موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:25 دقيقة • July 8th, 2025
في البيئة المكروية للسرطان ، تطلق العدلات المنشطة مصائد عدلات خارج الخلية ، أو NETs ، تتكون من ألياف الحمض النووي خارج الخلية ، والهستوين ، والبروتينات الحبيبية ، والتي تلعب دورا مهما في تطور السرطان.
لدراسة التصاق NET للخلايا السرطانية في المختبر ، أضف تعليق NET إلى آبار الألواح متعددة الآبار. احتضان لتشكيل NET أحادي الطبقة.
بعد الحضانة ، قم بإزالة NETs غير الملتصقة.
أضف محلول بروتيني لمنع مواقع الربط الحرة في الآبار.
الخلاياالسرطانية المسماة بالفلورسنت على طبقات أحادية NET.
تتفاعل المستقبلات السطحية المحددة على الخلايا السرطانية مع NETs ، مما يسهل التصاق الخلايا.
بعد الحضانة ، تخلص من الوسائط من بئر التحكم السلبي.
أضف ديوكسيربونوكلياز لتحلل NETs ، وفصل الخلايا.
إزالة المحاليل من التحكم السلبي واختبار الآبار. استخدم المخزن المؤقت لإزالة الخلايا غير الملتصقة.
قم بإصلاح الخلايا السرطانية الملتصقة ب NETs باستخدام الفورمالديهايد.
باستخدام المجهر الفلوري ، تصور الخلايا السرطانية الفلورية الملتصقة ب NETs.
تظهر آبار الاختبار التصاق الخلايا السرطانية بشكل كبير ب NETs ، بينما تظهر NETs المعالجة بمنقوص الأكسجين ريبونوكلياز مستويات منخفضة من التصاق الخلايا السرطانية.
أضف 100 ميكرولتر من مخزون NET في كل بئر من صفيحة قاع مسطحة مكونة من 96 بئرا ، واحتضن اللوحة طوال الليل عند أربع درجات مئوية ف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية