Waiting
登录处理中...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Met behulp van Digital Image Correlation Local Spanningen op vaatweefsel Monsters karakteriseren

Published: January 24, 2016 doi: 10.3791/53625

Introduction

Een rijke geschiedenis van het onderzoek in meer dan 50 jaar is gericht op het kwantificeren van de mechanische eigenschappen van vaatweefsel. Deze studies kunnen we beter inzicht zowel fysiologische en pathologische gedrag van bloedvaten, een basis voor het evalueren van de werkzaamheid / verenigbaarheid van endovasculaire inrichtingen en hulp bij het ​​ontwerp en de fabricage van vasculaire gemanipuleerde constructen 1-6. Nauwkeurige meting van de mechanische respons van zacht weefsel en constitutief modelleren van hun mechanische eigenschappen inherent uitdaging vanwege de mechanische heterogeniteit, anisotropie, niet-lineariteit en vertoond door de meeste weefseltypen. Bovendien zijn experimentele metingen vaak verstoord door plaatselijke complexiteiten geïntroduceerd sample-grip interfaces in de loop van de mechanische testen (bijv buiging, wrijving, spanningsconcentraties, scheuren) en de onvermijdelijke overgang van mechanische eigenschappen na weefsel uitgesneden uit het levende dier. </ p>

Een uniaxiale treksterkte experiment is de eenvoudigste mechanische tests die kunnen worden uitgevoerd op een monster van een vast materiaal, en wordt vaak gebruikt om de mechanische respons van vaatweefsel beoordelen. De resultaten van deze experimenten bruikbare voorlopige informatie zowel natieve als gemanipuleerde weefsel bronnen, en kunnen worden gebruikt om de effecten van bepaalde behandelingen, ziektetoestanden of farmacologische samenstelling te vergelijken op het mechanische gedrag van de vaatwand 7-11.

Eenassige mechanische testen van zachte weefsels wordt meestal uitgevoerd op monsters met een relatief uniforme geometrieën, die zijn meestal hond-bot of ringvormige 7,8,12-14. Echter, significante afwijking van deze geïdealiseerde geometrieën optreden als gevolg van problemen in verband met weefsel dissectie, isolatie, en klemmen in het testsysteem. Elke niet-uniformiteit in de meetkunde zal uiteindelijk leiden tot heterogene stress en spanning gevenvelden wanneer het monster wordt onderworpen aan een uniaxiale verlenging, waarbij de mate van heterogeniteit afhankelijk werkelijke steekproef vorm en maat monster (ten opzichte van de handvatten) en de mechanische eigenschappen van het materiaal 9,15,16. Wanneer gebied heterogeniteiten significant, sample druk berekeningen op basis van de relatieve greepposities onnauwkeurig en dus een voldoende basis voor de beoordeling van mechanische eigenschappen.

Video-analysesystemen zijn uitgebreid gebruikt voor rekmetingen van zachte weefsels, vaak met behulp van hoge contrastvloeistof markers aangebracht op het preparaatoppervlak 17,18. Digitaal beeldcorrelatie een optische metrologie techniek die full-field oppervlak stam hoogte door vergelijking grijsniveau intensiteitswaarden op het oppervlak van het monster vóór en na vervorming, is gebruikt in combinatie met de video-analyses van zachte weefsels 19-21. Er zijn verschillende voordelen van digitaal beeld correlatie ten opzichte van interferometric werkwijzen die kunnen worden toegepast voor metingen. Ten eerste, als contactloze meettechniek, minimaliseert de verstorende effecten van het wijzigen van materiaaleigenschappen vanwege de wijze waarop het meetsysteem beïnvloedt het monster. Ten tweede vereist een veel minder strenge meetomgeving en heeft een breder scala van gevoeligheid en resolutie dan andere methoden. Ten derde, begiftigd met de mogelijkheid van het vastleggen van een volledig gezichtsveld, deze techniek kan zowel de gemiddelde als de lokale mechanische responsen. Voor gedetailleerde uitleg van de methode, wordt de lezer aangemoedigd om het boek te zien door Sutton 22.

Om spanning velden op het monster oppervlak te verkrijgen, kan een tweedimensionaal digitaal beeld correlatietechniek (2D-DIC) worden gebruikt. In het kort, worden de beelden van het monster gevangen bij gelost en geladen verschillende staten. Het eerste beeld wordt verdeeld in kleine vierkantjes subsets (M x M beeldpunten) die een maas voor daaropvolgende berekening van vormen2D stam velden. De positie van elk vierkant in het vervormde monster wordt verkregen met een afbeelding zoekalgoritme. De beweging van elk vierkant wordt dan gevolgd, beeld-voor-beeld, waarbij verplaatsingsvelden die vervolgens kan worden gebruikt vervorming gradiënten en stammen afgeleid via een verscheidenheid van methoden, waaronder polynoom fitting of eindige elementen interpolatie. In de huidige manuscript, bieden we een gedetailleerde methodologie voor de beoordeling van het oppervlak stam velden op inheemse vaatweefsels via integratie van eenassige trekproeven en 2D-DIC.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

LET OP: De hieronder beschreven procedures werden uitgevoerd als onderdeel van een protocol door de Institutional Animal Care en gebruik Comite aan de Universiteit van South Carolina in Columbia, South Carolina goedgekeurd.

1. Tissue Acquisition en Dissection

  1. Steriliseren alle chirurgische instrumenten voor weefsel dissectie. Autoclaaf chirurgische schaar en fijne standaard tang en chirurgische mesjes onder een druk van 15 psi en de temperatuur van 121 ° C gedurende 15 min.
  2. Verwerven van een set van verse varkens (7 maanden oude Landrace reuen, 60-70 kg) nieren met intacte aorta van een lokale slachthuis. Transport weefsel terug naar het laboratorium in ijskoude 1% met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) oplossing.
  3. Direct na aankomst, isoleren van de abdominale aorta uit de omliggende weefsel met behulp van chirurgische schaar en pincet.
  4. Was het vat driemaal met een 50 ml injectiespuit gevuld met PBS (pH 7,2). Met behulp van de schaar en pincet, verwijder zoveel perivasculair weefsel possbaar, zonder afbreuk te doen aan de integriteit van het monster.
  5. Verticaal positioneren scherp scheermesje op het middelste gedeelte van het vat en zorg ervoor dat het loodrecht op het schip lengteas. Maak twee ringen monsters elk met een breedte van ongeveer 20 mm door toepassing van drie opeenvolgende omtrek snijdt met het scheermesje.
  6. Verticaal positioneren scherp scheermesje op één ring monster zodanig dat het blad is georiënteerd in de radiale richting. Breng een acute kracht om een ​​radiale snijden, waardoor een strookvormig monster voor eenassige mechanische testen opleveren. Plaats het monster in een 100 mm glazen petrischaal en onder te dompelen in PBS tot de toepassing van het oppervlak spikkels. Herhaal dit voor de tweede ring monster.

2. Oprichting van Surface spikkelpatroon

  1. Sluit de airbrush om de druk ventiel.
  2. Pas de spuitmond diameter van de airbrush om spikkels van 60-100 urn opleveren (geschikte bereik voor nozzle diameter moetbepalen van studie).
  3. Giet ongeveer 2 ml zwarte weefsel markering kleurstof in de ernst feeder van de airbrush.
  4. Plaats de airbrush ongeveer 0,5 m afstand van het monster.
  5. Verwijder het monster uit de petrischaal. Spray weefsel markeerinrichting kleurstof op het intimale oppervlak van het monster gedurende ongeveer 5 sec onder een sproeidruk van 100 psi. Herhaal dit drie keer dat de spikkelpatroon gelijkmatig bedekt het monsteroppervlak.

3. Uitvoering van experimenten

  1. Bevestig elk uiteinde van het monster op een kunststof strip (1 cm breed x 1 cm lengte x 0,5 cm dik) met een weefsellijm. Plaats het monster op een tissue snijplank. Plaats het monster zodanig dat het plat ligt en meet de afmetingen met een digitale schuifmaat.
  2. Initiëren systeem controles voor mechanische testen. Op het systeem controleert startscherm, selecteer "Waveform" op de taakbalk op het tabblad "Setup".
  3. Advertentiealleen de positie van de bovenste greep van de mechanische tester -4 mm (4 mm uitbreiding ten opzichte van de aangegeven uitgangspositie in het systeem). Zachtjes veilig een plastic strip (verbonden aan het model in 3.1) in de bovenste greep van de mechanische tester en laat het monster vrij te hangen. Met de digitale beugel zodat de afstand tussen het monster en de bovenste handgreep kleiner is dan 2 mm.
  4. Handmatig de positie van de lagere grip te passen zodat het vrije uiteinde van het monster kan worden verzekerd zonder extensie. Voorzichtig zet de plastic strook bevestigd aan het vrije uiteinde van het monster in de onderste greep van de mechanische tester.
    1. Met de digitale beugel zodat de afstand tussen het monster en de lagere grip minder dan 2 mm. Nul het systeem load cell. Meet de lengte van het monster en gebruik deze als referentie lengte voor berekening van de totale omtrek stammen.
  5. Voer de mechanische testen protocol. Het gebruikte protocol in tzijn demonstratie houdt 4 uniaxiale verplaatsing cycli waarin het monster lengte bij een verplaatsing van 0,01 mm / sec verlengen met 18%.
  6. Bij tussenpozen spuit PBS op het monster gedurende de resterende testprotocol zodat gehydrateerd blijft.
  7. Monteer de camera (5 megapixel camera, 100 mm lens, pixelgrootte van 3,49 pm) op een statief is geplaatst op 1,5 m van het laden frame. Zorg ervoor dat de camera en het monster oppervlak loodrecht door het instellen van de camera tot het laagste beschikbare gebied van de diepte en het manipuleren van de uitlijning, zodat de gehele beeldveld scherp is.
  8. Open de image capture software.
  9. Selecteer "PGR-2" in de optie "Select systeem".
  10. Selecteer het project pad naar de beelden op te slaan om te worden geanalyseerd.
  11. Klik op het pictogram "Time Square" en geef de overname interval 5 sec.
  12. Pas de belichting, numerieke opening, en de focus van de lens om zo een duidelijk beeld van het monster te krijgen.
  13. Pas de positie van LED om voldoende verlichting op het monster.
  14. Klik op het pictogram "Start" in de afbeelding capture software om een ​​beeld van het monster oppervlak te verkrijgen.
  15. Open de software voor beeldanalyse.
  16. Importeer het beeld verkregen. Zoom in op een individuele spikkel, en tel dan het aantal pixels binnen deze persoon spikkel.
    Opmerking: Identificeer een vertegenwoordiger zwarte vlek. Definieer de spikkel grootte als de lineaire afstand tussen de pixels aan weerszijden van de spikkel die soortgelijke hoge waarden. Voor een acceptabele speckle grootte, moet het aantal pixels over de breedte van een typische spikkel groter dan 3 pixels zijn. Om ruimtelijke resolutie van de metingen te verbeteren, moeten de meeste vlekken niet meer dan 7/5 pixels over de breedte van de vlek, waar mogelijk. Aldus zou een typische spikkel dit geval tussen 10 urn op het smalste en 23 urn bij de grootste lineaire afmeting variëren. Om een ​​geschikte deelverzameling bepalengrootte, zou een typische deelverzameling tenminste 3 witte en 3 zwarte spikkels over zijn breedte. Als een typische vlek is 5 pixels in lineaire afmeting, dan zou elk 31x31 deelverzameling tenminste 105 urn lineaire dimensie. De afstand tussen subgroep geeft voor ten minste 1/6 van de lineaire dimensie. Aldus kan een deelverzameling 31x31 grootte, de afstand 5 pixels die 18 urn vertegenwoordigt luchtlijnmodus.
  17. Na verificatie van de kwaliteit van spikkelpatroon, tegelijkertijd op het pictogram "Run" in het systeem en het pictogram "Start" in de afbeelding capture software om de test te starten.
  18. Het veroveren van een reeks beelden gedurende testen met behulp van de camera en het beeld capture software.

4. Clean-up Procedures na het experiment

  1. Plaats de afgedankte monster in biohazard zak en sluit de zak. Bel de Department of Environmental Health and Safety (EHS) aan de Universiteit van South Carolina voor de juiste afvoer.
  2. Bereid een fosfaatgratis desinfecterende oplossing met een verhouding van 1:64 verdunning detergent ontsmettingsmiddel om gedestilleerd water. Week de chirurgische instrumenten in deze oplossing gedurende 20 min.
  3. Spoel de in 4.2 beschreven met gedestilleerd water items. Droog de instrumenten met behulp van een papieren handdoek en spuit ze vervolgens met een 70% ethanol-oplossing. Opnieuw droog de chirurgische instrumenten met een papieren handdoek en leg ze terug in de chirurgische gereedschapskist.

5. Image Analysis aan de lokale Strain gebied Meet

  1. Open de software voor beeldanalyse.
  2. Klik op het tabblad "Speckle beelden", selecteert u alle foto's die moeten worden geanalyseerd.
  3. Klik op de rechthoek gereedschap en selecteer het gebied van belang in het eerste beeld.
  4. Voer deelverzameling maat 41 × 41 pixels en stapgrootte 5 pixels.
  5. Klik op het tabblad analyse starten in de software, selecteert u de interpolatie als geoptimaliseerde 8-trap; Selecteer het criterium als nul-genormaliseerd kwadraat verschillen en subgroep gewichten optie als Gauss.
  6. Stel de drempel opties als standaard in de software.
  7. Klik op de post-processing subtab tabblad start analyse. Klik optie stam berekening en laat filter grootte en type filter als standaard in de software. Selecteer tensor typt Lagrange.
  8. Selecteer het tabblad gegevens en selecteer een geanalyseerd beeld dan voor visualisatie van het veld oppervlak stam.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De mechanische gegevens verkregen uit een hellende éénassige extensie test vaatweefsel bestaat uit belasting versus toegepast monster verplaatsing relaties op een gegeven verplaatsing tarief. In deze studie 2D-DIC in combinatie met uniaxiale mechanische tests worden gebruikt om de oppervlakte spanning gebied van het monster in orthogonale richtingen met verschillende gedeformeerde toestanden te meten. De visco-elastische aard van vaatweefsel manifesteert zich door de opmerkelijke mate van hysteresis in de belasting-verplaatsing curves voorafgaand aan mechanische preconditionering. Om de reproduceerbaarheid van de mechanische testen en bevorderen een elastische mechanische respons te verkrijgen, wordt het weefsel voorgeconditioneerd via meerdere laden-ontladen-cycli hysteresis, waarbij geleidelijk verminderd (figuur 1). Ondanks de uiterst zorgvuldige monster voorbereiding en montage, 2D-DIC metingen tonen aan dat de stam veld resulterende intima oppervlak is zeer heterogeen in zowel de omtreks- als lengterichting. Zoals verwacht, de lokale omtrek stam waarden stijgen met toegepaste monster verplaatsing. Heterogeniteit in omtreksrichting strain patroon oplevert algemeen lagere waarden in het midden van het monster in vergelijking tot nabij de sample-grip interface, die de gevolgen van de greep op de lokale stammen (figuur 2). In de langsrichting, worden de resulterende niet-uniforme samendrukkende spanningen op het monster intimale oppervlak verhoogd het monster geleidelijk uitgebreid, en het spanningsveld resulterende vertoont een sterkere mate van heterogeniteit ten opzichte van de omtreksrichting (figuur 3). De variatiecoëfficiënten (CV) van het oppervlak stam velden in orthogonale richtingen berekend om de mate van heterogeniteit veld in geselecteerde experimentele toestanden weerspiegelen, en bleken monotoon afneemt met verhoogde monster extensie (tabel 1).

jove_content "fo: keep-together.within-page =" 1 "> Figuur 1
Figuur 1. Experimentele preconditionering van vasculaire weefselmonster voor eenassige trekproeven. Een rechthoekige monster wordt voorbehandeld met drie laden-lossen cycli om een reproduceerbare elastische respons te verkrijgen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2
Figuur 2. Omtrekafname stam gebied binnen de sample gebied van belang. (A) Vertegenwoordiger voorbeeld van gespikkelde monster intima oppervlak en geïdentificeerd gebied van belang. (B) Lokale omtrek stam ε yy (%) binnen het aangewezen gebied van belang op het verhogenniveaus van toegepaste globale omtrek stam (het verhogen van 1,6% tot 9% tot 18%, van links naar rechts). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3
Figuur 3. Longitudinale stam gebied binnen de steekproef interessegebied. (A) Vertegenwoordiger voorbeeld van gespikkelde monster intima oppervlak en geïdentificeerd gebied van belang. (B) Lokale longitudinale rek ε xx (%) binnen het aangewezen gebied van belang in toenemende toegepast wereldwijde omtrek stam (het verhogen van 1,6% tot 9% tot 18%, van links naar rechts). Klik hier om te bekijken grotere versie van deze figuur.

Global omtrek stam [%] CV in ε jj (%) CV in ε xx (%) 1.6 11.8 28.1 9.0 7.4 25.1 18.0 5.6 20.7

Tabel 1. Variatiecoëfficiënten van de stam gebieden. Coëfficiënten van variatie (CV) van het monster intima oppervlak stam velden in zowel omtrek jj) en longitudinale xx) richtingen bij geselecteerde niveaus van toegepaste wereldwijde omtrek stam.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Hoewel eerdere studies een breed scala van kleurstof bijhouden video werkwijzen gebruikt voor sample stam 18,20,21,23,24 beoordelen onze huidige doel is om een veelomvattende methode voor het koppelen van uniaxiale trekproef voorzien 2D-DIC voor de beoordeling van oppervlak stammen op vasculaire weefselmonsters. Met een hoge resolutie camera en in-house beeldanalyse-software, kan het veld stam worden gemeten binnen een vooraf bepaald oppervlak regio als het monster eenassige belasting ondergaat. Van bijzonder belang voor mechanisch testen van vaatweefsel, kunnen de gepresenteerde techniek direct worden aangepast aan oppervlakte stammen beoordelen vlakke biaxiaal testen die op hun beurt de identificatie mogelijk maken van constitutieve materiaaleigenschappen.

Om digitaal beeld correlatie analyse te vergemakkelijken, is een spikkelpatroon aangebracht op het monster oppervlak. De verf gebruikt voor speckling een weefsel markeerinrichting kleurstof die gemakkelijk hecht aan de meeste zachte weefseloppervlakken. Te komen tot eengoede kwaliteit van contrast en goede dichtheid van het spikkelpatroon, een optimale vlek grootte van 60-100 urn en spuitafstand van 0,5 m worden gerealiseerd door het aanpassen van de nozzle diameter van de airbrush en de afstand tussen het monster en de airbrush. De vlek grootte gebruikt is direct gerelateerd aan de resolutie van de resulterende metingen 23,25. Elke speckle moet worden bemonsterd met ten minste 5/3 pixels aanvaardbaar beeldcorrelatie verkrijgen. Gegeven een 22 mm x 18 mm beeldveld en de gebruikte spikkel grootte, de resolutie van de gepresenteerde experiment 9 micrometer / pixel.

Een belasting van 0,01 mm / sec wordt gebruikt voor mechanische testen teneinde een reeks quasi-statische gedeformeerde evenwichtstoestanden voor vaatweefsel 26,27 verkrijgen. Omdat de camera en high-fidelity load cell zijn beide zeer gevoelig voor trillingen, moet er een minimale beweging tijdens het experiment; zelfs als kleine, kunnen stijve carrosserie camera / specimen beweging ontstaan ​​en will verwarren 2D-DIC-gebaseerde metingen. Evenzo kan sample vervorming optreden als gevolg van weefsel dehydratie, dus is het belangrijk dat PBS wordt aangebracht door middel van tests op de nauwkeurigheid van 2D-DIC bevorderen.

Voor 2D-DIC, de gewenste specificaties omvatten de subset grootte en de stapgrootte gebruikt in het matching-algoritme 22. Om nauwkeurige resultaten te verkrijgen met verwaarloosbare voorspanning, ten minste 3 zwart 3 witte spikkels aanwezig in elke subset zijn, waarbij iedere spikkel bemonsterd met ten minste 5/3 pixels. Elk gegevenspunt in de uitvoer geeft informatie een vak dat overeenkomt met de subreeks grootte (41x41 pixels), beschouwd als de ruimtelijke resolutie van het experiment gemiddeld over. De afstand tussen twee gegevenspunten qua stapgrootte 5 pixels in dit experiment. Met het oog op de nauwkeurigheid in de spikkel verplaatsing / oppervlak stam metingen te maximaliseren, is een 8-tap spline interpolatie methode toegepast om nauwkeurige, sub-pixel intensiteit waarden te verkrijgen. De 8-tap method heeft iets hogere nauwkeurigheid bij het verkrijgen van stammen in vergelijking met de resultaten verkregen met behulp van een 4-tap of 6-tap interpolatie filter. De correlatie criterium "genormaliseerd gekwadrateerde verschillen" is geselecteerd voor de matching aangezien het beïnvloed door een verandering van schaal verlichting (bijvoorbeeld, wanneer een vervormd deelverzameling is 30% lichter dan de referentie). Deze keuze is de standaard selectie in de software en meestal biedt de beste combinatie van flexibiliteit en resultaten 28. Deelverzameling weging, die bepaalt hoe de pixels binnen de deelverzameling worden gewogen in het matching-proces, is geselecteerd als Gauss. Uniforme gewichten, wordt elke pixel in de subgroep gelijkelijk beschouwd; Gauss gewichten bieden de beste combinatie van ruimtelijke resolutie en verplaatsing resolutie.

Variatiecoëfficiënten van het veld oppervlak stam werden berekend interne beeldanalyse software en gebruikt om de mate van stam heterogeniteit kwantificeren. De coefdoende variatie van het veld spanning in zowel de omtrek- als de lengterichting af met toenemende wereldwijde omtrek stam, die eerder waargenomen bij vergelijkbare mechanische proeven op andere vasculaire weefseltypen (ongepubliceerde resultaten). Op basis van deze aanhoudende trend, is het redelijk om te verwachten dat het oppervlak stam velden van voldoende kon homogeniseren boven een kritische mate van uitbreiding zodanig dat de wereldwijde en lokale metingen samenkomen. Het is echter waarschijnlijk dat deze kritische waarde weefsel- en sample-specifiek, waarbij het gebruik van lokale rekmetingen lagers voor nauwkeurige identificatie van constitutieve materiaaleigenschappen.

Verschillende beperkingen moeten worden beschouwd voor een juiste interpretatie van onze methodologie en de resultaten gepresenteerd. We voorgeschreven een matige reeks van wereldwijde omtrek stam, waardoor onze realiseerde lokale stam grootheden in zowel de omtrek en longitudinale richtingen waren aanzienlijk lager dan waarden waargenomen in vivo. Bovendien hebben we de eenassige mechanische respons onder een enkel monster oriëntatie, en dus het genereren onvoldoende gegevens om constitutieve materiaaleigenschappen identificeren vaatweefsel 29,30. Echter, ons doel is een uitgebreide mechanische analyse van de aorta van het varken niet uit te voeren, maar om een ​​experimenteel protocol te koppelen 2D-DIC demonstreren aan een éénassige mechanische testen op zacht weefsel. De hierin gepresenteerde techniek kan gemakkelijk worden uitgebreid tot biaxiale mechanische testen en zo de kwantificering van de constitutieve mechanische eigenschappen van vaatweefsel 31-33. De 2D-DIC methode slechts een relatief vlakke vervormingsveld overeenkomt met het monsteroppervlak. Wanneer de specimen uit het vlak vervormt, of wanneer het monster een niet- vlakke geometrie (bijvoorbeeld bloedvat), stereo-vision imaging en 3D-DIC techniek kan worden toegepast omvattende rekmeting 23,25.

nt "> In het kort, de huidige manuscript geeft gedetailleerde informatie over de methodologie om eenassige trekproeven en digitale beeldcorrelatie integreren om de mechanische respons van inheemse vaatweefsel karakteriseren. De methode die in deze studie kan gemakkelijk worden aangepast voor de mechanische karakterisering van andere inheemse en ontworpen zachte weefsels evenals zachte hydrogel / polymere materialen, en is vooral nuttig wanneer het veld monster oppervlak stam vertoont aanzienlijke heterogeniteit tijdens mechanische testen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben geen potentiële belangenconflicten.

Acknowledgments

De software en technische ondersteuning waren hoffelijkheid van gecorreleerde Solutions Incorporated (www.correlatedsolutions.com).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Uniaxial tensile mechanical tester Enduratec 3230 AT/HR
Blue tissue marking dye http://www.ebay.com/itm/Tissue-Marking-Dye-in-Bottles-2oz-Bottle-1-ea-/201193551510?pt=LH_DefaultDomain_0&hash=item2ed811f696
Sprayer Anest-iwata CM-B Custom Micron B
Camera Point Grey GS2-GE-50S5M-C
Lens Tokina AT-X M100
Vascular tissue Caughman Inc
0.9% Sodium Chloride Injection PBS BAXTER HEALTHCARE CORP.
Vic_snap Correlated Solutions
Vic_2D Correlated Solutions
Wintest 4.1 Bose ElectroForce
Tissue adhesive  3M Vetbond  1469SB
Disinfectant  Fisher Scientific 04-355-13 Decon BDD Bacdown Detergent Disinfectant

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Holzapfel, G. A. Biomechanics of soft tissue. The handbook of materials behavior models. 3, 1049-1063 (2001).
  2. Vito, R. P., Dixon, S. A. Blood vessel constitutive models-1995-2002. Annu Rev Biomed Eng. 5, 413-439 (2003).
  3. Dodson, R. B., Martin, J. T., Hunter, K. S., Ferguson, V. L. Determination of hyperelastic properties for umbilical artery in preeclampsia from uniaxial extension tests. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 169, 207-212 (2013).
  4. Chuong, C. J., Fung, Y. C. On residual stresses in arteries. J Biomech Eng. 108, 189-192 (1986).
  5. Borschel, G. H., et al. Tissue engineering of recellularized small-diameter vascular grafts. Tissue Eng. 11, 778-786 (2005).
  6. Wagenseil, J. E., Mecham, R. P. Vascular extracellular matrix and arterial mechanics. Physiol Rev. 89, 957-989 (2009).
  7. Holzapfel, G. A. Determination of material models for arterial walls from uniaxial extension tests and histological structure. J Theor Biol. 238, 290-302 (2006).
  8. Tanaka, T. T., Fung, Y. C. Elastic and inelastic properties of the canine aorta and their variation along the aortic tree. J Biomech. 7, 357-370 (1974).
  9. Sokolis, D. Passive mechanical properties and structure of the aorta: segmental analysis. Acta physiologica. 190, 277-289 (2007).
  10. Twal, W., et al. Cellularized Microcarriers as Adhesive Building Blocks for Fabrication of Tubular Tissue Constructs. Ann Biomed Eng. , 1-12 (2013).
  11. Shazly, T., et al. On the Uniaxial Ring Test of Tissue Engineered Constructs. Exp Mech. , 1-11 (2014).
  12. Kim, J., Baek, S. Circumferential variations of mechanical behavior of the porcine thoracic aorta during the inflation test. J Biomech. 44, 1941-1947 (2011).
  13. Li, L., et al. Determination of material parameters of the two-dimensional Holzapfel-Weizsacker type model based on uniaxial extension data of arterial walls. Comput Methods Biomech Biomed Engin. 16, 358-367 (2013).
  14. Li, L., et al. Determination of the material parameters of four-fibre family model based on uniaxial extension data of arterial walls. Comput Methods Biomech Biomed Engin. 17, 695-703 (2014).
  15. Hoeltzel, D. A., Altman, P., Buzard, K., Choe, K. I. Strip extensiometry for comparison of the mechanical response of bovine, rabbit, and human corneas. J Biomech Eng. 114, 202-215 (1992).
  16. Guo, X., Kassab, G. S. Variation of mechanical properties along the length of the aorta in C57bl/6 mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285, H2614-H2622 (2003).
  17. Smutz, W., Drexler, M., Berglund, L., Growney, E., An, K. Accuracy of a video strain measurement system. J Biomech. 29, 813-817 (1996).
  18. Genovese, K., Lee, Y. U., Lee, A. Y., Humphrey, J. D. An improved panoramic digital image correlation method for vascular strain analysis and material characterization. J Mech Behav Biomed Mater. 27, 132-142 (2013).
  19. Wang, C. C., Deng, J. M., Ateshian, G. A., Hung, C. T. An automated approach for direct measurement of two-dimensional strain distributions within articular cartilage under unconfined compression. J Biomech Eng. 124, 557-567 (2002).
  20. Ning, J., et al. Deformation measurements and material property estimation of mouse carotid artery using a microstructure-based constitutive model. J Biomech Eng. 132, 121010 (2010).
  21. Sutton, M. A., et al. Strain field measurements on mouse carotid arteries using microscopic three-dimensional digital image correlation. J Biomed Mater Res A. 84, 178-190 (2008).
  22. Sutton, M. A., Orteu, J. J., Schreier, H. Image correlation for shape, motion and deformation measurements: basic concepts, theory and applications. , Springer Science & Business Media. (2009).
  23. Verhulp, E., van Rietbergen, B., Huiskes, R. A three-dimensional digital image correlation technique for strain measurements in microstructures. J Biomech. 37, 1313-1320 (2004).
  24. Wang, C. C., Deng, J. M., Ateshian, G. A., Hung, C. T. An automated approach for direct measurement of two-dimensional strain distributions within articular cartilage under unconfined compression. Journal of Biomechanical Engineering. 124, 557-567 (2002).
  25. Franck, C., Hong, S., Maskarinec, S., Tirrell, D., Ravichandran, G. Three-dimensional full-field measurements of large deformations in soft materials using confocal microscopy and digital volume correlation. Exp Mech. 47, 427-438 (2007).
  26. Garcia, A., et al. Experimental study and constitutive modelling of the passive mechanical properties of the porcine carotid artery and its relation to histological analysis: Implications in animal cardiovascular device trials. Med Eng Phys. 33, 665-676 (2011).
  27. Miller, K. How to test very soft biological tissues in extension? J Biomech. 34, 651-657 (2001).
  28. Sutton, M. A. Springer handbook of experimental solid mechanics. , Springer. 565-600 (2008).
  29. Han, H. C., Fung, Y. C. Longitudinal strain of canine and porcine aortas. J Biomech. 28, 637-641 (1995).
  30. Sokolis, D. P. A passive strain-energy function for elastic and muscular arteries: correlation of material parameters with histological data. Med Biol Eng Comput. 48, 507-518 (2010).
  31. Zhou, B., Wolf, L., Rachev, A., Shazly, T. A structure-motivated model of the passive mechanical response of the primary porcine renal artery. J Mech Med Biol. , (2013).
  32. Zhou, B., Rachev, A., Shazly, T. The biaxial active mechanical properties of the porcine primary renal artery. J Mech Behav Biomed Mater. 48, 28-37 (2015).
  33. Sommer, G., Holzapfel, G. A. 3D constitutive modeling of the biaxial mechanical response of intact and layer-dissected human carotid arteries. J Mech Behav Biomed Mater. 5, 116-128 (2012).

Tags

Molecular Biology biomechanica vaatweefsel Eenassige Trekproef Eindige elasticiteit Full veldstam meting Digital Image Correlation
Met behulp van Digital Image Correlation Local Spanningen op vaatweefsel Monsters karakteriseren
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhou, B., Ravindran, S., Ferdous,More

Zhou, B., Ravindran, S., Ferdous, J., Kidane, A., Sutton, M. A., Shazly, T. Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens. J. Vis. Exp. (107), e53625, doi:10.3791/53625 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter