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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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Ensayo de locomoción larvaria

 
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Ensayo de locomoción larvaria: Método de alto rendimiento para estudiar la toxicidad neurobehavioral de un compuesto en larvas de pez cebra

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- Para empezar, cultivar los embriones en 3 placas de Petri. La primera es una placa de control que contiene la solución de Hank- una solución de sal equilibrada.

El compuesto neurotóxico en la solución de exposición penetra en la membrana externa de los embriones por difusión pasiva y altera los procesos del sistema nervioso como la atención, coordinación y actividad muscular. Una vez que los embriones se convierten en larvas de la edad adecuada, transfiere cada larva a un pozo individual de una placa de pozo 48.

Transfiera la placa del pozo a una plataforma de grabación y tire hacia abajo de la cubierta.

Las larvas de pez cebra normalmente exhiben más movimiento en la oscuridad y menos movimiento en la luz. Registre la distancia total recorrida por las larvas del control y los grupos de exposición en cada período.

En el siguiente protocolo, realizaremos pruebas de comportamiento en las larvas de pez cebra expuestas a compuestos neurotóxicos.

- Al menos 2 horas antes de realizar un experimento, ajuste la temperatura ambiente a 28 grados Centígrados y agregue 800 microlitros de solución de exposición a cada pozo de una microplaca de 48 pozos.

Cuando se hayan establecido todos los parámetros, baje la iluminación en la sala de pruebas y permita que las larvas se aclimatan en el sistema durante 10 minutos. Al final del período de aclimatación, haga clic en Experimento y ejecución y cree la carpeta en la que se van a guardar los archivos experimentales.

Al final del experimento, haga clic en Experimentar y detener.

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