Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Быстрое Молекулярная Обнаружение и дифференциация вирусов гриппа А и В

15.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/54312

⸱

30 января 2017 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Мы описываем быстрый, молекулярный основе гриппа A и B анализа. Гриппа тест определяет каждую мишень в течение 15 мин с использованием изотермического амплификации с гриппом специфических праймеров с последующим обнаружения цели с зондами молекулярных радиомаяка. И В анализе гриппа А удобно и требует минимальных практического времени для выполнения.

Аннотация

Грипп является респираторное заболевание, вызываемое вирусами гриппа А и В в организме человека и вызывает значительное количество заболеваемости и смертности ежегодно. Гриппа A и B для анализа был первый тест молекулярного быстрого гриппа ОРСУ-отказ от имеющихся. Испытание гриппа A и B работает с использованием изотермического амплификации с гриппом специфических праймеров с последующим обнаружения цели с зондами молекулярных радиомаяка. При этом производительность гриппа A и B для анализа на замороженное, архивируются носоглотки тампон (NPS) образцов, хранящийся в вирусной транспортной среде (VTM) сравнивали с анализом респираторного панели.

Производительность А и В анализе гриппа оценивали путем сравнения результатов с эталонной панели методом респираторной. Чувствительность к общей вируса гриппа А составила 67,5% (95% ДИ (ДИ), 56.6-78.5) и специфичность 86,9% (CI, 71.0-100). Для тестирования вируса гриппа B, чувствительность и специфичность составили 90,2% (ДИ 68.5-100) И 98,8% (ДИ 68.5-100), соответственно.

Эта система имеет преимущество значительно более короткого времени испытания, чем любой другой доступный в настоящее время молекулярного анализа и простой, пипеткой свободной процедуры работает на полностью интегрированной, закрытая, система малой площади. В целом, гриппа A и B оценивали анализ в данном исследовании, имеет потенциал, чтобы служить в качестве диагностического теста быстрого гриппа точки оказания медицинской помощи.

Введение

Вирус гриппа инфекции приводят к значительному количеству заболеваемости и смертности каждый год 1, 2, 3. Несложный гриппа характеризуется конституционными и респираторные симптомы , такие как лихорадка, миалгии, головная боль и непродуктивный кашель 4, 5. Люди старшего возраста, детей младшего возраста, пациентов с ослабленным иммунитетом, а также у пациентов с сопутствующими заболеваниями , лежащих в основе находятся на более высоком риске для серьезных осложнений , таких как пневмония, миокардит, заболевания центр....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

ЭТИКА ЗАЯВЛЕНИЕ: Использование левой более клинических образцов одобрен и соответствует рекомендациям Совета по Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review.

1. Перед запуском Пробирной

ПРИМЕЧАНИЕ: Грипп A и B анализ одобрен для носоглотки образцов мазков и носоглотки мазков, хранящихся в вирусных транспортных средств массовой информации. Тампоны включены в комплект и должны быть использованы для обеспечения оптимальной производительности. Тем не менее, искусственный шелк, пена, стекались тампоны или полиэфирной назальные мазки также могут быть использованы для сбора носовых мазков.

  1. Для того, чтобы собрать образец тампон из н....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В этом исследовании, заархивированные образцы NPS собирали из стационарных больных, представляющих с гриппоподобными симптомами в Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (MSKCC) во время вспышки гриппа в период с 15 декабря 2012 года и 1 марта 2013 г. Образцы NPS были представлены в 3 мл СУДС и проходят в рамках рутинной клинической практике с молекулярным анализом, который обнаруживает группу респираторных вирусов (RP), в том числе гриппа а, а-1, а-3, и В. за исследуемый период, 3,675 NP.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Вирусы гриппа значительные мировые причины заболеваемости и смертности. Быстрый и точный диагноз гриппа является одним из основных ключей к управлению во время вспышки гриппа респираторного сезона. Другие тесты антиген на основе являются быстрым и легким для выполнения; Тем не менее, они имеют низкую чувствительность 13. С другой стороны, традиционные молекулярные тесты улучшили чувствительность, но требуют более опытных лабораторных технологов для выполнения и являются более дорогостоящими. Анал.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Мы благодарим сотрудников Службы клинической микробиологии Мемориального онкологического центра Слоуна-Кеттеринга за помощь в сборе клинических образцов. Это исследование было частично поддержано соглашением об исследованиях между MSKCC и Alere Scarborough (SK2013-0262).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Alere i InstrumentAlereNAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Тестовый наборAlere425-000 (Глобальный), 425-024 (США)
Сканер штрих-кодов Alere iУниверсальный принтер AlereEQ001001
Универсальный принтерAlere55115 (Глобальный), alereiprinter ( США)
200 &микро; l Прецизионный пипетка
200 & микро; l одноразовые наконечники
Вирусный транспортный носительRemelM4-RT
для пипеток

Ссылки

  1. Prevention control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014. , Report No. 1057-5987 1-43 (2013).
  2. Poehling, K. A., et al. The Underrecognized B....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Грипп A и Bизотермическая амплификациязонды-молекулярные маякимазок из носоглоткисреда для транспортировки вирусованализ респираторной панелиэкспресс-тест по месту оказания медицинской помощиэкспресс-диагностика гриппаклиническая диагностика