July 29th, 2011
يقدم هذا التقرير وصفا تفصيليا للمنهجية ونتائج رسم الخرائط البصرية المتزامنة الشغاف وepicardial من الإثارة الكهربائية في الأذين الأيسر من القلب سليمة الأغنام Langendorff - perfused خلال تمتد من صنع الرجفان الأذيني.
يستخدم هذا البروتوكول رسم خرائط بصرية عالية الدقة المكانية والزمانية لفهم الآليات الكامنة وراء الرجفان الأذيني الناجم عن التمدد. يتم تحقيق ذلك عن طريق الشرح الأول ، قلب الأغنام ، وتوصيله عبر الشريان الأورطي بنظام وفرة LAN endorf مع محلول تيرو مؤكسج متداول. يستخدم البزل الحاجز الأذيني لإغلاق جميع فتحات الوريد باستثناء الوريد الأجوف السفلي ، والذي يستخدم للتحكم في الضغط داخل الأذين.
ثم تحت التمدد الأذيني المستمر ، يتم تطبيق الرجفان الأذيني المستمر باستخدام سرعة الاندفاع من قطب كهربائي يقع أعلى الزائدة الأذينية اليسرى. تتمثل الخطوة الأخيرة في رسم خريطة بصرية وكهربائية للأسطح النخابية والباطن للزائدة الأذينية اليسرى والأذين الأيسر الخلفي باستخدام كاميرات CCD للإضاءة بالليزر والأقطاب الكهربائية ثنائية القطب. تظهر النتائج تدرجات التردد السائدة من الأذين الأيسر الخلفي إلى الزائدة الأذينية اليسرى وإلى الأذين الأيمن.
بالإضافة إلى ذلك ، يتم تحديد الدوارات طويلة الأمد في بعض الأحيان مع مراكز الدوران في مجال التردد الأعلى. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل رسم الخرائط الكهربائية التقليدية التي تستخدم تقليديا في الدراسات الفيزيولوجية الكهربية البشرية هي أن رسم الخرائط النخابية البصرية والشغاف للأذين الأيسر يوفر دقة زمنية ومكانية عالية على مساحة واسعة ، مما يسمح بتتبع موجات الرجفان الأذيني في مناطق مختلفة ، بما في ذلك المناطق ذات التردد الدوار العالي التي تحافظ على الرجفان الأذيني. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في الفيزيولوجيا الكهربية للقلب ومجال عدم انتظام ضربات القلب المعقد ، مثل ما هي الأنماط الزمنية الخاصة للتنشيط الكامنة وراء الحفاظ على عدم انتظام ضربات القلب المستمر الأكثر شيوعا في الممارسة السريرية.
تمتد الآثار المترتبة على استخدام هذه التقنية نحو الإمكانيات العلاجية إما لمنع أو إنهاء الرجفان الأذيني بناء على فهم أفضل لآلياته. بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه التقنية لأداء جميع الخطوات بسلاسة في فترة زمنية معقولة. وتجدر الإشارة إلى أنه لا يوجد سوى وقت محدود حوالي أربع ساعات يتم عزلهم فيها.
يذكر القلب في الظروف المناسبة لرسم الخرائط البصرية لعدم انتظام ضربات القلب. يتطلب هذا مهارات جراحية معينة لإعداد نموذج التمدد الأذيني جنبا إلى جنب مع المهارات التقنية لإعداد نظام رسم الخرائط الكهربائي والبصري. بعد إعطاء الهيبارين وتخدير خروف من 35 إلى 40 كيلوغراما بالبروبوفول والبنتوباربيتال ، استخدم بضع الصدر لإزالة قلبه.
قم بتوصيل القلب المقطوع بنظام تروية LAN بمحلول تيرو مؤكسج متداول عند درجة حموضة 7.4 ، واضبط معدل التدفق الثابت على ما بين 240 و 270 مل في الدقيقة وحافظ على درجة الحرارة بين 35.5 و 37.5 درجة مئوية. ابدأ بمعادلة الضغط داخل التجويف في كلا الأذينين من القلب المنفوخ. باستخدام ثقب الحاجز الأذيني ، قم بتقشير الوريد الأجوف السفلي باستخدام أنبوب التدفق.
ثم اضبط الضغط داخل الأذين عن طريق تغيير ارتفاع قنية التدفق المفتوح فوق الأذينين. الآن أغلق جميع فتحات الوريد ، بما في ذلك الجيوب الأنفية التاجية ، والوريد الكافا العلوي ، والأوردة الرئوية الأربعة. عند إغلاق الأوردة الرئوية ، ضع القسطرة في كل واحدة منها لتسجيل الإشارات ثنائية القطب من القطبين البعيدين من خلال مكبر للصوت التفاضلي.
بعد ذلك ، لتقليل حركة الأنسجة الناتجة عن انقباض الخلايا العضلية القلبية ، أضف 10 ميكرومولار من الستاتين BLEs إلى التروية. راقب الضغط باستخدام مستشعر رقمي في قاعدة القنية. اضبط ارتفاع التدفق الخارجي باستمرار للحفاظ على ضغط ثابت يبلغ 12 سم من الماء طوال التجربة.
أخيرا ، يتم وضع الأقطاب الكهربائية ثنائية القطب على سطح الزائدة الأذينية اليسرى وعلى الجزء العلوي من الزائدة الأذينية اليمنى. استعد الآن لرسم الخرائط البصرية. ابدأ بتركيز كاميرا CCD عالية الدقة عالية السرعة على حوالي 14 سنتيمترا مربعا من سطح الجدار الخالي من الأذين الأيسر.
ثم ضع مصدر ضوء الليزر لإضاءة المنطقة. أدخل الآن منظارا صلبا ثنائي القناة بقطر 10 ملم عبر الصمام التاجي للحصول على مجال رؤية مباشر من خلال الجدار الأمامي للبطين الأيسر. ركز المنظار على سطح الشغاف للأذين الأيسر الخلفي لتصور الأوردة الرئوية الأربعة والحزمة الرئوية الحاجزية الأذينية.
الآن قم بتركيب البوريسكوب على كاميرا CCD ثانية من خلال محول العدسة باستخدام دليل ضوء سائل بقطر أساسي 0.2 بوصة. قم بإعداد ليزر على قناة الإثارة في المنظار. قم بمزامنة التسجيل من كلتا كاميرات CCD وتكوينها لتوفير نبضة TTL مربعة من شأنها زيادة تشغيل التسجيلات ثنائية القطب في وقت واحد.
لإعداد النظام للتسجيل البصري ، قم بحقن خمسة إلى 10 ملليلتر من dif four andep في القلب وانتظر لمدة 10 دقائق قبل بدء تسجيلات رسم الخرائط البصرية. ينبعث D four ANEP PS من التألق الحساس للجهد عند إثارة الليزر 532 نانومتر. لذلك بعد إضافته ، تابع على الفور تسجيلات الرجفان الأذيني للحث على الرجفان الأذيني تحت التمدد الأذيني المستمر ، واضبط القطب الكهربائي في الأعلى ، LAA لإيقاع الانفجار أثناء الرجفان الأذيني.
سجل أفلاما مدتها خمس ثوان بفاصل دقيقتين في وقت واحد من كلتا الكاميرتين. استمر في تسجيل الرجفان الأذيني على مدى 50 دقيقة مع البيانات الأولية التي تم جمعها ، وقم بتطبيق مرشح تمرير عالي على الإشارات ثنائية القطب بثلاثة هرتز ومرشح تمرير منخفض عند 35 هرتز. الآن لتحليل كل من الإشارات الكهربائية والبصرية ، قم بتحويلهما باستخدام خوارزمية FFT.
أخيرا ، لتحديد المناطق ذات معدلات التنشيط العالية وإنتاج تدرجات التردد ، قم بإنشاء خرائط تردد سائدة من كل فيلم بصري باستخدام أفلام الطور التي تم إنشاؤها مع تحويل هيلبرت ، يمكن تحديد ثلاث فئات من أنماط التنشيط. يتم تحديد نمط الدوار من خلال وجود مراحل تتقارب نحو نقطة التفرد التي تستمر لأكثر من دورة واحدة. يتم تعريف نمط الاختراق على أنه جبهة موجية تظهر في مجال الرؤية وتنتشر إلى الخارج في نمط يشبه الهدف.
تعرف الموجات الدورية المنظمة مكانيا وزمانيا بأنها ما لا يقل عن أربع موجات دورية متسلسلة تخرج من نفس الموقع باتجاه مماثل وفاصل زمني بين الموجات. خلال نوبة الرجفان الأذيني التمثيلية هذه ، تم توطين أعلى تردد سائد على الوريد الرئوي السفلي الأيمن للأذين الأيسر الخلفي. يتوافق وجود مصادر عالية التردد في جيش التحرير الشعبى الصينى مع تدرجات التردد السائدة من اليسار إلى اليمين التي لوحظت أثناء إجراءات الاستئصال في الرجفان الأذيني البشري القريب.
يسمح القياس الكمي الإضافي بالارتباط المكاني لأعلى الترددات السائدة مع نمط التنشيط الأكثر شيوعا. في بعض الأحيان ، من الممكن تحديد الدوارات طويلة الأمد الموضعية داخل نطاق التردد الأعلى. في بعض الحالات ، يتم تحديد موجة التمرير ، المكافئ ثلاثي الأبعاد للدوار لأن مركز الدوران المستقر لموجة التمرير يظل عموديا على سطح منطقة رسم الخرائط.
تم تسجيل هذا الدوار من شغاف جيش التحرير الشعبى الصينى مع التوصيل الليفي المتزامن باتجاه LAA. ترتبط البيانات بتدرج التردد بين PLA و LAA عند تسعة و 6.4 هرتز على التوالي. تكون الدوارات بشكل عام أكثر تواترا في جيش التحرير الشعبى الصينى منها في LAA ، مما يشير إلى أن إعادة الدخول إلى جيش التحرير الشعبى الصينى لها دور أساسي في الحفاظ على عدم انتظام ضربات القلب.
بمجرد إتقان الطرق الجراحية والتقنية. يمكن أن تكتمل هذه التجربة في ساعتين أو ثلاث ساعات. هناك العديد من النقاط الرئيسية لتجربة ناجحة.
أولا ، من الأهمية بمكان منع الهواء من دخول الجهاز التاجي الصلب. ثانيا ، من المهم تحديد جميع الوريد والحيل والختم ثم إيقاف تشغيله بشكل صحيح. وثالثا ، من المهم استخدام أقل كميات من الحركة وقوالب مضان المقرنة وتقليل التعرض لضوء الإثارة قدر الإمكان.
إن تطوير نهج رسم خرائط النخابي الشغافي الموضح هنا يمهد الطريق للباحثين لاستكشاف ديناميكيات انتشار الموجات بتفاصيل أكبر من ذي قبل ، وفي النماذج الحيوانية ذات الصلة للغاية لعدم انتظام ضربات القلب المعقد.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تفصل هذه الدراسة المنهجية والنتائج لرسم خرائط بصرية متزامنة داخلية وخارجية للإثارة الكهربائية في الأذين الأيسر لقلب خروف مصبوغ بـ Langendorff أثناء الرجفان الأذيني الناجم عن التمدد.