قم بتنفيذ جميع الخطوات في غطاء الدخان لمنع التعرض لأبخرة المذيبات.
1. اختيار مذيب
- ضع 50 ملغ من العينة (N-bromosuccinimide) في قارورة Erlenmeyer.
- أضف 0.5 مل من المذيب المغلي (الماء). إذا ذابت العينة تماما ، فإن الذوبان في المذيب البارد يكون مرتفعا جدا بحيث لا يمكن أن يكون مذيبا جيدا لإعادة التبلور.
- إذا لم تذوب العينة في المذيب البارد ، فقم بتسخين أنبوب الاختبار حتى يغلي المذيب.
- إذا لم تذوب العينة تماما في هذه المرحلة ، أضف المزيد من المذيب المغلي من حيث القطرة ، حتى تذوب كل المواد الصلبة. إذا استغرق الأمر أكثر من 3 مل لإذابة العينة في المذيب الساخن ، فمن المحتمل أن تكون قابلية الذوبان في هذا المذيب منخفضة جدا لجعلها مذيبا جيدا لإعادة التبلور.
- إذا لم يكن الخيار الأول للمذيب مذيبا جيدا لإعادة التبلور ، فجرب الآخرين. إذا تعذر العثور على مذيب واحد يعمل ، فجرب نظاما ثنائي المذيبات.
- إذا لم تتمكن من العثور على نظام مذيب واحد مناسب ، فقد يكون من الضروري وجود زوج مذيب. عند تحديد زوج المذيبات ، هناك العديد من الاعتبارات الرئيسية: 1) يجب أن يذوب المذيب الأول المادة الصلبة بسهولة. 2) يجب أن يكون المذيب الثاني قابلا للامتزاج مع المذيب 1 st ، ولكن لديه قابلية ذوبان أقل بكثير للمذاب.
- كقاعدة عامة ، "الإعجاب ، يذوب ، الإعجاب" ، مما يعني أن المركبات القطبية تميل إلى أن تكون قابلة للذوبان في المذيبات القطبية ، وغالبا ما تكون المركبات غير القطبية مركبات غير قطبية أكثر قابلية للذوبان.
- أزواج المذيبات الشائعة ( الجدول 1 )
- تأكد من أن درجة غليان المذيب لا تقل عن 40 درجة مئوية ، لذلك هناك فرق معقول في درجة الحرارة بين مذيب الغليان والمذيب في درجة حرارة الغرفة.
- تأكد من أن درجة غليان المذيب أقل من 120 درجة مئوية ، لذلك من الأسهل إزالة آخر آثار المذيب من البلورات.
- تأكد أيضا من أن درجة غليان المذيب أقل من نقطة انصهار المركب ، لذلك يتشكل المركب على شكل بلورات صلبة وليس زيتا غير قابل للذوبان.
- تأكد من أن الشوائب إما غير قابلة للذوبان في المذيب الساخن (بحيث يمكن تصفيتها على الساخن ، بمجرد إذابة المركب) أو قابلة للذوبان في المذيب البارد (حتى تظل مذابة أثناء العملية بأكملها).
2. إذابة العينة في مذيب ساخن
- ضع المركب المراد إعادة بلورة في قارورة إرلينماير. هذا خيار أفضل من الدورق ، لأن الجوانب المنحدرة تساعد في حبس أبخرة المذيبات وإبطاء معدل التبخر.
- ضع المذيب (الماء) في قارورة إرلينماير منفصلة ، وأضف رقائق الغليان أو لوح التقليب لإبقائه يغلي بسلاسة. سخنيها حتى الغليان على لوح تسخين.
- أضف المذيبات الساخنة إلى قارورة في درجة حرارة الغرفة تحتوي على المركب في أجزاء صغيرة ، مع الدوران بعد كل إضافة ، حتى يذوب المركب تماما.
- أثناء عملية الذوبان ، حافظ على المحلول ساخنا في جميع الأوقات عن طريق وضعه على لوح التسخين أيضا. لا تضيف المزيد من المذيبات الساخنة أكثر من اللازم - يكفي فقط لإذابة العينة.
- إذا كان جزء من المادة الصلبة لا يبدو أنه يذوب ، حتى بعد إضافة المزيد من المذيبات الساخنة ، فمن المحتمل أن يكون ذلك بسبب وجود شوائب غير قابلة للذوبان. إذا حدث هذا ، توقف عن إضافة المذيب وقم بإجراء ترشيح ساخن قبل المتابعة.
- لإجراء ترشيح ساخن ، قم بطي قطعة من ورق الترشيح على شكل مخروطي مخدد وضعها في قمع زجاجي بدون جذع.
- أضف 10-20٪ فائض من المذيب الساخن إلى المحلول الساخن للسماح بالتبخر في الإجراء.
- صب المحلول من خلال الورق. إذا بدأت البلورات في التكون في أي وقت أثناء العملية ، أضف جزءا صغيرا من المذيب الدافئ لإذابتها.
3. تبريد الحل
- ضع القارورة التي تحتوي على المركب المذاب على سطح لا ينقل الحرارة بسرعة كبيرة ، مثل منشفة ورقية موضوعة على سطح المنضدة.
- قم بتغطية القارورة برفق لأنها تبرد لمنع التبخر ومنع الغبار من السقوط في المحلول.
- اترك القارورة دون إزعاج حتى تبرد إلى درجة حرارة الغرفة.
- بمجرد تكوين البلورات ، ضع المحلول في حمام جليدي لضمان الحصول على أكبر قدر ممكن من البلورات. يجب ترك المحاليل دون إزعاج في الحمام الجليدي لمدة 30 دقيقة إلى 1 ساعة ، أو حتى يبدو أن المركب قد تبلور تماما خارج المحلول.
- إذا لم يكن هناك تكوين بلوري واضح ، فيمكن إحداثه عن طريق خدش الجدران الداخلية للقارورة بقضيب زجاجي أو عن طريق إضافة بلورة بذرة صغيرة من نفس المركب.
- إذا كان هذا لا يزال يفشل في العمل ، فمن المحتمل أن يكون هناك الكثير من المذيبات. أعد تسخين المحلول ، واترك بعض المذيبات يغلي ، ثم قم بتبريده.
4. عزل وتجفيف البلورات
- ضع القارورة الباردة التي تحتوي على البلورات المشكلة حديثا على سطح المنضدة.
- قم بتغطية القارورة برفق لمنع التبخر ومنع الغبار من السقوط في المحلول.
- اعزل البلورات عن طريق الترشيح الفراغي ، باستخدام قمع Büchner أو Hirsch (قم بتثبيت القارورة على حامل الحلقة أولا).
- اشطف البلورات الموجودة على قمع Büchner بكمية صغيرة من المذيبات الباردة الطازجة (نفس المذيب المستخدم لإعادة التبلور) لإزالة أي شوائب قد تلتصق بالبلورات.
- لتجفيف البلورات ، اتركها في قمع المرشح واسحب الهواء من خلالها لعدة دقائق. يمكن أيضا تجفيف البلورات بالهواء عن طريق السماح لها بالوقوف مكشوفة لعدة ساعات أو أيام. تشمل الطرق الأكثر كفاءة التجفيف بالفراغ أو وضعه في المجفف.
| المذيب القطبي | مذيب قطبي أقل |
| أسيتات الإيثيل | الهكسان |
| الميثانول | كلوريد الميثيلين |
| ماء | الإيثانول |
| تولوين | الهكسان |
الجدول 1. أزواج المذيبات الشائعة.
المصدر: مختبر الدكتور جيمي فرانكو - كلية ميريماك
إعادة التبلور هي تقنية تستخدم لتنقية المركبات الصلبة. 1 تميل المواد الصلبة إلى أن تكون أكثر قابلية للذوبان في السوائل الساخنة منها في السوائل الباردة. أثناء إعادة التبلور ، يتم إذابة مركب صلب غير نقي في سائل ساخن حتى يتشبع المحلول ، ثم يسمح للسائل بالتبريد. 2 يجب أن يشكل المركب بعد ذلك بلورات نقية نسبيا. من الناحية المثالية ، ستبقى أي شوائب موجودة في المحلول ولن يتم دمجها في البلورات النامية ( الشكل 1 ). يمكن بعد ذلك إزالة البلورات من المحلول عن طريق الترشيح. ليس كل المركب قابلا للاسترداد - سيبقى البعض في المحلول وسيتم فقده.
لا ينظر إلى إعادة التبلور بشكل عام على أنها تقنية فصل. بدلا من ذلك ، إنها تقنية تنقية تتم فيها إزالة كمية صغيرة من الشوائب من المركب. ومع ذلك ، إذا كانت خصائص الذوبان لمركبين مختلفة بما فيه الكفاية ، فيمكن استخدام إعادة التبلور لفصلهما ، حتى لو كانا موجودين بكميات متساوية تقريبا. تعمل إعادة التبلور بشكل أفضل عندما تتم إزالة معظم الشوائب بالفعل بطريقة أخرى ، مثل الاستخراج أو كروماتوغرافيا العمود.
الشكل 1 . المخطط العام لإعادة التبلور.
قم بتنفيذ جميع الخطوات في غطاء الدخان لمنع التعرض لأبخرة المذيبات.
1. اختيار مذيب
- ضع 50 ملغ من العينة (N-bromosuccinimide) في قارورة Erlenmeyer.
- أضف 0.5 مل من المذيب المغلي (الماء). إذا ذابت العينة تماما ، فإن الذوبان في المذيب البارد يكون مرتفعا جدا بحيث لا يمكن أن يكون مذيبا جيدا لإعادة التبلور.
- إذا لم تذوب العينة في المذيب البارد ، فقم بتسخين أنبوب الاختبار حتى يغلي المذيب.
- إذا لم تذوب العينة تماما في هذه المرحلة ، أضف المزيد من المذيب المغلي من حيث القطرة ، حتى تذوب كل المواد الصلبة. إذا استغرق الأمر أكثر من 3 مل لإذابة العينة في المذيب الساخن ، فمن المحتمل أن تكون قابلية الذوبان في هذا المذيب منخفضة جدا لجعلها مذيبا جيدا لإعادة التبلور.
- إذا لم يكن الخيار الأول للمذيب مذيبا جيدا لإعادة التبلور ، فجرب الآخرين. إذا تعذر العثور على مذيب واحد يعمل ، فجرب نظاما ثنائي المذيبات.
- إذا لم تتمكن من العثور على نظام مذيب واحد مناسب ، فقد يكون من الضروري وجود زوج مذيب. عند تحديد زوج المذيبات ، هناك العديد من الاعتبارات الرئيسية: 1) يجب أن يذوب المذيب الأول المادة الصلبة بسهولة. 2) يجب أن يكون المذيب الثاني قابلا للامتزاج مع المذيب 1 st ، ولكن لديه قابلية ذوبان أقل بكثير للمذاب.
- كقاعدة عامة ، "الإعجاب ، يذوب ، الإعجاب" ، مما يعني أن المركبات القطبية تميل إلى أن تكون قابلة للذوبان في المذيبات القطبية ، وغالبا ما تكون المركبات غير القطبية مركبات غير قطبية أكثر قابلية للذوبان.
- أزواج المذيبات الشائعة ( الجدول 1 )
- تأكد من أن درجة غليان المذيب لا تقل عن 40 درجة مئوية ، لذلك هناك فرق معقول في درجة الحرارة بين مذيب الغليان والمذيب في درجة حرارة الغرفة.
- تأكد من أن درجة غليان المذيب أقل من 120 درجة مئوية ، لذلك من الأسهل إزالة آخر آثار المذيب من البلورات.
- تأكد أيضا من أن درجة غليان المذيب أقل من نقطة انصهار المركب ، لذلك يتشكل المركب على شكل بلورات صلبة وليس زيتا غير قابل للذوبان.
- تأكد من أن الشوائب إما غير قابلة للذوبان في المذيب الساخن (بحيث يمكن تصفيتها على الساخن ، بمجرد إذابة المركب) أو قابلة للذوبان في المذيب البارد (حتى تظل مذابة أثناء العملية بأكملها).
2. إذابة العينة في مذيب ساخن
- ضع المركب المراد إعادة بلورة في قارورة إرلينماير. هذا خيار أفضل من الدورق ، لأن الجوانب المنحدرة تساعد في حبس أبخرة المذيبات وإبطاء معدل التبخر.
- ضع المذيب (الماء) في قارورة إرلينماير منفصلة ، وأضف رقائق الغليان أو لوح التقليب لإبقائه يغلي بسلاسة. سخنيها حتى الغليان على لوح تسخين.
- أضف المذيبات الساخنة إلى قارورة في درجة حرارة الغرفة تحتوي على المركب في أجزاء صغيرة ، مع الدوران بعد كل إضافة ، حتى يذوب المركب تماما.
- أثناء عملية الذوبان ، حافظ على المحلول ساخنا في جميع الأوقات عن طريق وضعه على لوح التسخين أيضا. لا تضيف المزيد من المذيبات الساخنة أكثر من اللازم - يكفي فقط لإذابة العينة.
- إذا كان جزء من المادة الصلبة لا يبدو أنه يذوب ، حتى بعد إضافة المزيد من المذيبات الساخنة ، فمن المحتمل أن يكون ذلك بسبب وجود شوائب غير قابلة للذوبان. إذا حدث هذا ، توقف عن إضافة المذيب وقم بإجراء ترشيح ساخن قبل المتابعة.
- لإجراء ترشيح ساخن ، قم بطي قطعة من ورق الترشيح على شكل مخروطي مخدد وضعها في قمع زجاجي بدون جذع.
- أضف 10-20٪ فائض من المذيب الساخن إلى المحلول الساخن للسماح بالتبخر في الإجراء.
- صب المحلول من خلال الورق. إذا بدأت البلورات في التكون في أي وقت أثناء العملية ، أضف جزءا صغيرا من المذيب الدافئ لإذابتها.
3. تبريد الحل
- ضع القارورة التي تحتوي على المركب المذاب على سطح لا ينقل الحرارة بسرعة كبيرة ، مثل منشفة ورقية موضوعة على سطح المنضدة.
- قم بتغطية القارورة برفق لأنها تبرد لمنع التبخر ومنع الغبار من السقوط في المحلول.
- اترك القارورة دون إزعاج حتى تبرد إلى درجة حرارة الغرفة.
- بمجرد تكوين البلورات ، ضع المحلول في حمام جليدي لضمان الحصول على أكبر قدر ممكن من البلورات. يجب ترك المحاليل دون إزعاج في الحمام الجليدي لمدة 30 دقيقة إلى 1 ساعة ، أو حتى يبدو أن المركب قد تبلور تماما خارج المحلول.
- إذا لم يكن هناك تكوين بلوري واضح ، فيمكن إحداثه عن طريق خدش الجدران الداخلية للقارورة بقضيب زجاجي أو عن طريق إضافة بلورة بذرة صغيرة من نفس المركب.
- إذا كان هذا لا يزال يفشل في العمل ، فمن المحتمل أن يكون هناك الكثير من المذيبات. أعد تسخين المحلول ، واترك بعض المذيبات يغلي ، ثم قم بتبريده.
4. عزل وتجفيف البلورات
- ضع القارورة الباردة التي تحتوي على البلورات المشكلة حديثا على سطح المنضدة.
- قم بتغطية القارورة برفق لمنع التبخر ومنع الغبار من السقوط في المحلول.
- اعزل البلورات عن طريق الترشيح الفراغي ، باستخدام قمع Büchner أو Hirsch (قم بتثبيت القارورة على حامل الحلقة أولا).
- اشطف البلورات الموجودة على قمع Büchner بكمية صغيرة من المذيبات الباردة الطازجة (نفس المذيب المستخدم لإعادة التبلور) لإزالة أي شوائب قد تلتصق بالبلورات.
- لتجفيف البلورات ، اتركها في قمع المرشح واسحب الهواء من خلالها لعدة دقائق. يمكن أيضا تجفيف البلورات بالهواء عن طريق السماح لها بالوقوف مكشوفة لعدة ساعات أو أيام. تشمل الطرق الأكثر كفاءة التجفيف بالفراغ أو وضعه في المجفف.
| المذيب القطبي | مذيب قطبي أقل |
| أسيتات الإيثيل | الهكسان |
| الميثانول | كلوريد الميثيلين |
| ماء | الإيثانول |
| تولوين | الهكسان |
الجدول 1. أزواج المذيبات الشائعة.
إعادة التبلور هي تقنية تنقية للمركبات الصلبة.
لإجراء إعادة التبلور ، يتم خلط مركب صلب غير نقي مع مذيب ساخن لتشكيل محلول مشبع. عندما يبرد هذا المحلول ، تقل قابلية ذوبان المركب ، وتنمو البلورات النقية من المحلول.
غالبا ما تستخدم إعادة التبلور كخطوة أخيرة بعد طرق الفصل الأخرى مثل الاستخراج أو كروماتوغرافيا العمود. يمكن أيضا استخدام إعادة التبلور لفصل مركبين بخصائص ذوبان مختلفة جدا. سيوضح هذا الفيديو اختيار المذيبات لإعادة التبلور ، وتنقية مركب عضوي من المحلول ، وسيقدم بعض التطبيقات في الكيمياء.
يبدأ التبلور بالتنوي. تتجمع الجزيئات المذابة معا لتشكيل بلورة صغيرة مستقرة ، يتبعها نمو بلوري. يحدث التنوي بشكل أسرع في مواقع التنوي مثل بلورات البذور أو الخدوش أو الشوائب الصلبة منه تلقائيا في المحلول. قد يشجع التحريض أيضا على التنوي السريع. ومع ذلك ، يمكن أن يؤدي النمو السريع إلى دمج الشوائب إذا لم يتم زراعتها في الظروف المثلى.
تميل قابلية ذوبان المركب إلى الزيادة مع درجة الحرارة ، وتعتمد بشكل كبير على اختيار المذيب. كلما زاد الاختلاف في الذوبان عند درجات الحرارة العالية والمنخفضة ، زادت احتمالية خروج المذاب من المحلول أثناء تبريده وتكوين بلورات.
يجب أن يكون للمذيب المختار نقطة غليان لا تقل عن 40 ؟؟ C لذلك هناك فرق كبير في درجة الحرارة بين درجة الحرارة الغليان ودرجة حرارة الغرفة. يجب أن تكون نقطة غليان المذيب أيضا أقل من نقطة انصهار المذاب لتمكين التبلور. يؤدي التبريد السريع للمحلول إلى تكوين العديد من مواقع التنوي ، وبالتالي يفضل نمو العديد من البلورات الصغيرة. ومع ذلك ، فإن التبريد البطيء يحفز تكوين عدد أقل من مواقع التنوي ، ويفضل بلورات أكبر وأكثر نقاء. وبالتالي ، يفضل التبريد البطيء.
بالإضافة إلى ذلك ، يمكن اختيار مذيب لتقليل الشوائب. إذا كانت شوائب المحلول أكثر قابلية للذوبان من المذاب نفسه ، فيمكن غسلها من البلورات المشكلة بالكامل بمذيب بارد. ومع ذلك ، إذا كانت الشوائب أقل قابلية للذوبان ، فسوف تتبلور أولا ، ويمكن بعد ذلك تصفية من المحلول الساخن ، قبل إعادة بلورة المذاب.
إذا لم يكن هناك مذيب واحد له الخصائص الضرورية ، فيمكن استخدام خليط من المذيبات. بالنسبة لزوج المذيبات ، يجب أن يذوب المذيب الأول المادة الصلبة بسهولة. يجب أن يكون للمذيب الثاني قابلية ذوبان أقل للمذاب وأن يكون قابلا للامتزاج مع المذيب الأول. تشمل أزواج المذيبات الشائعة أسيتات الإيثيل والهكسان والتولوين والهكسان والميثانول وثنائي كلورو الميثان والماء والإيثانول.
الآن بعد أن فهمت مبادئ إعادة التبلور ، دعنا ننتقل إلى إجراء لتنقية مركب عضوي عن طريق إعادة التبلور.
لبدء هذا الإجراء، ضع 50 ملغ من العينة في أنبوب اختبار زجاجي.
أضف 0.5 مل من مذيب درجة حرارة الغرفة. إذا يذوب المركب تماما ، فإن الذوبان في المذيب البارد يكون مرتفعا جدا بحيث لا يمكن استخدامه لإعادة التبلور. خلاف ذلك ، قم بتسخين الخليط في أنبوب الاختبار حتى الغليان.
إذا لم يذوب المركب تماما في المذيب المغلي ، قم بتسخين جزء آخر من المذيب حتى الغليان. أضف المذيب المغلي بالتنقيط إلى أنبوب الاختبار حتى تذوب المادة الصلبة تماما أو حتى يحتوي أنبوب الاختبار على 3 مل من المذيب. إذا كانت المادة الصلبة لا تزال لا تذوب ، فإن قابليتها للذوبان في هذا المذيب منخفضة جدا.
تأكد من أن الشوائب إما غير قابلة للذوبان في المذيب الساخن بحيث يمكن ترشيحها بعد الذوبان أو قابلة للذوبان في المذيب البارد حتى تبقى في المحلول بعد اكتمال إعادة التبلور. إذا كان المذيب يفي بجميع المعايير ، فهو مناسب لإعادة التبلور.
لبدء إعادة التبلور ، قم بتسخين المذيب حتى يغلي على طبق ساخن في قارورة Erlenmeyer باستخدام شريط تقليب. ضع المركب المراد إعادة بلوره في قارورة إرلينماير أخرى في درجة حرارة الغرفة.
بعد ذلك ، أضف جزءا صغيرا من المذيب الساخن إلى المركب. حركي المزيج في القارورة ثم ضعيه على الطبق الساخن أيضا. كرر هذه العملية حتى تذوب العينة تماما أو حتى لا تتسبب إضافة المذيب في مزيد من الذوبان.
أضف 10٪ من المذيب الساخن إلى المحلول لحساب التبخر. ضع ورق الترشيح في إعداد قمع B?chner. قم بتصفية المحلول لإزالة الشوائب غير القابلة للذوبان. إذا تشكلت بلورات أثناء الترشيح ، قم بإذابتها بقطرات من المذيبات الساخنة.
قم بتبريد المحلول على الطاولة. قم بتغطية القارورة لمنع فقدان المذيبات للتبخر وإبعاد الجسيمات عن المحلول.
اترك القارورة دون إزعاج حتى تبرد إلى درجة حرارة الغرفة. قد يتسبب التحريض أثناء التبريد في التبلور السريع ، مما ينتج عنه بلورات نقية أقل. إذا لم يكن هناك تكوين بلوري واضح عند التبريد ، فقم بتحفيز التبلور عن طريق خدش الجدران الداخلية للقارورة برفق بقضيب زجاجي أو إضافة بلورة بذرة صغيرة للمركب الذي يتم إعادة تبلوره.
إذا تعذر تحفيز تكوين البلورة ، فأعد تسخين المحلول لغلي بعض المذيب ، ثم قم بتبريد المذيب إلى درجة حرارة الغرفة مرة أخرى.
بمجرد تكوين البلورات ، قم بإعداد حمام جليدي. مع الحفاظ على المحلول مغطى ، قم بتبريد المحلول في الحمام الجليدي حتى يبدو أن التبلور قد اكتمل.
قم بتثبيت قارورة الترشيح بحامل حلقي وقم بتوصيل القارورة بخط تفريغ. ضع قمع B?chner ومحول في فم القارورة.
صب خليط المحلول والبلورات في القمع وابدأ الترشيح بالفراغ. اشطف أي بلورات متبقية في القارورة في القمع بمذيب بارد. اغسل البلورات الموجودة على القمع بمذيب بارد لإزالة الشوائب القابلة للذوبان.
استمر في سحب الهواء عبر القمع لتجفيف البلورات ثم قم بإيقاف تشغيل مضخة التفريغ. إذا لزم الأمر ، قد يسمح للبلورات بالوقوف في درجة حرارة الغرفة لتجف في الهواء أو وضعها في مجفف قبل تخزين المادة الصلبة المتبلورة.
تمت إزالة الشوائب الصفراء الموجودة في المركب الخام ، مما ينتج عنه مادة صلبة بيضاء فاتحة. بناء على هوية المركب والشوائب ، يمكن التحقق من نقاء البلورات عن طريق التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي أو قياسات درجة الانصهار أو الفحص البصري.
التنقية عن طريق إعادة التبلور هي أداة مهمة للتخليق والتحليل الكيميائي.
علم البلورات بالأشعة السينية هو تقنية توصيف قوية تحدد التركيب الذري ثلاثي الأبعاد للجزيء. هذا يتطلب بلورة مفردة نقية ، يتم الحصول عليها عن طريق إعادة التبلور. يصعب تبلور بعض فئات الجزيئات مثل البروتينات ، لكن هياكلها مهمة للغاية لفهم وظائفها الكيميائية. من خلال الاختيار الدقيق لظروف إعادة التبلور ، يمكن تحليل هذه الفئات من الجزيئات عن طريق علم البلورات بالأشعة السينية. لمعرفة المزيد حول هذه العملية ، شاهد فيديو هذه المجموعة حول زراعة البلورات لعلم البلورات.
يمكن أن تسبب المواد المتفاعلة غير النقية ردود فعل جانبية غير مرغوب فيها. تعمل تنقية المواد المتفاعلة عن طريق إعادة التبلور على تحسين نقاء المنتج وإنتاجيته. بمجرد عزل المنتج الصلب وغسله ، يمكن أيضا زيادة إنتاجية التفاعل عن طريق إزالة المواد المتطايرة من المرشح وإعادة بلورة المنتج من المادة الصلبة الناتجة. يتم التعبير عن البروتينات المضادة للتجمد ، أو AFPs ، في العديد من الكائنات الحية التي تعيش في البيئات الجليدية. تعيق AFPs نمو الجليد الداخلي عن طريق الارتباط بطائرات الجليد ، مما يمنع إعادة التبلور إلى بلورات جليدية أكبر. ترتبط AFPs المختلفة بأنواع مختلفة من طائرات بلورات الجليد. يتضمن التحقيق في آليات ربط AFP امتصاصها على بلورات ثلجية مفردة. يعد النمو السليم لبلورة ثلج واحدة أمرا ضروريا للحصول على نتائج واضحة وغنية بالمعلومات. هذه البروتينات لها تطبيقات من هندسة المحاصيل المقاومة للبرد إلى الجراحة البردية.
لقد شاهدت للتو مقدمة JoVE لتنقية المركبات عن طريق إعادة التبلور. يجب أن تكون الآن على دراية بمبادئ التقنية وإجراء التنقية وبعض تطبيقات إعادة التبلور في الكيمياء.
شكرا للمشاهدة!
يحدد معدل التبريد حجم وجودة البلورات: يفضل التبريد السريع البلورات الصغيرة ، والتبريد البطيء يفضل نمو بلورات كبيرة وأنقى بشكل عام. عادة ما يكون معدل إعادة التبلور أكبر عند حوالي 50 درجة مئوية تحت نقطة انصهار المادة. يحدث الحد الأقصى لتكوين البلورات عند حوالي 100 درجة مئوية تحت نقطة الانصهار.
على الرغم من أن مصطلحي "التبلور" و "إعادة التبلور" يستخدمان أحيانا بالتبادل ، إلا أنهما يشيران تقنيا إلى عمليات مختلفة. يشير التبلور إلى تكوين منتج جديد غير قابل للذوبان عن طريق تفاعل كيميائي. ثم يترسب هذا المنتج من محلول التفاعل كمادة صلبة غير متبلورة تحتوي على العديد من الشوائب المحاصرة. إعادة التبلور لا تنطوي على تفاعل كيميائي. يتم إذابة المنتج الخام ببساطة في محلول ، ثم يتم تغيير الظروف للسماح للبلورات بإعادة التكوين. تنتج إعادة التبلور منتجا نهائيا أكثر نقاء. لهذا السبب ، تتضمن الإجراءات التجريبية التي تنتج منتجا صلبا عن طريق التبلور عادة خطوة إعادة بلورة نهائية لإعطاء المركب النقي.
يظهر مثال على نتائج إعادة التبلور في الشكل 2 . تمت إزالة الشوائب الصفراء الموجودة في المركب الخام ، ويترك المنتج النقي كمادة صلبة بيضاء معطاء. يمكن الآن التحقق من نقاء المركب المعاد تبلوره عن طريق التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي (NMR) أو ، إذا كان مركبا بنقطة انصهار منشورة ، من خلال مدى تشابه نقطة انصهاره مع نقطة انصهار الأدبيات. إذا لزم الأمر ، يمكن إجراء عمليات إعادة بلورة متعددة حتى تصبح النقاء مرتفعة بشكل مقبول.
الشكل 2 . 2 أ) مركب خام (يسار) ، 2 ب) منتج معاد تبلوره قبل الترشيح (الوسط) ، و 2 ج) نفس المركب بعد إعادة التبلور (يمين).
إعادة التبلور هي طريقة لتنقية المركب عن طريق إزالة أي شوائب قد تختلط به. يعمل بشكل أفضل عندما يكون المركب قابلا للذوبان في مذيب ساخن ، ولكنه غير قابل للذوبان في النسخة الباردة من نفس المذيب. يجب أن يكون المركب صلبا في درجة حرارة الغرفة. غالبا ما تستخدم إعادة التبلور كخطوة تنظيف نهائية ، بعد طرق أخرى (مثل الاستخراج أو كروماتوغرافيا العمود) الفعالة في إزالة كميات أكبر من الشوائب ، ولكنها لا ترفع نقاء المركب النهائي إلى مستوى عال بما فيه الكفاية.
إعادة التبلور هي التقنية الوحيدة التي يمكن أن تنتج بلورات مفردة نقية ومثالية تماما من المركب. يمكن استخدام هذه البلورات لتحليل الأشعة السينية ، وهي السلطة المطلقة في تحديد الهيكل والشكل ثلاثي الأبعاد للجزيء. في هذه الحالات ، يسمح لإعادة التبلور بالمضي قدما ببطء شديد ، على مدار أسابيع إلى شهور ، للسماح للشبكة البلورية بالتشكل دون إدراج أي شوائب. هناك حاجة إلى أواني زجاجية خاصة للسماح للمذيب بالتبخر ببطء قدر الإمكان خلال هذا الوقت ، أو للسماح للمذيب بالاختلاط ببطء شديد مع مذيب آخر يكون فيه المركب غير قابل للذوبان (يسمى إضافة مضاد المذيبات).
تستخدم صناعة الأدوية أيضا بشكل مكثف إعادة التبلور ، لأنها وسيلة للتنقية يمكن توسيع نطاقها بسهولة أكبر من كروماتوغرافيا العمود. 3 دفعت أهمية إعادة التبلور في التطبيقات الصناعية المعلمين إلى التأكيد على إعادة التبلور في المناهج المختبرية. 4 على سبيل المثال ، عادة ما يتم عزل عقار ستافودين ، الذي يستخدم للحد من آثار فيروس نقص المناعة البشرية ، عن طريق التبلور. 5 في كثير من الأحيان ، تحتوي الجزيئات على العديد من الهياكل البلورية المختلفة المتاحة ، لذلك من الضروري للبحث تقييم وفهم الشكل البلوري المعزول في ظل الظروف ، مثل معدل التبريد وتكوين المذيبات وما إلى ذلك. قد يكون لهذه الأشكال البلورية المختلفة خصائص بيولوجية مختلفة أو يتم امتصاصها في الجسم بمعدلات مختلفة.
الاستخدام الأكثر شيوعا لإعادة التبلور هو صنع حلوى الصخور. تصنع الحلوى الصخرية عن طريق إذابة السكر في الماء الساخن إلى درجة التشبع. يتم وضع العصي الخشبية في المحلول ويسمح للمحلول بالتبريد والتبخر ببطء. بعد عدة أيام ، نمت بلورات كبيرة من السكر في جميع أنحاء العصي الخشبية.
Chapters in this video
0:00
Overview
0:58
Principles of Recrystallization
3:41
Selecting a Solvent
4:50
Recrystallization
7:40
Applications
9:31
Summary
Videos from this collection:
Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved