معالجة أرجل الحشرات للفحص المجهري الفلوري: طريقة للحفاظ على الهياكل العصبية العضلية للتصوير

- للبدء ، اغمر الحشرات المخدرة في محلول الإيثانول بنسبة 70٪ لتقليل مقاومة البشرة للماء. بعد ذلك ، اغسل الأنسجة واخترقها بمحلول ملحي مخزن بالفوسفات يحتوي على منظف لمدة 30 دقيقة على الأقل للسماح باختراق الأنسجة أثناء التثبيت.

بعد ذلك ، قم بإزالة الرأس والبطن من الصدر. استخدم الملقط لتطبيق ضغط لطيف على تقاطع coxa-thorax ، وافصل الساق. ضع الساقين بحذر في محلول بارافورمالدهيد مثلج بنسبة 4٪ طوال الليل للسماح لها باختراق الأنسجة. يعمل بارافورمالدهيد على إصلاح الأنسجة عن طريق ربط البروتينات.

ثم قم بإزالة محلول التثبيت وغسل الأنسجة عدة مرات باستخدام محلول ملحي يحتوي على منظف يحتوي على الفوسفات. قبل التركيب ، ضع الأرجل في عازلة تثبيت نقية أو مخففة قليلا ليوم واحد على الأقل لتوفير وقت كاف لدخول المخزن المؤقت إلى الأنسجة.

أخيرا ، قم بتركيب الأرجل في قطرة من وسط التركيب. استخدم فاصلا بين شريحة المجهر وقلة الغطاء لمنع العينة من التلف ، وقم بتأمين الحامل بطلاء الأظافر.

في المثال التالي ، سنرى تشريح وتثبيت وتركيب ذبابة الفاكهة السوداء أرجل البطن.

- ابدأ بملء العدد المناسب من الآبار في صفيحة زجاجية متعددة الآبار بنسبة 70٪ من الإيثانول. استخدم فرشاة لإضافة 15 إلى 20 ذبابا مخدرا بثاني أكسيد الكربون من أي عمر أو جنس إلى كل بئر ، وامسح الذباب برفق في الإيثانول حتى يتم غمره بالكامل.

بعد ما لا يزيد عن دق