Summary
Una tecnica semplice e non distruttivo che misura il contenuto medio di sostanze farmacologiche in prodotti di droga formulati contenenti fluoro utilizzando basso campo fluoro-19 (19F) tempo-dominio (TD) a risonanza magnetica nucleare (NMR) è presentata qui. La tecnica può essere applicata allo sviluppo e alla produzione di farmaci nell'industria farmaceutica.
Abstract
Qui, descriviamo un protocollo sviluppato dal nostro gruppo che utilizza basso campo fluoro-19 (19F) tempo-dominio (TD) a risonanza magnetica nucleare (NMR) per misurare il contenuto medio di farmaci fluorurati nelle loro forme di prodotto formulato droga: compresse o capsule. Questo metodo è specifico di farmaci fluorurati perché rileva solo il contenuto di fluoro, evitando interferenze da eccipienti che la mancanza di fluoro. I vantaggi di misurare il contenuto attivo dei farmaci fluorurati con basso campo 19F TD-NMR contro ad alto campo 19F a stato solido (SS) NMR sono la semplicità del metodo; il basso costo; e la natura distruttiva della tecnica, con tutti i campioni recuperabili in forme intatte (ad es., polveri, compresse e capsule), rendendo questa tecnica alla portata di qualsiasi laboratorio.
Abbiamo testato il metodo con tre prodotti di droga fluorati disponibili sul mercato - cinacalcet, lansoprazolo e ciprofloxacina - con dosi che variano da 15 a 500 mg. I risultati delle analisi, misurate dal basso campo 19F TD-NMR, sostegno i reclami segnalati etichetta per il contenuto medio di droga.
Basato sulla semplicità e riproducibilità dell'analisi, immaginiamo questa metodologia attuata in qualsiasi laboratorio, tra cui impianti di produzione, come uno strumento (PAT) della tecnologia analitica di processo nell'industria farmaceutica.
Introduction
Nell'industria farmaceutica, il contenuto di sostanze farmacologiche nelle loro forme di unità di dosaggio (ad es., compresse e capsule) deve essere all'interno della gamma sul reclamo dell'etichetta per soddisfare il controllo di qualità e linee guida sulle prestazioni. Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) è la tecnica analitica convenzionale utilizzata per misurare l'uniformità di contenuto delle droghe nelle loro forme formulate. Tuttavia, il metodo è lunga e distruttiva, che richiedono la dissoluzione del farmaco nella sua forma formulato usando i solventi appropriati prima dell'analisi. Anche con l'automazione, il processo può richiedere 1-3 h per campione, a seconda dello sviluppo del metodo analitico appropriato1,2,3. Oltre a HPLC, vicino-infrarosso (NIR) è stato utilizzato per lo stesso scopo e come strumento di PAT, con l'avvertenza di richiedere l'analisi chemiometrica dei dati, rendendo la sua attuazione lunghe e più complesse4. Entrambe le tecniche sono distruttive, con la droga formulata scartata dopo l'analisi.
In questo manoscritto, descriviamo il protocollo passo passo di una metodologia precedentemente pubblicato da nostro gruppo5 per misurare il contenuto medio di farmaci fluorurati nelle loro forme di dosaggio (ad es., compresse e capsule) utilizzando basso campo 19F NMR. Nel corso degli anni, la percentuale di farmaci fluorurati sul mercato approvato dalle agenzie regolatorie in tutto il mondo come prodotti formulati droga è aumentata dal 2% nel 1970 al 25% in 20136. Pertanto, riteniamo che esiste una domanda di sviluppare un metodo più semplice ma più specifico rispetto ai metodi attualmente disponibili per il controllo di qualità del contenuto di gas fluorurati farmaci nelle loro forme formulate.
Farmaci contenenti fluoro-19 (19F) nelle loro strutture hanno il vantaggio di essere facilmente rilevato da 19F NMR dovuto la relativa sensibilità di abbondanza e l'83% del 100% rispetto a protoni7. Misura diretta di 1H. TD-NMR non è utile perché gli eccipienti e API hanno protoni, e il segnale totale protone proviene da tutti i componenti del farmaco, che lo rende poco pratico per misurare il contenuto di API in prodotti di droga utilizzando 1 H TD-NMR. Pertanto, la misurazione del contenuto di droga di fluorurati prodotti di droga utilizzando 19F TD-NMR ha il vantaggio di nessuna interferenza con eccipienti a causa della mancanza di fluoro. Per dimostrare la nostra metodologia di misurazione del contenuto di droga medio di prodotti fluorati droga, abbiamo selezionato tre prodotti di droga in commercio formulati contenenti fluoro in intervalli di dose diversa. Figura 1 illustra le strutture dei farmaci selezionati, dove due di loro - cinacalcet HCl8 e lansoprazolo9-dispone di un gruppo di trifluoromethyl (CF3) nelle loro strutture, con dosi che variano da 15 a 90 mg e il terzo uno - ciprofloxacin HCl monoidrato10 - contiene un atomo di fluoro attaccato un anello aromatico, con una dose di 500 mg.
Qui, dimostriamo la metodologia che abbiamo sviluppato5 per quantificare il contenuto di droga medio dei prodotti di droga fluorurati utilizzando uno strumento di basso campo benchtop TD-NMR (23,4 MHz per 1H e 22,0 MHz per 19F). Abbiamo anche confrontare due pacchetti di software (software di calibrazione RI e Mnova) che possono essere utilizzati per segnalare i risultati.
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Protocol
Attenzione: si prega di consultare tutte le schede di sicurezza pertinenti (MSDS) prima di utilizzare sostanze chimiche. Sostanze farmaceutiche in generale sono tossici e devono essere maneggiati con appropriati dispositivi di protezione individuale (PPE; ad esempio, guanti, occhiali di sicurezza, camice, pantaloni lunghi e scarpe chiuse), con particolare cautela quando si pesano i materiali in polvere. È consigliabile utilizzare un equilibrio collocato in un cappuccio con buon flusso d'aria per ridurre al minimo la polvere da materiali solidi diffondere fuori dalla zona che circonda l'equilibrio.
Nota: le istruzioni del software sono specifiche per la calibratura di RINMR, RI e Mnova. Per altri strumenti fornitore TD-NMR e pacchetti software, le istruzioni variano.
1. preparazione dei campioni prima a 19 F TD-NMR misura
- pesare i campioni per la calibrazione (sostanza medicinale in polvere o ingredienti farmaceutici attivi (API)) nei tubi NMR appropriati (2,5 - 3 - 5-, 10-, 18 e 25 mm OD NMR tubi) fino alla linea di marcatura (altezza della bobina per la sonda di NMR), o circa 30 mm di altezza. Si noti che l'altezza può dipendere la sonda.
Nota: Cinacalcet HCl è un esempio di un'API da utilizzare per la calibrazione per determinare il contenuto del farmaco in compresse commerciale cinacalcet. Il peso dipenderà la densità della polvere. Nel caso di cinacalcet HCl, i pesi dell'API sono intorno a 7.2, 3.5, 1.0, 0.3, 0,1 e 0,07 g quando si riempie l'altezza della bobina per 25 - 18-, 10-, 5-, 3- e tubi NMR 2,5 mm, rispettivamente. - Pesare i campioni di prodotto formulato droga (compresse o capsule) nei tubi NMR appropriati fino alla linea di marcatura (altezza della bobina per la sonda di NMR), o circa 30 mm di altezza, come indicato sopra.
Nota: tubi 25 o 18 mm sono adatti per medie e grandi compresse/capsule o quando abbastanza prodotto formulato droga è disponibile. Per piccole compresse/capsule o quando non abbastanza prodotto formulato farmaco è disponibile, ma il rapporto segnale-rumore può essere ancora sufficiente per la misurazione, utilizzare tubi di 10 mm. Misurare le compresse direttamente, o frantumare se lo si desidera. Nessuna osservazione delle variazioni nelle loro misurazioni sono stati osservati qui, come accennato nella discussione.- Quando preparazione commerciale compresse di cinacalcet, pesano circa quindici 90 mg compresse nel tubo di NMR di 25 mm (circa 9,2 g), cinquanta 30 mg compresse nel tubo di NMR di 25 mm (circa 9,6 g), compresse da 30 mg ventidue nella RMN 18mm tube (circa 4,2 g) e venti-tre compresse da 60 mg il tubo di NMR di 25 mm (circa 8,8 g).
2. Preparazione dello strumento per la misurazione NMR
- Tuning strumento NMR a 19 F
- trasportare tutte le misurazioni alla temperatura del magnete permanente nella RMN strumento. Utilizzare qui, 40 ° C; Nessun controllo della temperatura è disponibile per la sonda di 26 millimetri 19 F NMR usata qui. Tutte le misurazioni relative alla frequenza di 22,0 MHz per 19 F utilizzando lo strumento NMR 23-MHz (per 1 H).
- Mettere il campione standard di Teflon all'interno di un tubo di NMR di 25 o 26 mm e inserire la sonda all'interno del magnete. Consentire di equilibramento per circa 5-10 min e accordare lo strumento a 19 F. Selezionare " Auto O1 " sotto il " comandi " dal menu del software di RINMR. Ripetere la misurazione almeno 3 volte e prendere l'ultimo valore del parametro di 1 O (frequenza di offset).
- Calibrazione dell'impulso 90 gradi F 19
- calibrare l'impulso di 90 gradi per F-19 con il campione di Teflon standard utilizzando la sequenza di taratura automatica standard disponibile nello strumento. Selezionare " P90 Auto " sotto il " comandi " dal menu del software di RINMR.
Nota: Normalmente, l'impulso di 90 gradi non ha bisogno di essere misurato frequentemente a meno che non si esegue lo strumento o la sonda non è stata utilizzata per qualche tempo. Il valore di 90 gradi ottenuto per Teflon con la sonda di 26 millimetri 19 F NMR usata qui era 7,05 µs.
- calibrare l'impulso di 90 gradi per F-19 con il campione di Teflon standard utilizzando la sequenza di taratura automatica standard disponibile nello strumento. Selezionare " P90 Auto " sotto il " comandi " dal menu del software di RINMR.
3. Misurazione del tempo di rilassamento longitudinale o T 1 per campioni di API puro Standard
- per un migliore rapporto segnale-rumore, posizionare il campione di API preparato nel tubo NMR 25 mm all'interno della sonda di F-19 installato nel magnete e lasciarlo equilibrare per almeno 10 min.
- Misurare il tempo di rilassamento T 1, seguendo le istruzioni del manuale dello strumento, per ciascun campione di API utilizzando un esperimento standard per inversione-recupero dal software RINMR.
Nota: I parametri sperimentali raccomandati sono 16 scansioni raccolti con un tempo di sosta di 0,1 µs; punti 8 dati; un impulso di 90 gradi, come accennato in precedenza; e un tempo morto di 10 µs per la sonda di 26 millimetri di F-19. Una matrice di ritardi da 100 µs a 8 s (ad es., 100 µs, 500 µs, 10 ms, 100 ms, ms 300, 700 ms, 1 s, 2 s, 5 s e 8 s) per farmaci con CF 3 e ritardi da 100 µs a 20 s (es. 100 µs, 500 µs, 1 ms, 100 ms, 500 ms, 1 s, 5 s, 10 s, 15 s e 20 s) per farmaci con un gruppo di fluoro attaccato all'anello aromatico sono raccomandati.- In the RINMR software, carico la " invrec.exe " sequenza di impulso selezionando " caricare " sotto " sequenza " e facendo clic su " Open. " per controllare che i parametri di base sono i valori corretti facendo clic " A " o selezionando " Acquisizione " sotto il " parametri " menu.
- Selezionare " script " sotto il " strumenti " menù; una finestra pop-up. Selezionare la " T1.ris " scheda e fare clic sulla freccia verde; una finestra pop-up. Selezionare il file di elenco di ritardo con ritardi appropriati o creare l'elenco dopo aver cliccato " Open. " una volta l'elenco di ritardo è soddisfacente, fare clic su " OK. "
Nota: una finestra verrà visualizzata una richiesta per la creazione di un file per tutti gli spettri che sarà raccolti in al fine di calcolare il valore di T 1. La posizione e i nomi delle cartelle e dei file sono responsabilità dell'utente. - Fare clic su " salvare " per lo strumento avviare l'acquisizione dei dati e salvare automaticamente i file per i ritardi nella cartella selezionata.
Nota: Il software RIMNR creare le curve di rilassamento T 1 e calcolare i tempi di rilassamento T 1 per ogni caso. Una finestra pop-up con la curva di rilassamento T 1 e la costante di tempo o valore T 1 . Qui, il valore di T1 per cinacalcet HCl era 2.4 s.
4. Misure di campioni di calibrazione con Pure API
- misura l'API campioni per costruire la curva di taratura
- posto uno campione di calibrazione nel magnete per una particolare API. Equilibrare i campioni per un minimo di 5 min per i più piccoli tubi e 10 min per i più grandi tubi.
- Acquisire un deperimento libero di induzione (FID) o solido (90 x-90y FID) esperimento con i parametri appropriati seguendo le istruzioni riportate nel manuale dello strumento. Nel software RINMR, caricare il " solid.exe " (o " fid.exe ") sequenza di impulso selezionando " caricare " sotto " sequenza " e facendo clic su ". libera "
Nota: l'esperimento consigliata è solido per materiali solidi che sono Fast-rilassante con breve T 2 s (tempo di rilassamento trasversale). I parametri sperimentali raccomandati sono 128 scansioni raccolti, con un tempo di sosta 0,1 µs, punti 1.024 dati, un impulso di 90 gradi (7,05 µs in questo caso, capanoated utilizzando Teflon) e un tempo morto di 10 µs per la sonda di 26 millimetri 19 F. Un ritardo di riciclo di 7.5 s per farmaci con il gruppo di 3 CF e 20 s per farmaci con il gruppo F collegato ad un aromatico (a causa di tempi di rilassamento T 1) sono stati utilizzati per i casi presentati qui, basato sulla loro T 1 misure. - Misurare tutti i campioni preparati per ogni API dopo che essi sono equilibrati a temperatura del magnete per 5-10 min generare le curve di calibrazione di ogni campione di API. Salvare i dati in una cartella, dando un nome distinto per ogni esecuzione sperimentale.
- Calcolare la percentuale in peso dei campioni basati sulla quantità in ogni provetta e considerando la purezza del campione nel più grande tubo API.
5. Campioni di misura del farmaco in compresse
- luogo già preparato formulato campioni di prodotto di droga (compresse o capsule) nel magnete per misurarli uno alla volta. Equilibrare il campione per 5 min per piccoli tubi NMR o per 10 min per i campioni più grandi tubi NMR.
- Acquisire lo stesso NMR esperimento (cioè, solido) con le stesse condizioni per quanto riguarda i campioni calibrati per ogni particolare API.
6. Generazione della curva di calibrazione delle curve con puro esempi di API e aggiungendo i dati da campioni di prodotto di droga come compresse in curve di taratura
- In questi casi, selezionare la regione del solido esperimento da 5 a 300 punti per creare le curve di taratura. I dati possono essere analizzati in tre modi diversi, come descritto di seguito.
- Aprire il software di calibrazione del RI. Richiamare tutti i dati di tinta cliccando sul simbolo del clip per aprire il file FID o i solidi da una particolare API. Per tutti i campioni misurati, immettere le percentuali di peso sotto il “ Conc ” colonna e i pesi sotto la “ massa ” colonna. Selezionare la regione appropriata (5-300 punti) utilizzando il metodo average per costruire la curva di taratura (aprire l'icona di “ dati NMR Display ” per selezionare l'intervallo di punti per il calcolo). Salvare la curva di calibrazione.
Nota: La colonna di Cal fornirà la percentuale di farmaco nei campioni misurati. - In the RI Calibration software con la stessa regione selezionata (5-300 punti), utilizzare il metodo adatto per costruire la curva di taratura. Salvare la curva di calibrazione. Seguire le stesse istruzioni come al punto 4.2.2.
- Aprire il software (per esempio, Mnova). Trascinare tutti i solidi dati da una particolare API e immettere le percentuali di peso dei campioni di riferimento; manuale istruzioni possono essere trovate cliccando “ contenuto ” sotto la “ aiuto ” menu. Nella “ avanzate ” menu, selezionare “ Time Domain ” e poi “ quantificazione; ” una finestra pop-up. Fare clic sul segno più blu per selezionare l'area di integrazione. Integrare la regione appropriata (5-300 punti) utilizzando la modalità di grandezza per costruire la curva di taratura.
- Salvare la curva di calibrazione. Nella tabella, è necessario immettere le percentuali delle droghe per campione solo per gli standard sotto il “ concentrazione (x) ” colonna e i pesi per tutti i campioni sotto la “ massa (m) ” colonna; campioni di calibrazione dovrebbero essere in rosso (controllato). Assicurarsi che il “ funzione di segnale ” è “ y = s/m ” (per normalizzare a massa e del segnale).
- Per misurare la riproducibilità e ripetibilità, ogni campione 3 volte in giorni diversi e costruire la curva di calibrazione in entrambi i pacchetti software. Salvare la calibrazione curva file.
7. Calcolo della droga fluorurati API peso nel prodotto formulato droga utilizzando le curve di calibrazione
- per il calcolo dell'importo peso percentuale e media dosaggio per compressa/capsula di gas fluorurati ad API farmaco nel farmaco formulato prodotto
- uso il file per la curva di taratura dal software di calibrazione del RI e la media metodo. Leggere i dati NMR dal misurato compresse (o capsule) e inserire i pesi per determinare la percentuale in peso di gas fluorurati ad API nel formulato compresse o capsule sulla curva di calibrazione.
Nota: Il “ Cal ” colonna fornirà la percentuale di farmaco nei campioni misurati (calibrazione e commerciale compresse o incognite). Si noti che il parametro O1 deve essere lo stesso per i campioni di calibrazione e le compresse o capsule per il software di calibrazione RI. - Utilizzare il file per la curva di taratura dal software RI calibrazione con il metodo di misura. Leggi i dati NMR dal Tablet (o capsule) misurata e inserire loro pesi per determinare la percentuale in peso di gas fluorurati ad API nel formulato compresse o capsule dalla curva di taratura. Seguire le stesse istruzioni come al punto 5.2.1. Si noti che il parametro di 1 O deve essere lo stesso per i campioni di calibrazione e le compresse o capsule per il software di calibrazione RI.
- Utilizzare il file Mnova e trascinare i dati NMR acquisiti per l'API formulato (o li misura tutto il giorno stesso). Seguire le istruzioni al punto 4.2.4. Inserire i pesi per determinare la percentuale in peso di fluorurati API nel formulato compresse o capsule sulla curva di calibrazione.
Nota: Nella tabella, i campioni di taratura sarà in rosso (controllato) e le compresse/capsule sconosciute o commerciale in blu (non selezionata). Il “ concentrazione (x) ” colonna mostrerà i valori calcolati per le compresse commerciale dei campioni sconosciuti in base ai valori dei campioni di calibrazione in rosso blu. Avviso che il software non richiede l'uso dello stesso parametro per calcolare la percentuale di peso O1. - Calcolare la quantità di droga fluorurati per compressa o capsula come valore medio dall'equazione qui sotto (D = dose di API in mg, W NMR = percentuale in peso di API ottenuta dalla curva di taratura, w = peso totale di formulato prodotto dal peso della droga formulato provenienti da misurata compresse o capsule e N = numero di formulati compresse o capsule utilizzate per la misura) e confrontare con i valori calcolati dal software sulla base del curve di calibrazione:
- uso il file per la curva di taratura dal software di calibrazione del RI e la media metodo. Leggere i dati NMR dal misurato compresse (o capsule) e inserire i pesi per determinare la percentuale in peso di gas fluorurati ad API nel formulato compresse o capsule sulla curva di calibrazione.
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Representative Results
Abbiamo testato basso campo 19F TD-NMR con tre prodotti di droga commerciale (cinacalcet, lansoprazolo e ciprofloxacina) per misurare il contenuto di droga medio dei prodotti fluorurati droga. La figura 1 Mostra le strutture dei farmaci testati, visualizzare le posizioni degli atomi di fluoro.
Abbiamo testato diversi lotti e forme di dosaggio (cioè, 30, 60 e 90 mg) di cinacalcet compresse, una forma di dosaggio (15 mg) di un sacco di marca e generico di Lansoprazolo capsule e forma di un dosaggio (500 mg) e un sacco di compresse di ciprofloxacina. NMR del segnale decade per cinacalcet (Figura 2), come esempio e le curve di calibrazione per i tre farmaci (figure 3 - 5) sono stati ottenuti dal software RI calibrazione utilizzando la media e metodi di misura e da Mnova utilizzando la modalità di grandezza. Dati da quelle curve sono stati tracciati anche per controllare la loro riproducibilità attraverso le misurazioni di triplici copie (figure 3 - 5), mostrando un'eccellente linearità e buona riproducibilità. I risultati delle misurazioni per i tre farmaci sono desunti da tabelle (tabelle 1-3) e visualizza validi accordi con le indicazioni riportate in etichetta per i tre farmaci.
Per verificare l'effetto sulla preparazione del campione, la metà delle compresse di ciprofloxacina sono stata schiacciata. La tabella 3 Mostra che i risultati del contenuto medio di droga dall'intatta e le compresse frantumate d'accordo bene con il reclamo dell'etichetta, che indica che non c'è nessun bisogno di distruggere le compresse per eseguire la misurazione. Inoltre, viene illustrato che il metodo è non distruttiva e che i campioni possono essere recuperati nelle loro forme intatte.
Per determinare il significato sulla misurazione delle forme fisiche e chimiche, abbiamo usato mute gratuite ciprofloxacina e HCl monoidrato come standard di calibrazione per determinare il contenuto medio del farmaco in compresse di ciprofloxacina intatto e schiacciato. Figura 6 Mostra i risultati. Figura 6 A raffigura i risultati quando ciprofloxacin HCl monoidrato è stato usato come standard di calibrazione (punti rossi) e la Figura 6B spettacoli ciprofloxacina free base (punti rossi). I punti blu nella Figura 6 corrispondono alle compresse di ciprofloxacina intatto e schiacciato. Solo in Figura 6A fa il contenuto medio di ciprofloxacina nelle compresse e compresse frantumate d'accordo bene con il reclamo dell'etichetta, che indica che lo standard di calibrazione corretta è ciprofloxacin HCl monoidrato. X-ray di dati di diffrazione (XRPD) di polvere di compresse a cipro, mute gratuite ciprofloxacina e ciprofloxacin HCl monoidrato sono stati registrati per confermare le loro diverse forme fisiche basate sugli schemi XRPD (Figura 7).
Figura 1 . Strutture chimiche di lansoprazolo, ciprofloxacina monoidrato di acido cloridrico e acido cloridrico Cinacalcet.
Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Nella figura 2. Decadimento del segnale NMR, misurato per Cinacalcet HCl, nel tempo, mostrando i trattamenti di dati diversi.
(A) metodo medio di RI calibrazione software, (B) RI calibrazione software adatto metodo e metodo di zona (C) Mnova software. La regione da 5-300 punti è stata utilizzata per l'analisi per tutti i trattamenti di dati. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Nella figura 3. Curve di calibrazione (segnale NMR contro percentuale di farmaco) per Cinacalcet HCl, calcolato in Base libera, generato da misurazioni eseguite in triplice copia.
Software di calibrazione RI (A) in modalità media, software di calibrazione RI (B) nella modalità di adattamento e (C) metodo di zona del software Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4 . Curve di calibrazione (segnale NMR contro percentuale di droga) per lansoprazolo, generate da misurazioni effettuate in triplice copia.
Software di calibrazione RI (A) in modalità media, software di calibrazione RI (B) nella modalità di adattamento e (C) metodo di zona del software Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 5 . Curve di taratura (segnale NMR contro percentuale di farmaco) per Ciprofloxacin HCl H2O, calcolato come Base libera, generata da misurazioni eseguite in triplice copia.
Software di calibrazione RI (A) in modalità media, software di calibrazione RI (B) nella modalità di adattamento e (C) metodo di zona del software Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Nella figura 6. Dati NMR.
Segnale di RMN in funzione della percentuale di sostanza medicinale uns free base per intatti e schiacciati compresse di ciprofloxacina (puntini blu) quando si utilizza (A) ciprofloxacin HCl monoidrato (punti rossi) e (B) ciprofloxacina mute gratuite (punti rossi) come standard di riferimento. I dati è stati generati utilizzando software di Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 7 . Dati di diffrazione di raggi x potenza.
Raggi x di dati di diffrazione di potenza per Ciprofloxacina base (superiore), Ciprofloxacina farmaco prodotto gratuito come cipro dal Tablet (al centro) e ciprofloxacin HCl monoidrato (in basso). Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Tabella 1. Calcolato le dosi di Cinacalcet mute gratuite in commercio compresse, con loro statistiche calcolate mediante il pacchetto di Software di calibrazione RI utilizzando i media e i metodi di misura e il Software di Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli.
Tabella 2. Calcolate le dosi di lansoprazolo in nome di marca e generici capsule, con loro statistiche calcolate mediante il pacchetto di Software di calibrazione RI utilizzando i media e i metodi di misura e il Software di Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli.
Tabella 3. Calcolate le dosi di ciprofloxacina generico Cipro compresse e compresse frantumate, con loro statistiche calcolate mediante il pacchetto di Software di calibrazione RI utilizzando i media e i metodi di misura e il Software di Mnova. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso di John Wiley & figli.
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Discussion
Come più fluorurati farmaci stanno diventando disponibili sul mercato, abbiamo sviluppato una metodologia semplice e specifica per misurare il contenuto di droga medio dei prodotti di droga fluorurati utilizzando basso campo 19F TD-NMR5. Abbiamo testato questo metodo su tre prodotti di droga commerciale: compresse contenenti cinacalcet HCl, capsule contenenti lansoprazolo e compresse contenenti ciprofloxacin HCl monoidrato. I vantaggi di questo metodo sono sua specificità a causa della mancanza di fluoro in eccipienti e la sua semplicità. Abbiamo testato la misurazione capacità sulle formulazioni intatti (capsule o compresse) per cinacalcet e lansoprazolo formulato droghe. Tuttavia, nel caso di farmaco Ciprofloxacina formulata, abbiamo testato intatto e schiacciato compresse per valutare la preparazione del campione. Parte dello sviluppo del metodo focalizzato sul confronto di due pacchetti software, RI taratura (software comune per la quantificazione dei dati TD-NMR) e una versione recente commercialmente disponibile del software di Mnova in grado di elaborare dati TD-NMR (Mnova è uno dei i comuni pacchetti software per l'elaborazione dati NMR ad alto campo). Abbiamo valutato entrambi i pacchetti software sulla loro capacità di riferire i risultati e sulla loro compatibilità con standard dell'ufficio commerciale software pacchetti5.
Cinacalcet8 HCl (Figura 1) è formulato in compresse in tre dosi (30, 60 e 90 mg, hanno rappresentato in base libera). Abbiamo testato diversi lotti da quei tre dosaggi commerciale utilizzando il nostro 19metodologia F TD-NMR per calcolare la quantità media di cinacalcet in base libera nelle tavolette. Curve di calibrazione per cinacalcet HCl sono stati generati in triplice copia, come indicato nel protocollo, utilizzando due pacchetti di software che ha fornito le curve di calibrazione lineare con buona riproducibilità (Figura 3). La tabella 1 Mostra i risultati che sono d'accordo con l'etichetta sostengono per le dosi testate, con buona scarto quadratico medio e la deviazione standard relativa percentuale valori (RSD).
Lansoprazole9 (Figura 1) è venduto in una dose di 15 mg formulata, che è un sistema di modello per testare la nostra metodologia per formulazioni capsule della basso-dose. Abbiamo testato il nostro metodo, come descritto in precedenza e utilizzati come ricezione campioni. Come nel caso delle compresse HCl cinacalcet, le curve di calibrazione, come triplici copie, erano lineari e buona riproducibilità (Figura 4). I risultati dell'analisi mostrano che la dose testata concorda bene con l'etichetta sostengono, con buona deviazione standard e i valori percentuali di RSD (tabella 2). Cloridrato di Ciprofloxacin10 monoidrato (Figura 1) è formulato in compresse contenenti ciprofloxacin HCl monoidrato, con una dose di 500 mg in base libera. Come nei casi precedenti, le curve di calibrazione in triplice copia erano lineari, con buona riproducibilità (Figura 5). I risultati dell'analisi mostrano che la dose testata concorda bene con l'etichetta sostengono, con buona deviazione standard e i valori percentuali di RSD (tabella 3). In questo caso, abbiamo valutato anche il metodo con intatti e schiacciati compresse per determinare gli effetti della preparazione del campione. In entrambi i casi, i risultati erano in buon accordo con il reclamo dell'etichetta (tabella 3), dimostrando che i risultati di contenuti media droga sono appena sfiorati dalla preparazione del campione.
Il nostro metodo utilizzando 19F TD-NMR misure il contenuto di droga medio fluorurati in prodotti di droga formulato, direttamente dal loro stati solidi come polveri, compresse o capsule, senza la necessità di qualsiasi altra manipolazione (ad es., dissoluzione, come in metodi di cromatografia liquida (LC)). Di conseguenza, il giusto prodotto chimico e le corrette forme fisiche di standard di riferimento devono essere valutate per determinare il loro impatto sui risultati dell'analisi. Per illustrare questo punto, abbiamo costruito le curve di calibrazione di ciprofloxacina con ciprofloxacin HCl monoidrato e la sua base gratuito come gli standard di calibrazione. Quando lo standard utilizzato per la curva di taratura è stato la base libera, la misurazione delle compresse formulato cipro indicato 137,8% e 138,8% della sostanza medicinale nelle tavolette formulate intere e schiacciate, rispettivamente (dati rappresentati nel grafico B di Figura 6 come puntini blu). Ovviamente, questi risultati sono tutt'altro che il reclamo dell'etichetta di ciprofloxacin base libera circa 64,7% (tabella 3). Grafico A di Figura 6 Mostra i risultati concordando con il reclamo dell'etichetta quando la curva di taratura è fatto con il ciprofloxacin HCl monoidrato (punti rossi) per misurare la cipro e compresse frantumate (punti blu). Le differenze tra i risultati sono a causa di errate forme fisiche e chimiche, utilizzate come base libera per i campioni standard di riferimento. Questa valutazione è stata confermata confrontando i modelli XRPD di base gratuito ciprofloxacin, ciprofloxacin HCl monoidrato e cipro generico compresse. Ciprofloxacina gratuito base ha una forma di cristallo differenti di ciprofloxacin HCl monoidrato e cipro compresse a causa dei diversi modelli XRPD (Figura 7).
Quando si confrontano i pacchetti di software per la calibrazione, taratura RI sia Mnova produrre risultati soddisfacenti. Mnova ha il vantaggio di essere più compatibile con altri pacchetti software per ufficio commerciale per grafici statistici e scientifici e analisi dei dati, che è utile per la segnalazione. Mnova software è rivisto e aggiornato ogni anno, mentre il software di calibrazione RI non è. Per quanto riguarda i due metodi di analisi di dati utilizzati per RI taratura, il metodo di "adattarsi" fornisce risultati ragionevoli ma è più povero rispetto al metodo "medio" perché il metodo di "fit" si basa su un'estrapolazione a zero dei dati misurati, l'aggiunta di maggiore incertezza per il risultati finali.
In conclusione, abbiamo sviluppato una metodologia semplice basata su basso campo 19F TD-NMR per misurare il contenuto di droga medio dei prodotti di droga contenenti fluoro. Questo semplice protocollo fornisce risultati in buon accordo con le indicazioni riportate in etichetta in meno tempo di classiche metodologie (ad es., LC). La tecnica è non distruttiva e non richiesto qualsiasi manipolazione dei campioni, con recupero completo campione utilizzando forme intatte durante l'analisi (ad es., polvere, compresse e capsule). Gli standard utilizzati per costruire la curva di calibrazione devono avere le stesse forme chimiche e fisiche come la droga nel modulo di formulazione. Per quanto riguarda i pacchetti di software utilizzati per l'analisi (calibrazione RI e Mnova), entrambi sono adeguate, ma Mnova sia aggiornato e pienamente compatibile con pacchetti software standard dell'ufficio. In base a queste conclusioni, prevediamo che questa metodologia attuata in laboratori e impianti produttivi come uno strumento PAT di processo nell'industria farmaceutica.
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Disclosures
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Acknowledgments
Questo manoscritto è basato su un articolo precedentemente pubblicato5. Ristampato da5, copyright 2015, con il permesso da John Wiley & Sons.
Siamo grati al nostro management, Dr. Janet Cheetham, Dr. Francisco Alvarez, Dr. Arwinder Nagi e Dr. David Semin, per il loro supporto, interesse e incoraggiamento per eseguire questo progetto di ricerca e al Dr. Minhui Ma e Mr. Robert Munger, per averci con Cinacalcet HCl, formulati compresse e informazioni sul farmaco. Vogliamo anche ringraziare il Dr. Michael Bernstein, Dr. Manuel Perez e Dr. Santiago Dominguez per loro sostegno e costruttivi dibattiti sullo sviluppo della versione attualmente commerciale del software Mnova come si applica per la quantificazione dei dati TD-NMR. Inoltre, un ringraziamento speciale a Mr. film L. Marra F.N.P. per averci fornito con cipro generico compresse per condurre i nostri studi.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MQC-23 | Oxford Instruments | 52-AM4044 | 23.4 MHz for 1H and 22.0 MHz for 19F |
| 26 mm Probe (19F) | Oxford Instruments | 52-AM4061 | 19F NMR probe |
| Cinacalcet HCl | Amgen | Lot 005002 M | Purity 99.8% |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 0010021308 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D1026396 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D118714 | 30 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D061829 | 60 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 00100213 | 90 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot D064074 | 90 mg tablets |
| Cinacalcet commercial tablets | Amgen | Lot 1026356 | 90 mg tablets |
| Lansoprazole | Fluka | Lot LRAA1897 | Purity 99.7% |
| Brand name Lansoprazole | Novartis | Lot DV1891 | 15 mg capsules |
| Lansoprazole generic | SUPERVALUE INC | Lot 2GE2027 | 15 mg capsules |
| Ciprofloxacin free base | Fluka | Lot BCBM7969V | 99.9% purity |
| Ciprofloxacin HCl monohydrate | Fluka | Lot P500044 | 94% purity as HCl salt |
| Cipro generic | Pack Pharmaceuticals | Lot PUB3033 | 500 mg tablets |
| 25 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-25TD-200-FB | |
| 18 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-18TD-200-FB | |
| 10 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-10TD-200-FB | |
| 5 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-HL5-7 | |
| 3 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-H3-7 | |
| 2.5 mm NMR tube | New Era Enterprises | NE-H5/2.5 |
References
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