Detection of DNA Double-Stranded Breaks in Mouse Oocytes

Chrysoula Zorzompokou; Marios Ipeirotis; Marios Kaisar Martzoukos; Petros Marangos

doi:10.3791/65494

Journal

/

Developmental Biology

/

Fare Oositlerinde DNA Çift Sarmallı Kırılmaların Tespiti

JoVE Journal
Developmental Biology
Author Produced

This content is Free Access.

JoVE Journal Developmental Biology

Detection of DNA Double-Stranded Breaks in Mouse Oocytes

Fare Oositlerinde DNA Çift Sarmallı Kırılmaların Tespiti

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

2,145 Views

•

07:46 min

•

June 23, 2023

DOI:

10.3791/65494-v

DOI:

10.3791/65494-v

•

07:46 min

June 23, 2023

•

18 Views

Chrysoula Zorzompokou^1,2, Marios Ipeirotis^1,2, Marios Kaisar Martzoukos¹, Petros Marangos^1,2

¹Department of Biological Applications and Technology,University of Ioannina, ²Biomedical Research Institute,Foundation for Research and Technology

Transcript

Araştırmamız, memeli oositlerinde ve preimplantasyon embriyolarında hücre döngüsünün nasıl düzenlendiğini anlamayı amaçlamaktadır. Araştırmamızın önemli bir yönü, farklı olgunlaşma durumlarında onarım kapasitesinin ve DNA hasar yanıtının incelenmesini içerir, oositlerde ve ayrıca preimplantasyon embriyolarındadır. Özellikle kontrol noktalarının nasıl tepki verdiğini ve potansiyel DNA hasarından sonra hangi onarım mekanizmalarının oluştuğunu anlamakla ilgileniyoruz.

Laboratuvarımız, memeli oositlerindeki DNA hasar tepkisini mekanik olarak inceleyen ilk kişi oldu. Memeli oositlerinde G2 profaz DNA hasar kontrol noktasının olmadığını gösterdik. Ve iş mili montaj kontrol noktasının, hasardan sonra metafaz durması oluşturmadaki önemini gözlemledik.

Bu protokolü kullanarak, DNA çift iplikçik kopmalarını doğru bir şekilde tespit etmek ve oositlerde DNA hasarı olup olmadığını ve DNA hasarının onarılıp onarılmadığını belirlemek mümkündür. Bu protokol, DNA’daki hasarın kesin bölgelerini belirlememizi sağlayan immünofloresan kullanımını içerir.

Summary

Oosit genom bütünlüğünün korunması, elde edilen embriyoda genetik sadakati sağlamak için gereklidir. Burada, memeli dişi üreme hücrelerinde DNA çift sarmallı kırılmaları tespit etmek için doğru bir protokol sunuyoruz.