موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:37 دقيقة • July 8th, 2025
خذ عقدة الجذر الظهري أو DRG ، وهي مجموعة من الخلايا العصبية الحسية ، في وسط بارد يحتوي على مصل لحماية الخلايا العصبية أثناء المعالجة اللاحقة.
جهاز الطرد المركزي ، ثم قم بإزالة المادة الطافية.
أضف عازلة فوسفات تحتوي على إنزيمات هضمية واحتضانها بتحريض خفيف.
تفصل الإنزيمات المصفوفة خارج الخلية ، أو ECM ، وأنسجة DRG ، مما يؤدي إلى إرخاء الخلايا.
أضف وسيطا يحتوي على مصل لتعطيل الإنزيمات.
جهاز طرد مركزي ، ثم تخلص من المادة الطافية.
أعد تعليق DRG وفصل الأنسجة ميكانيكيا باستخدام ماصات ذات أحجام أصغر تدريجيا للحصول على تعليق خلوي.
ضع طبقة من الخلايا على تدرج كثافة من ألبومين مصل الأبقار.
الطرد المركزي. تستقر الخلايا العصبية في القاع ، وتشكل حبيبات.
تخلص من الطبقات التي تحتوي على بقايا الأنسجة.
أعد تعليق الخلايا العصبية في وسط الثقافة.
أضف الخلايا العصبية إلى طبق ثقافة مغطى ب ECM واحتضنها.
قم بإزالة الوسط وأضف الخلايا القاتلة الطبيعية أو الخلايا القاتلة الطبيعية.
أضف وسيطا للزراعة المشتركة ودراسة التفاعل بين هذه الخلايا.
احصد DRGs في أنبوب مخروطي سعة 15 مليلتر مملوء ب 10 مل من DMEM المثلج البارد. ثم ، قم بالطرد المركزي للمستحضر لمدة 5 دقائق عند 200 جم في درجة حرارة الغرفة ، وقم بإزالة المادة الطافية. أضف 250 ميكرولتر من PBS تحتوي على 1 ملليغرام لكل مليلتر من الكولاجيناز الرابع و 2.4 وحدة لكل
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية