Encyclopedia of Experiments: Biology
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Transcript
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- 首先,在3个培养皿中培育胚胎。第一个是包含汉克溶液的控制板——平衡盐溶液。第二个和第三个盘子有汉克的溶液,其潜在神经毒性化合物的浓度不同。
暴露溶液中的神经毒性化合物通过被动扩散穿透胚胎的外膜,改变神经系统的注意力、协调和肌肉活动等过程。一旦胚胎发育成适龄幼虫,将每个幼虫转移到48个井板的单独井中。跟踪每种动物的治疗情况。
将井板转移到记录平台上,拉下盖子。让幼虫适应10分钟。使用软件设置光和暗周期的交替周期。
斑马鱼幼虫通常在黑暗中表现出更多的运动,在光线下的运动较少。记录控制幼虫和照射组在每个时期所走的总距离。如果这种化合物是神经毒性的,幼虫在黑暗和光线下比控制动物表现出更多的运动。
在下列协议中,我们将对暴露于神经毒性化合物的斑马鱼幼虫进行行为测试。
- 在进行实验前至少2小时,将室温设定为28摄氏度,并在48口井微板的每口井中加入800微升的暴露溶液,然后使用1毫升带修改尖端的移液器,将200微升暴露溶液中的一只幼虫转移到每口微板井中,为运动和路径角度实验做准备。
当所有参数都设置完后,调低测试室的照明,让幼虫在系统中适应10分钟。在适应期结束时,单击"实验和执行",并创建保存实验文件的文件夹。然后输入结果名称,然后单击"背景"并启动。
实验结束时,单击"实验并停止",然后将48井微板返回光孵化器进行后续实验。