موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:13 دقيقة • July 8th, 2025
للكشف عن تفاعلات تحليل الترابط باستخدام قياس تداخل الطبقة الحيوية ، BLI ، ابدأ بمستشعر حيوي من الألياف الضوئية رطب مثبت على حامل أداة BLI ، مضبوطة على البرنامج المطلوب.
طرف المستشعر الحيوي مغطى بطبقة متوافقة حيويا مثبتة بحمض النيكل والنيتريلوترياتيك ، مجموعات Ni-NTA. اغمر طرف المستشعر الحيوي في المخزن المؤقت.
تنبعث الأداة من الضوء الأبيض باتجاه المستشعر الحيوي ، والذي ينعكس من واجهتين: المرجع الداخلي أو الطبقة البصرية ، والطبقة المتوافقة حيويا. تتداخل الحزم المنعكسة بشكل بناء أو مدمر عند أطوال موجية ضوئية مختلفة. يكتشف الكاشف الضوئي نمط التداخل الناتج.
بعد قياس استجابة التداخل الأساسي ، أضف محلول الترابط الموسومة بالهيستيدين. ترتبط علامات الهيستيدين بكتيونات النيكل الموجودة على المستشعر الحيوي ، مما يؤدي إلى شل حركة الروابط على الحافة.
بعد الارتباط ، ينعكس الضوء الأبيض المنبعث من الطبقة البصرية ، وتثبت الطبقة المتوافقة حيويا مع الروابط ذات السماكة البصرية المتزايدة عند الحافة. يؤدي هذا إلى زيادة المسافة بين الطبقات العاكسة ، مما يتسبب في تحول نمط التداخل وتحول الطول الموجي.
اغسل الحافة ، وإزالة الروابط غير المقيدة. احتضان بمحلول التحليل المستهدف. يرتبط التحليل بالترابط ، مما يزيد من السماكة البصرية عند الطرف ، مما يتسبب في زيادة تحول الطول الموجي.
ضع طرف المستشعر الحيوي في المخزن ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية