مقايسة الترميز الشريطي للتوصيف الظاهري والوظيفي للخلايا المناعية

0 views • 5:42 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ابدأ بعينات الاختبار التي تحتوي على خلايا مناعية محفزة وثابتة.

يحفز التحفيز على التعبير عن علامات محددة في الخلايا ، بينما يحافظ التثبيت على علامات النمط الظاهري ، بما في ذلك مستضدات سطح الخلية ، وعلامات الحالة الوظيفية ، بما في ذلك السيتوكينات.

أضف مزيجا فريدا من الأجسام المضادة المترافقة بنظائر المعادن الثقيلة إلى كل عينة.

تقوم هذه التقنية بشكل فريد بترميز عينات متعددة ، وتميز كل عينة من خلال مزيجها من نظائر المعادن الثقيلة.

ترتبط الأجسام المضادة بحتومة مشتركة ، وترمز جميع الخلايا في العينات.

اجمع جميع العينات المشفرة في أنبوب واحد ، للمعالجة النهائية.

أضف كوكتيلا من الأجسام المضادة المترافقة بالمعدن لتلطيخ المستضدات السطحية.

أضف عازلة النفاذية لزيادة نفاذية غشاء الخلية للتلوين داخل الخلايا.

أضف مجموعة أخرى من الأجسام المضادة المترافقة بالمعادن لتلطيخ السيتوكينات داخل الخلايا.

يتيح الترميز الشريطي التلوين المتزامن والحصول على العينات المجمعة عبر قياس الكتلة الخلوية. تعمل هذه التقنية على زيادة كفاءة الفحص إلى أقصى حد ، وتحسين تقييم علامات الحالة المظهرية والوظيفية.

لترميز الخلايا الثابتة المحللة ، قم بإذابة العينات من التخزين 80 درجة مئوية تحت الصفر ، ببطء على الجليد. قم بتخفيف المخزن المؤقت لبيرم الترميز الشريطي 10x باستخدام PBS بمقدار 1 إلى 10 ، وقم بعمل مخزن مؤقت كاف ل 3 ملليلتر لكل عينة.

املأ حضانة واحدة غير معقمة ب CSM وواحدة بمخزن مؤقت للتجعيد الشريطي 1x. ثم أضف 1 ملليلتر من CSM المثلج إلى العينات المذابة حديثا. تخلط جيدا ، وتنقل إلى أنابيب العنقودية المصنوعة من مادة البولي بروبلين ذات العلامات المسبقة مسبقا.

الآن ، خذ عينة سعة 10 ميكرولتر ، واحسب الخلايا باستخدام عداد خلوي آلي. قم بتطبيع عدد الخلايا في كل أنبوب عنقودي عن طريق إزالة حجم الخلايا الزائدة. ثم ، قم بالطرد المركزي للخلايا عند 600 مرة جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. أعد تعليق الخلايا في 1 مليلتر من المخزن المؤقت لبيرم الترميز الشريطي 1x باستخدام ماصة متعددة القنوات ، وجهاز طرد مركزي عند 600 مرة جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، استنشق من المادة الطافية.

قم بمحاذاة أنابيب الكتلة على حامل بنفس الترتيب الموضح على مفتاح الباركود ، بحيث يتطابق العينة مع الرمز الشريطي الخاص بها. أضف 800 ميكرولتر من المخزن المؤقت لبيرم الترميز الشريطي 1x بواسطة ماصة متعددة القنوات إلى جميع العينات الموجودة في الأنابيب العنقودية، دون لمس حبيبات الخلية لتقليل فقدان الخلايا.

ثم ضع جانبا الرف مع أنابيب العنقود. قم بإزالة شرائط أنبوب مجموعة الترميز الشريطي من 20 بلكس من 20 درجة مئوية تحت الصفر، وقم بإذابة الثلج في درجة حرارة الغرفة. أضف 100 ميكرولتر من المخزن المؤقت لبيرم الترميز الشريطي 1x ، واخلطه جيدا ، وانقل 120 ميكرولترا من مزيج الباركود المعلق إلى عينات الخلية المقابلة في أنابيب العنقود.

تخلط جيدا بواسطة ماصة متعددة القنوات، بحيث لا يكون هناك تلوث متبادل بين العينات المشفرة بشكل فردي. احتضان الأنابيب العنقودية لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة للسماح للرموز الشريطية بتسمية الخلايا. بعد 30 دقيقة ، قم بالطرد المركزي للعينات عند 600 مرة جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. شفط المادة الطافية. ثم أعد تعليقها في 1 مليلتر من CSM. بعد ذلك ، أجهزة الطرد المركزي وإعادة التعليق في CSM مرة أخرى.

بعد ذلك ، جهاز الطرد المركزي عند 600 مرة غرام لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة ، وشفط المادة الطافية. باستخدام ماصة واحدة وباستخدام نفس الطرف ، انقل جميع كريات الخلايا ، وحوالي 70 إلى 80 ميكرولتر من الحجم المتبقي إلى أنبوب بوليسترين واحد. لا تقم بإخراج طرف الماصة. ضع الماصة المفردة جانبا بهذا الطرف.

باستخدام ماصة متعددة القنوات وأطراف جديدة، أضف 100 ميكرولتر من CSM إلى كل أنبوب عنقودي أصلي لزيادة استرداد الخلايا. باستخدام الماصة المفردة مع الطرف الذي تم وضعه جانبا ، انقل جميع كريات الخلايا في 100 ميكرولتر من الحجم المتبقي إلى نفس أنبوب البوليسترين. أضف CSM لأعلى أنبوب البوليسترين إلى حوالي 3 ملليلتر. عد وسجل رقم الخلية لمجموعة الباركود المجمعة. ثم ، جهاز الطرد المركزي عند 600 مرة غرام لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة ، وشفط المادة الطافية. انتقل إلى تلطيخ العينات المشفرة في نفس اليوم.

06:28

إعداد نموذج لتحليل قداس الخلوي

Related Videos

0 Views

12:34

عزل وتلطيخ الخلايا الكيراتينية الجلد الماوس لدورة الخلية تحليل محدد للتعبير البروتين الخلوي عن طريق قياس الخلايا الشامل

Related Videos

0 Views

08:09

إعداد نخاع العظام كله لتحليل الكتلة الخلايا من الخلايا العدلية النسب

Related Videos

0 Views

14:45

تعداد خلايا الدم البيضاء الكبرى الطرفية بالسكان الدم للمحاكمات متعددة المراكز السريرية باستخدام الدم الكامل الفحص Phenotyping

Related Videos

0 Views

08:17

نهج مؤتمتة شبه لإعداد الجسم المضاد الكوكتيلات لتحليل Immunophenotypic في الدم المحيطي الإنسان

Related Videos

0 Views

08:41

توصيف وظيفي من الضامة التنظيمية التي تمنع مناعة الكسب غير المشروع

Related Videos

0 Views

09:25

كشف وإثراء نادر محددة مستضد الخلايا B لتحليل النمط الظاهري وظيفة

Related Videos

0 Views

12:36

تحليل خلية واحدة من إيمونوفينوتيبي وإنتاج سيتوكين في الدم كله الطرفية عبر الخلوي الشامل

Related Videos

0 Views

09:34

اتباع نهج خلية واحدة اندماجي لتوصيف الجزيئية والتغاير إيمونوفينوتيبيك الجذعية البشرية والسكان السلف

Related Videos

0 Views

08:02

تحديد هوية الخلية المناعية ونقاوتها باستخدام PCR الكمية اللاجينية

Related Videos

0 Views

Last updated: 4 July 2026