Encyclopedia of Experiments: Biology
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- सी एलिगेंस दो लिंगों में होते हैं: हर्मेफ्रोडाइट्स, जिसमें दो एक्स गुणसूत्र और पुरुष होते हैं, जिनमें केवल एक एक्स गुणसूत्र होता है जिसे एक्सओ या एक्स अशक्त कहा जाता है।
हर्मेफ्रोडाइट्स ओसाइट्स और शुक्राणु दोनों का उत्पादन करते हैं और आत्म-निषेचन द्वारा पुन: उत्पन्न कर सकते हैं। लगभग सभी गेमे एक्स गुणसूत्र ले जाते हैं, इसलिए स्वयं-निषेचन से उत्पन्न होने वाली संतान ज्यादातर हर्मेफ्रोडाइट्स होती हैं।
शायद ही कभी, एक्स गुणसूत्र गेम्टोजेनेसिस के दौरान खो जाता है, जिसके परिणामस्वरूप पुरुष संतान केवल 0.1 से 0.2% समय के बारे में होता है। यह किसी भी प्रयोग या आनुवंशिक क्रॉस के लिए पर्याप्त पुरुषों को इकट्ठा करने का व्यावहारिक तरीका नहीं है जिसके लिए हमें उनकी आवश्यकता है।
इसके बजाय, हम एक हर्मेफ्रोडिट बना सकते हैं जिसके परिणामस्वरूप लगभग आधी संतान पुरुष हो जाती है । इस आनुवंशिक क्रॉस को अंजाम देते समय, कुशल संभोग सुनिश्चित करने के लिए हर्मेफ्रोडाइट्स की तुलना में अधिक पुरुषों को शामिल करना सुनिश्चित करें । निम्नलिखित उदाहरण में, हम एक संभोग प्लेट स्थापित करेंगे और विट्रो में शुक्राणुओं को इकट्ठा करने और अध्ययन करने की तैयारी में पुरुष कीड़े को अलग करेंगे ।
- सबसे पहले, एक सूत्रकृमि विकास माध्यम या एनजीएम प्लेट के केंद्र में वरीयता प्राप्त ई कोलाई OP50 बैक्टीरिया के एक छोटे लॉन पर पांच वाइल्डटाइप पुरुषों और एक हर्मेफ्रोडिट को पार करके बड़ी संख्या में पुरुषों को प्राप्त करें। अगली पीढ़ी का लगभग 50% जंगली प्रकार के पुरुष होंगे।
एल4 चरण के पुरुषों को इकट्ठा करने के लिए, एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत विकासात्मक चरण और पूंछ आकृति विज्ञान की जांच करें। एक एल4 चरण कीड़ा पूंछ आकृति विज्ञान के आधार पर उठाया जाता है। एक नर कीड़े में गोल पूंछ होती है, जबकि एक हर्मेफ्रोडिट में एक नुकीली पूंछ होती है।
प्लैटिनम वायर का उपयोग करके, प्रति प्रयोग 7 से 10 एल4 चरण पुरुषों को चुनें और उन्हें OP50 के साथ वरीयता प्राप्त एनजीएम प्लेट में स्थानांतरित करें और उन्हें एक या दो दिन के लिए बढ़ने दें। hermaphrodites के अभाव में ब्रह्मचारी पुरुषों को बढ़ने से शुक्राणुओं के नुकसान को रोका जा सकता है और इस प्रकार, प्रायोगिक प्रक्रिया के दौरान बड़ी संख्या में शुक्राणु उपलब्ध होंगे।
