק כלי דיוק גבוה יותר עבור החוקרים המעוניינים ב- IMAT לחשוף יחסים עדינים יותר בין אדיפוציטים IMAT ותאים אחרים.
Read Article
Cite this Article
Parson, J. C., Biltz, N. K., Meyer, G. A. Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration. J. Vis. Exp. (196), e65461, doi:10.3791/65461 (2023).
Copy