Summary
経頭蓋直流電流刺激 (tDCS) は、精神疾患を治療するために提案された治療法です。動物モデルは、tDCS による特定の生物学的変化を理解するために不可欠です。このプロトコルでは、慢性埋込電極を使用する Tdc マウス モデルについて説明します。
Abstract
経頭蓋直流電流刺激 (tDCS) は、いくつかの脳神経疾患のための代替または補完的な治療として提案した非侵襲的なニューロモデュレーション手法です。Tdc の生物学的効果完全に理解されない、人間の脳組織を取得の難しさのために一部説明されています。このプロトコルでは、Tdc の長期的な生物学的効果の検討できるように慢性埋込電極を使用する Tdc マウス モデルについて説明します。この実験モデルで tDCS は皮質の遺伝子発現が変化し、その治療上の使用のための理論的根拠の理解への顕著な貢献を提供しています。
Introduction
経頭蓋直流電流刺激 (tDCS) は、低強度の連続電流1を使用して神経の変調に焦点を当てて非侵襲、低コスト、治療テクニックです。現在、Tdc の 2 つの設定 (anodal、,) があります。Anodal 刺激を及ぼす現在電場電位をトリガーには弱すぎる中、電気生理学研究はこのメソッドがシナプス可塑性2の変化を生成することを示しています。たとえば、その tDCS は、興奮性シナプス後電位の3,4の振幅増大と皮質興奮性5の変調などの長期増強 (LTP) 効果を誘導する証拠を示しています。
逆に、, 刺激は抑制、膜の過分極6の結果を誘導します。このメカニズムの仮説は、活動電位の頻度と神経体3の期間を調節する Tdc はで記述されている生理学的な所見に基づいています。特に、この効果呼び起こすはない直接、活動電位が脱分極閾値をシフトし容易またはニューロン7を妨げることができます。効果を対照的なこれらは既に実証されています。たとえば、anodal とし, 刺激はウサギ8の筋電図活動を介して登録条件反応の反対の効果を作り出した。しかし、研究は興奮性、自己対照的な効果3を提示する可能性があります, 電流を増加している間 anodal 序でセッション興奮性が低下することをまた示されています。
Anodal とし, 刺激電極対の使用を集計します。たとえば、anodal 刺激、「アクティブ」または「陽極」の電極は「リファレンス」または「カソード」電極電流影響取るに足りない9するとされる地域であるのに対し、変調されると脳の領域上に配置。, 刺激電極配置が反転されます。現在の強度に依存する効果的な tDCS の刺激強度と電気に影響を与える電極寸法フィールド10の異なる。平均電流は 0.10 から 2.0 の間、最も公表された研究は、mA、0.1 0.8 mA 人間、マウス、それぞれ6,11mA。35 cm2の電極のサイズは、通常人間で使用されますが、齧歯動物の電極寸法に関する適切な理解がないより徹底的な調査が必要な6。
tDCS はてんかん12, 双極性障害13、ストローク5 などのいくつかの神経疾患、精神神経疾患11の代替または補完的な治療を提供しての試みに関する臨床研究で提案されています。、うつ病14、15アルツハイマー病、多発性硬化症16パーキンソン病17の主要な。TDCS の関心とその行動の結果と同様、臨床試験、詳細な携帯と脳組織、短い分子誘発変異と長期的な効果、成長している、にもかかわらず、まだより深く調査18,19. tDCS をじっくり研究して直接人間のアプローチは実行可能なため、tDCS 動物モデルの使用 Tdc へのアクセシビリティのための治療上のメカニズムを基になる細胞と分子のイベントへの貴重な洞察力を提供するかもしれない、動物の脳組織。
入手可能な証拠は、マウスの tDCS モデルに関する制限されています。報告されたモデルのほとんどは、材料、電極寸法、打ち込むことのさまざまなレイアウトを使用しました。たとえば、ウィンクラーら(2017) 生理食塩水で満たされた頭部電極 (銀/塩化銀、直径 4 mm) を注入し、アクリル セメントやネジ20で頭蓋骨に固定します。我々 のアプローチとは異なり、その胸部電極は、注入 (プラチナ、20 × 1.5 mm) だった。Nasehiら(2017) 非常に、よく似た手順を使用は、胸部電極を生理食塩水に浸したスポンジ (カーボン充填、9.5 cm2)21から作られたが。別の研究は、固定プレートを使用し、ハイドロゲル指揮者22動物の頭をカバーによって達成された動物の頭の中に両方の電極を植え付け。ここでは、簡単な外科プロシージャおよび Tdc セットアップ (図 1) 慢性埋込電極を使用する Tdc マウス モデルをについて説明します。
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Protocol
それぞれ収容された男性大人 (8-12 週) c57bl/6 マウスは、この実験で使用されました。動物は食べ物と水で実験手順の前後中に適切なケアを受信したアドリブ。すべてのプロシージャは、連邦大学のミナスジェ ライス州から動物の倫理委員会で承認された(プロトコル番号 59/2014).
1. 電極配置
-
鎮静と脳定位固定装置に動物を注視して
- すべての必要な手術器具を滅菌します。
注意してください。440 ° C で 3 分間加熱滅菌処理は手術器具綿棒は、オートクレーブで 121 ° C、20 分で 20 の psi (1 平方インチあたりポンド) だった。 - 37 ° c. に温度プラットフォーム コント ローラーを調整します。
- 動物の重量を量るし、麻酔導入の適切な投与量を計算します。100 mg/kg 8 mg/kg とケタミン キシラジン、腹腔内に与えられた (31 G 針サイズ) の用量でケタミン ・ キシラジンの混合物を使用します。動物を 2 〜 3 分で眠りに落ちる必要があります。
- 手術部位を剃る電気シェーバーやかみそりを使用します。
- 場所を予め温めておいた脳定位固定装置に動物は加熱プレートです。
- 動物の頭を押し、各脳定位固定装置のプラットフォームにそれを修正する動物の耳のヒント耳バーに挿入します。
- ゆっくりと動物の頭位置をシフトすることによってない外側頭シフトと後少し上下運動があることを確認します。
- マウスの鼻をゆっくり麻酔マスクとネジを締めて場所でそれを修正します。
- O2の 1.0 L/min と 1% に、イソフルランを設定します。
- 手術中に角膜の乾燥を防ぐために動物の目に眼軟膏を適用します。
- すべての必要な手術器具を滅菌します。
-
動物の頭にインプラントをアタッチします。
- ポビドン ヨード (または 2% クロルヘキシジン) の 3 つの交互になるスクラブと手術部位を準備する綿の綿棒を使用し、70% エタノール。
- ピンセットのペアを使用して、軽く動物のペダル撤退 (つま先ピンチ) 反射の消失を確認する動物の足の指を圧迫し麻酔の深さを確認します。
- 動物の耳ラインの後方約 3 mm 切開を行うし、目の行で停止します。切開部位にインプラントを受け取るのに十分な大きさで長さ 1 cm 程度が必要です。
- 軽く接着剤を改善し、遵守をセメント骨スクレーパーと頭蓋をこすり。独力のマイクロ傷を作成するつもりでこの光を行います。
- オープン手術フィールドを維持し、皮膚、毛皮などの障害物の無料たるんだ皮膚を手術のフックを慎重に移動します。
- 滅菌綿棒を使用して、動物の頭皮を乾燥します。
- 解剖顕微鏡を使用して、動物の頭蓋骨の上部を視覚化します。
- 針を付ける脳定位固定ホルダー、前を探します。少し前に触れる動物の頭の上に直接針を配置します。
- デジタル トレースのすべての座標をゼロにし、針を上げます。
- 脳定位固定装置のホルダーに Tdc インプラントを修正します。動物の頭の上、インプラントの位置し、適切な定位座標を使用して興味の地域の上にゆっくりと下ろします。
- インプラントのベースにスーパー接着剤を 1 滴 (約 35 μ L) を広げるため針を使用します。
- それが頭蓋骨に触れるまでホルダーに下方へゆっくりと移動します。インプラント基本が表面に接触して完全にあることを確認します。
- 製造元の指示に従って手術セメントを準備します。
- 精密位置決め後適用 3 薄い、頭蓋とインプラントの下の部分にセメントも層。1 アプリケーション ブラシを使用してドロップのドロップを適用します。レイヤーは、インプラントのさらに構造サポートにヒル状の構造を形成しなければなりません。
- 滑らかな、遮るもののない接続を許可するようにセメントのきれいなインプラントのねじを残します。
- 各レイヤーに約 4 分間乾燥を許可します。
- インプラントから完全に切り離されてまで乾いたら、慎重にホルダーを取り外します。常に動物の頭蓋骨から誤って抽出可能性がありますので、インプラントを処理するときは、細心の注意を使用します。
-
仕上げの手術と手術後のケア
- 生理食塩水に浸した綿棒で切開部位に動物の皮を水和物します。
- Tdc インプラントの土台を越えて皮のコート。
- ピンセットのペアを使用して、組織を一緒に持参し、組織の 0.2 cm あたり手術組織接着剤のドロップで切開を閉じる。
- 切開部位の 1-2% リドカインに潜入し、組織の基礎となります。
- 皮下の乳酸リンゲル液 500 μ L でマウスをメタンハイド レートします。
- 予め温めておいた (37 ° C) きれいで、シングル収容ケージにマウスを配置します。
- 次の時間で簡単にアクセスできるケージに食品にウェット フード ペレット、小さな皿を入れてください。
- 動物の外科手術後の重量を登録します。
- 次の 2 日間、手術後皮下動物ケトプロフェン (5 mg/kg) を与えます。
- 動物の回復は、少なくとも 1 週間に密接に監視します。立毛、グルーミング、減らされた歩行、傷傷、手術部位の炎症の欠如などの苦痛の兆候を評価します。
2. tDCS セットアップおよび刺激
-
tDCS セットアップ (図 2参照)
注意してください。TDCS 刺激は完全に充電されていることを確認します。- TDCS 刺激にアノードとカソード ケーブルを取り付けます、刺激部位の近くに利用できるようにします。ピン型電極を脳定位固定装置のホルダーに取り付けます。
- 熱のプラットフォームを 37 ° C に設定します。
- 1 L/分吸入麻酔装置の酸素流量計を入れます。
- 麻酔誘導チャンバーにマウスを配置します。
- 3% にイソフルラン気化器をオンにします。4 分のイソフルレンの影響を受ける動物を許可します。
- 動物は、誘導商工会議所では、0.9% 食塩水で体電極を埋めるため滅菌注射器を使用します。
- 誘導室から動物を外し、体電極上にその胸を置きます。
- マウスの鼻をゆっくり麻酔マスクと場所でそれを修正します。1.5% にイソフルラン出力を下げます。
- インプラントとピン型電極を生理食塩水で埋める、慎重に取り付けます。
- 刺激時間と電流の強さを調整します。
- TDCS 刺激の接触の品質を確認します。最適な接触は 1-10 のスケールで 7 から 10 に行きます。
-
刺激
- 刺激を開始します。
- 30 のために現在のランプを確認 s 選択した値とそれ自体の維持を着実に確立された時間のため、再びランプの下のセッションの終わりに。
- コントロール マウスの偽ボタンをアクティブにします。
- 30 のために現在のランプを確認 s 選択した値に放置上下連続ランプダウンと最後に選択した値を最終的な傾斜路の刺激周期の残りのための 1。
- 刺激のセッションが完了したら、慎重に 10 分のために予め温めておいた (37 ° C) ケージに動物を転送します。
注意してください。動物は、3 分後に目を覚ますを開始します。 - 吸入麻酔システムをオフにします。
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Representative Results
外科プロトコルは、誘導サイトでない炎症性の信号やその他の望ましくない効果を少なくとも 1 ヶ月、インプラントの長期安定性を提示しました。すべての動物が生き残った外科プロシージャと Tdc のセッション (n = 8)。この実験では、Tdc インプラントされた M1 と M2 野 (+1.0 mm 前後と前 0.0 mm 外側) 上に置かれました。一週間後、tDCS (n = 3-4) と偽 (n = 3) マウスは 0.35 で 10 分間の間に 5 日連続の刺激された mA。インプラントの生存率を評価するために登録された連絡先品質 (CQ) 値と 5 日間刺激プロシージャ (図 3 a) の中にグループ間に有意差が見つかりませんでした。脳由来神経栄養因子 (BDNF) とグリア線維性酸性蛋白の遺伝子発現レベルの評価を通じて決定できる刺激成功この動物モデルを使用して、 (GFAP)。BDNFおよびGFAP sham 群と比較した場合のインプラント下皮質領域に有意の mRNA のレベルを提示しました。Tdc の遺伝子発現に及ぼす影響 (アーク)、細胞骨格関連タンパク質の活動規制と synapsin 1 (SYN1) 遺伝子のレベルではなかった式 (図 3 b) を変更されたので特定の遺伝子を限定するように見えます。
図 1.用実験手順はインプラント手術刺激します。TDCS の手順の概略フローチャート インプラントの配置、tDCS のセットアップ、および刺激の手順.この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
図 2. tDCS セットアップします。右の画像は、スケマティック、tDCS 現在刺激 (A)、現在の強度と刺激期間 (B) の表示、(C) 1 から 10 のスケール CQ 表示と true 現在の表示 (D) を含むに対応します。TDCS 刺激は、偽刺激 (E)、(F) の刺激を開始してプロトコル (G) を中止するをアクティブにするボタンもあります。2 つのノブは、電流密度 (H) および (I) 刺激の持続時間を調整するために使用されます。オン/オフのスイッチは背面側 (J) にあります。電極ケーブル (K, 否定的な棒) の 2 つの女性挿入可能な入口が利用されます (L、肯定的な棒)。右下の画像は銀/塩化銀 (O) と体電極の頭部の電極と動物のセットアップはニッケル メッキ真鍮 (M) セットと彼らのそれぞれの次元から成っています。調整自動熱プラットフォーム (N) は、動物の温度を維持し、100% 酸素 (P) と混合イソフルランは定位防毒マスク (Q) 経由で供給します。インセット (R) は、M1 および M2 (S) 皮質運動領域に対する陽極の配置を示しています。TDCS パッチアンプ用アダプターは生理食塩水で満たされた植込み型ホルダー (T) の構成 (0.9 %nacl) (U) とプラスチック製のキャップ (W) に接続されているピン型電極 (V) が閉じられます。それぞれの次元はミリメートル単位で描かれている (D = 直径、H = 高さ、ID = 内径)。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
図 3.TDCS による誘発性遺伝子の発現変動を問い合わせてください。(統計的な差異は見られ A) 接触品質 (CQ) グループの間で。双方向反復測定 ANOVA、毎日の相互作用と治療 (F4.30 0.552、P = = 0.698)、治療要因 (F4.30 = 0.349、P = 0.810)、日因子 (F1.30 0.157、P = = 0.694)。( BDNF (脳由来神経栄養因子)、GFAP (グリア線維性酸性蛋白)、円弧(細胞骨格関連タンパク質の活動規制) とSYN1 B) 量的なポリメラーゼの連鎖反応の遺伝子発現データ(synapsin 1)。両方のBDNF mRNA のレベル (p = 0.0081) とGFAP (p = 0.0108)アークの変更が検出されたない間に増加した (p = 0.0760) とSYN1 (p = 0.508)、続いて不対ダゴスティーノ ピアソン正規性検定によるとパラメトリック スチューデントの t 検定。フォールドの変更されたRPL13A遺伝子に対する 2- ΔΔCQメソッドを使用して計算されます。すべてのグラフで Tdc グループはマゼンタと偽のグループは緑。n = 3-4/グループ。データは、平均値と ± S.E.M. 誤差として表されます。n. s. =有意、p ≤ 0.05*、p ≤ 0.01* *。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。
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Discussion
サスカチュワン神経テクニックでは、近年、精神神経疾患23の治療に有望なプロシージャとして臨床実習を入力されています。神経のメカニズムの知識の欠乏によって課される制約を減らすためには、我々 は脳の領域を対象とする電極を運ぶ tDCS マウス モデルをここで紹介。電極は慢性埋込型なのでこの動物モデルは複雑な刺激パターンで (少なくとも 1 ヶ月) の tDCS による長期的な生物学的作用の調査を実行できます。説明 tDCS 動物モデル提示高インプラント トレランスと感染の可能性はほとんど正常に実行された場合。全体的にみて、インプラントを置く手術手順は、迅速かつ簡単な実行 (30 分/動物) のです。この tDCS モデルの 1 つの追加の利点は、電極接触品質と実際の現在の刺激値を追跡することが可能です。
この動物モデルの主な欠点は、マウスの頭蓋に適切なインプラントの固定です。手術中 (頭を垂直に移動のみが) 可能なシフト外側頭がない方法で動物の頭を制限することが不可欠です。これは動物の頭皮はインプラントのベースにデンタル セメントを対象となる領域を調節することで高い精度と適切な固定と完全合致が保証されます。インプラントを受け取るのに十分な大きさの切開をするが重要です。大きなカットいくつか Tdc インプラントの必要があります。注射針から作られた 2 〜 4 手術フックを使用超硬合金の領域が増加します。しかし、病変の可能性を削除する動物の目にもすぐにフックを配置しないでください。優しく頭皮を傷スーパー接着剤と頭蓋にセメントの接着性が向上、一方残留破片は良いインプラントの付着を防ぐことができます。また、歯科用セメントを適用すると、粘度が高く、動物の頭蓋骨を実行してセメントを回避、最初のレイヤーを準備します。各セメント層は湿潤層を介してセメントを適用する下の層の硬化を遅らせるし、の転換やも該当するインプラントを引き起こす可能性がありますので、少なくとも 4 分間乾燥に許可しなければなりません。経験から、以上 3 ねじの妨害を避けるためにインプラント周囲のセメントの層があります。接着剤とセメントでは、必ずインプラントのベースに制限された、アプリケーションを維持します。表面の導電性が低下し、tDCS 効果の低いインプラント内を広めるため残留を許可しないでください。
この手順で使用されている埋込型電極は自社作製なく医療から取得した調査会社ニューロモデュレーション デバイスの生産に特化します。インプラントはそれぞれ高さ 9 mm と外側と内側直径 5.7 mm と 3.5 mm のポリプロピレンから作られています。80 μ L の生理食塩水総量を保持できます。インプラントの優れた部分は、ピン型電極ホルダーを受信するねじを用意しています。ピン型電極ホルダーの外側のボディも、5.3 mm の外径と内径は 3.75 mm 高 4 mm ポリプロピレン製です。電極ピンは銀/塩化銀、その非溶解特性 (図 2) のために使用される不活性物質から作られます。インプラント位置は効果的な tDCS の重要な要因は、関心領域によると適切な電極のサイズを選ぶことが大切です。この動物モデルで使用するインプラントは、9.61 cm2, 36,3967 μ A/cm2の電流密度の結果意図した脳座標から半径 1.75 mm 広がって電場の面積を占めています。おそらく、このプロトコルで実行 tDCS 刺激は、M1 と M2 の野に指示された主。
通常、電極形状は、(anodalと比較し,) 目的の興奮あるいは抑制の刺激効果によって異なります。電流がアノード、カソードの方向にからフローが常に、反転端子位置に電極を置くことによって別の生理効果ことができます。たとえば、イオンの陰極、陽極の方向に流れ、プロシージャは通常24, 刺激として定義されます。この実験では、陽極は M1 ・ M2 野上に置かれたし、陰極は動物の胸郭上下に置かれた anodal の刺激を行った。したがって、tDCS セットアップ時に刺激が興奮性電位25を生成することが期待されます。TDCS 効果は、現在の強度と持続時間の変化を調整できます。齧歯動物の研究のほとんどは、0.2 から 1.0 に変化する電流を使用している mA。tDCS 電流は発熱集中して電極を通過する予定です。動物の頭に tDCS 電極の接触は避けなければなりません。実施媒体の使用する電極と頭蓋骨の間の距離を伸ばすし、生体組織にローカル化学反応の有害な影響を防ぐことができます。液体の行動メディアで高いイオン濃度は、ガスの形成を引き起こす可能性があり、泡に起因する電解23,24不可能です。しかし、これは等張生理食塩水液から私たち tDCS モデルで起こっている可能性が高いではない、低現在配信可能性がありますこのような合併症24の可能性を減少させます。それにもかかわらず、他の伝導媒体は、ゼリー状やクリーム状の導体24などと同様の効率で使用もできます。
TDCS 刺激を選択するときに、柔軟な構成機能を考慮することが重要です。0.35 の刺激の 1 h の予定期間を表示する 2 つの 9 V アルカリ電池によって供給刺激を用いてこのプロトコルの mA。この刺激は、齧歯動物の刺激に最適 10 μ A 分解能 0.02 に 1 mA の電流範囲を所有しています。TDCS 刺激が付いている、実際現在インジケーターお問い合わせ品質 (CQ) フィードバック システム最適な刺激条件を確認する重要です。現在のインジケーターは、プログラムされた刺激強度が満たされることを保証します。この tDCS モデルで現在の障害の最も一般的な要因食塩液中の気泡の存在であります。この問題は、実施中、動物の体内を通じて両方の電極の接触を測定する CQ フィードバック システムによって示すことができます。この実験で使用される tDCS 刺激は、1 から導かれるスケールの 10 に変化 CQ (SMARTscan) 値を表示します。このスケールは、オームの法則によると抵抗を推測することができます電圧値に基づいています。Led 1 少しまたは非定型の低抵抗、led 2 がオープン回路を示します、10 を介して led 3 示します最適な品質 (図 2-項目 C)。CQ は、電極の生存を確認する Tdc と偽の両方のグループのため毎日登録されました。7、必要な電流が配信されていることを意味より刺激セッション中に平均 CQ 値が高かったことが注目されます。全体的にみての統計的な差異は認められなかった CQ のグループまたは刺激 (図 3 a) の日の間で。さらに私たちの tDCS モデルを検証するため、5 tDCS セッション (10 分、350 μ A) が皮質の遺伝子発現を変更するかどうかを調査するための量的なポリメラーゼの連鎖反応 (qPCR) を行った。(図 3 b) 偽マウスを基準にして、Tdc グループの M1 ・ M2 野BDNFおよびGFAPの mRNA のレベルが増加したことがわかった。これらの結果は他の研究19,25と一致しています。
実験動物の神経学は、精神神経疾患との関連性を脳のメカニズムに関する新しい洞察力を提供できます。実験の構成に応じてこの動物モデルの tDCS アセンブリできます既存の光遺伝学的または同時録音および刺激、脳の多数の横のセットアップを生成する電気生理学をパッチアンプ用アダプターと組み合わせることもサンプル実験。これらのアプローチは、人間の遂行する挑戦するでしょう。したがって、現在報告された動物 tDCS の柔軟な追加を挿入する機会は、神経の理解のために顕著な貢献を tDCS とその治療上の使用のための理論的根拠の減算を提供しています。
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Disclosures
どれも
Acknowledgments
マウスのコロニーを維持するために支援ありがとう氏ロドリゴ ・ デ ・ ソウザ。L.A.V.M は、岬の研究員です。この作品は PRONEX 助成金によって支えられた (FAPEMIG: APQ-00476-14)。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| BD Ultra-Fine 50U Syringe | BD | 10033430026 | For intraperitonially injection. |
| Shaver (Philips Multigroom) | Philips (Brazil) | QG3340/16 | For surgical site trimming. |
| Surgical Equipment | |||
| Model 940 Small Animal Stereotaxic Instrument with Digital Display Console | KOPF | 940 | For animal surgical restriction and positioning. |
| Model 922 Non-Rupture 60 Degree Tip Ear Bars | KOPF | 922 | For animal surgical restriction and positioning. |
| Cannula Holder | KOPF | 1766-AP | For implant positioning. |
| Precision Stereo Zoom Binocular Microscope (III) on Boom Stand | WPI | PZMIII-BS | For bregma localization and implant positioning. |
| Temperature Control System Model | KOPF | TCAT-2LV | For animal thermal control. |
| Cold Light Source | WPI | WA-12633 | For focal brightness |
| Tabletop Laboratory Animal Anesthesia System with Scavenging | VetEquip | 901820 | For isoflurane delivery and safety. |
| VaporGuard Activated Charcoal Adsorption Filter | VetEquip | 931401 | Delivery system safety measures. |
| Model 923-B Mouse Gas Anesthesia Head Holder | KOPF | 923-B | For animal restriction and O2 and isoflurane delivery. |
| Oxygen regulator, E-cylinder | VetEquip | 901305 | For O2 regulation and delivery. |
| Oxygen hose – green | VetEquip | 931503 | For O2 and isoflurane delivery. |
| Infrared Sterilizer 800 ºC | Marconi | MA1201 | For instrument sterilization. |
| Surgical Instruments | |||
| Fine Scissors - ToughCut | Fine Science Tools | 14058-11 | For incision. |
| Surgical Hooks | INJEX | 1636 | In House Fabricated - Used to clear the surgical site from skin and fur. |
| Standard Tweezers or Forceps | - | - | For skin grasping. |
| Surgical Consumables | |||
| Vetbond | 3M | SC-361931 | For incision closing. |
| Cement and Catalyzer KIT (Duralay) | Reliance | 2OZ | For implant fixation. |
| Sterile Cotton Swabs (Autoclaved) | JnJ | 75U | For surgical site antisepsis. |
| 24 Well Plate (Tissue Culture Plate) | SARSTEDT | 831,836 | For cement preparation. |
| Application Brush | parkell | S286 | For cement mixing and application. |
| Pharmaceutics | |||
| Xylazin (ANASEDAN 2%) | Ceva Pharmaceutical (Brazil) | P10160 | For anesthesia induction. |
| Ketamine (DOPALEN 10%) | Ceva Pharmaceutical (Brazil) | P30101 | For anesthesia induction. |
| Isoflurane (100%) | Cristália (Brazil) | 100ML | For anesthesia maintenance. |
| Lidocaine (XYLESTESIN 5%) | Cristal Pharma | - | For post-surgical care. |
| Ketoprofen (PROFENID 100 mg) | Sanofi Aventis | 20ML | For post-surgical care. |
| Ringer's Lactate Solution | SANOBIOL LAB | 7898153652145 | For post-surgical care. |
| TobraDex (Dexamethasone 1 mg/g) | Alcon | 631 | For eye lubrification and protection. |
| Stimulation | |||
| Animal Transcranial Stimulator | Soterix Medical | 2100 | For current generation. |
| Pin-type electrode Holder (Cylindrical Holder Base) | Soterix Medical | 2100 | Electrode support (Implant). |
| Pin-type electrode (Ag/AgCl) | Soterix Medical | 2100 | For current delivery (electrode). |
| Pin-type electrode cap | Soterix Medical | 2100 | For implant protection. |
| Body Electrode (Ag/AgCl Coated) | Soterix Medical | 2100 | For current delivery (electrode). |
| Saline Solution (0.9%) | FarmaX | 7896902206441 | Conducting medium for current delivery. |
| Standard Tweezers or Forceps | - | - | For tDCS setup. |
| Real Time Polymerase Chain Reaction | |||
| BioRad CFX96 Real Time System | BioRad | C1000 | For qPCR |
| SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix (5 X 1mL) | BioRad | 1725271 | For qPCR |
| Hard Shell PCR Plates PCT COM 50 p/ CFX96 | BioRad | HSP9601 | For qPCR |
| Microseal "B" seal pct c/ 100 | BioRad | MSB1001 | For qPCR |
References
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