Summary
I denne artikel beskrives en detaljeret metode til ved hjælp af en røntgenfast bly-baseret silikonegummi til perfuse murine Vaskulaturen for aorta diameteren kvantificering i en musemodel af aorta aneurisme og dissektion.
Abstract
Aorta aneurisme og dissektion er forbundet med betydelig morbiditet og dødelighed i befolkningen og kan være meget dødbringende. Mens dyremodeller for aorta sygdom findes, har i vivo billeddannelse af Vaskulaturen været begrænset. I de seneste år, mikro-edb tomografi (mikro-CT) fremstod som en foretrukne modalitet for imaging både store og små fartøjer både i vivo og ex vivo. I forbindelse med en metode af vaskulære støbning, har vi med succes brugt micro-CT til at karakterisere frekvens og distribution af aorta patologi i β-aminopropionitrile-behandlede C57/Bl6 mus. Tekniske begrænsninger af denne metode omfatter variationer i kvaliteten af perfusion indført af dårlig dyr forberedelse, anvendelsen af passende metoder til fartøjets størrelse kvantificering og overlevelsesevne af denne procedure. I denne artikel beskrives en metode for det intravaskulære perfusion af blyholdige røntgenfast silikonegummi til kvantitative karakterisering af aortopathy i en musemodel af aneurisme og dissektion. Ud over at visualisere aorta patologi, kan denne metode anvendes til at undersøge andre vaskulære senge i vivo eller vaskulær senge fjernet post mortem.
Introduction
Forekomsten af aorta dissektion er 3 tilfælde per 100.000 per år1. Aorta dissektion og aneurysmal sygdomme tegner sig for over 10.000 dødsfald i USA hvert år, tegner sig for 1-2% af alle dødsfald i vestlige lande2. Aorta dissektion er initieret af en rive i intima lag af fartøjet med udbredelsen af blod gennem lag af aorta væggen under fysiologisk pres. Forhøjede patientens puls pres er forbundet med en øget forekomst af dissektion og komplikationer. Øget væg shear stress er forbundet med aortavæggen udvidelsen fører til en aneurisme dannelse3,4. Konsekvenserne af aortadissektion omfatter okklusion af blodgennemstrømningen til fjerntliggende organer, herunder hjerne, nyrer, tarme, og lemmer, dannelse af kronisk aneurismer, brud eller død5,6,7.
I øjeblikket er de biokemiske og cellulære processer i indledningen og progression af aortaaneurismer og dissektioner stadig dårligt forstået. Reproducerbare dyremodeller for aorta aneurisme og dissektion er nøglen til at forstå deres patofysiologi. Β-aminopropionitrile (BAPN) er en lysyl oxidase hæmmer, som forhindrer cross-linking af elastin og kollagen, og har vist sig at markant ændrer strukturen af fartøjet væg ekstracellulære matrix og dens biomekaniske integritet6 8. Rotter behandlet med BAPN har været udnyttet som en fælles dyremodel af aorta aneurisme og dissektion9,10.
Vaskulære billeddiagnostiske modaliteter er medvirkende til at identificere vaskulære patologi, bekræfter fartøjets passage og evaluere orgel perfusion. For nylig, mikro-beregnet tomografi (mikro-CT) er blevet udnyttet til at studere Vaskulaturen af mus og ligeledes store dyr. I modsætning til knoglen er den aksiale billeddannelse af blodkar ved computertomografi begrænset, da intraluminal blod er i sagens natur relativt radiolucent. Når de kombineres med intravaskulær kontraststoffer, dog muliggør mikro-CT detaljeret tre-dimensionel rekonstruktioner af animalske vasculatures til studiet af makro-anatomiske vaskulære patologi11.
Den valgte kontraststof er (Se Tabel af materialer) en røntgenfast silikonegummi, der indeholder bly chromat og bly sulfat. Ved perfusion i tilstedeværelse af en katalysator, det hurtigt hærder til at danne en afstøbning af Vaskulaturen med minimale ændringer i den makro-anatomiske arkitektur af fartøjer, gør Vaskulaturen meget røntgenfast i modsætning til baggrunden væv når undersøgt vurdere. Denne kontraststof er fordelagtig, fordi det er let at håndtere og undgår væv nedbrydning og fartøj tab på grund af brud ofte forbundet med vaskulære støbt korrosion. Som det hærder med minimal krympning12, fartøjer ryddet af blod fortsat patent og giver mulighed for en præcis vurdering af dyrs makro-Vaskulaturen i ikke-overlevelse eksperimenter. Tidligere arbejde har med held brugt røntgenfast silikone gummi-kontrast i en række dyreforsøg. Specifikt, har anvendelighed i at visualisere koronar, glomerulær, placenta, og cerebral oplag11,12,13,14,15 været vist. I dette papir detalje vi metode af åbne venstre ventrikel punktering for det intravaskulære perfusion af blyholdige røntgenfast silikonegummi kvantitativt kendetegner BAPN-induceret aorta patologi i en musemodel af mikro-CT.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokoller for dyr håndtering blev godkendt af institutionelle Animal Care og brug Udvalget af University of Maryland, Baltimore (animalske protokolnummer 0116024) og gennemføres i henhold til AAALAC internationale standarder.
1. forberedelse af reagenser
-
Heparin
- Fortynd 250 µL af 1000 U/mL heparin sulfat i 50 mL af phosphat bufferet saltvand til at foretage en endelig koncentration på 5 U/mL.
- Varm heparinized (5 U/mL) fosfatbufferet saltopløsning, som vil erstatte blod i Vaskulaturen i vandbad indstillet på 37 ° C.
- Forberede det pres-kontrollerede pumpe ved at forbinde den krævede slanger og 2 tomme 10 mL sprøjter, 1 for heparinized saltvand buffer og 1 for kontraststof.
- Fyld slangen med varm heparinized fosfatbufferet saltopløsning og fjerne luftboblerne fra slangen af tryk pumpe.
-
Kontraststof
Bemærk: Henvises til Tabel af materialer for kontrast agent kit bestanddele.- Bland en pigmenteret sammensatte med et fortyndingsmiddel, der skal opnå en 1:6 farvestof til fortyndingsmiddel ratio.
- Umiddelbart inden brug (trin 2.3.12), tilføje 200 µL af en hærdning agent til hver 5 mL prøve af den fortyndede pigmenterede sammensatte og bland dem godt (4% af volumen).
Bemærk: Fabrikanten rapporterede arbejdstiden er 40 min. Som silikone-gummi kontrast agent begynder at polymerisere 20 min efter tilsætning af en hærder, er det vigtigt at forberede løsning umiddelbart før dens infusion.
-
BAPN drikkevand
- Opløse β-aminopropionitrile (BAPN) i drikkevand til at oprette en endelig koncentration på 3 g/L (tilpasset fra protokoller er tidligere beskrevet i litteraturen)9,16,17.
- Administrere BAPN-holdige drikkevand til en gruppe af mus, når de er 4 uger gammel indtil tidspunktet for perfusion af mikro-CT.
2. kirurgisk Procedure
-
Animalske forberedelse
- Vænne mus på 3 uger gammel, vedligeholde dem på en 12-timers lys/12 h mørke cyklus og fodrer dem standard gnaver chow. BAPN-behandlede gruppe, administrere frisklavede BAPN drikkevand for 16-26 uger ad libitum. Give kontroldyr med standard drikke vand ad libitum.
-
Bedøvelsesmiddel teknik
Bemærk: 24 h før CT analyse, følgende procedure er udført. Kirurgiske procedurer er vedtaget for at forberede en postmortem intracardiac perfusion modellen.- Fremkalde en anæstesi via en induktion tank med 100% O2 og 3% isofluran leveret via en præcision vaporizer. Efter anæstesi induktion, afbryde isofluran og skylle kammer med O2. Vedligeholde anæstesi med 2-2,5% isofluran og 1 L/min O2 via en næsen kegle.
- Knytte både induktion kammeret og ansigtsmaske til en trækul skyllevæske til røggassen adsorption til beskyttelse af personale. Sikre en passende bedøvelsesmiddel flyet ved at demonstrere, at der er ingen svar på skadelige stimuli (tå knivspids).
- Forberede en udløsende felt bestående af en kirurgisk bakke og de nødvendige kirurgiske instrumenter.
- Overføre dyret til feltet kirurgisk og Placer det i dorsal recumbency.
-
Operative teknik
- Brug saks, gøre en midterlinjen snit gennem hud og blødt væv fra midtvejs mellem pubica til brystbenet kærven, strækker sig gennem hud og bløddele overliggende brystbenet.
- Brug saks, oprette et hul i mellemgulvet på formet som et sværd proces at indtaste brysthulen.
- Brug saks til at dissekere mellemgulv af den ventrale brystvæg, bilateralt.
- Skære igennem den kystnære brusk til at adskille ribbenene fra sternum ved den højre ribbenskant.
- Anvende en fine hæmostatisk klemme til spidsen af sternum (nær formet som et sværd proces) og flytte hemostat cranially, så den placeres over hovedet af musen. Dette vil trække thymus og brystbenet fra hjertet, udsætter hjerte og store fartøjer for yderligere manipulation.
- Skarpt dissekere vedhæftede filer mellem hjertet og brystvæggen.
- Tilsluttes en sprøjte pre-loaded med 10 mL af heparinized fosfatbufferet saltopløsning (5 U/mL) 27-gauge IV kateter nål og udfylde alle slanger med bufferen for at fjerne luftboblerne fra rør af tryk pumpe.
- Vær forsigtig, mens de forbereder væsken som bobler i linjen væske kan hæmme påfyldning af mindre fartøjer. Begrænse antallet af fartøjer, der er beskadiget under den animalske forberedelse, da dette vil medføre kontraststof at sive ud af de afhuggede fartøjer, ændre lydstyrken kræves til en fuldstændig fyldning og indføre artefakter til den endelige billeddannelse.
- Punktere venstre hjertekammer med en 27-gauge kanyle, der er stabiliseret med en retvinklet klemme. Straks incise højre hjertekammer eller den ringere vena cava til at dræne heparin løsning og blod.
Bemærk: Heparin er brugt som en antikoagulans for at forhindre blodet i at størkne i fartøjer efter dyrets død. - Perfuse dyr med en konstant hastighed på 2 mL/minut ved hjælp af en enkelt sprøjten pumpe. Bemærk den synlige blanchering af organer. Fortsætte perfusion, indtil perfusate afløb fra venøs cirkulation er gratis af blod (omkring 5-6 mL). Standse pumpen.
- Afbryde IV kateter slangen fra 10 mL sprøjte, pas på ikke for at forstyrre den nål position i venstre hjertekammer.
- Umiddelbart efter den komplette exsanguination, adskille kontrast agent løsning i 5 mL alikvoter og tilføje det hærder på dette tidspunkt (Se trin 1.2). Bland dem godt. Udarbejde 5 mL kontrast agent mix i en 10 mL sprøjte og perfuse dyr med det.
- For en fuldstændig fyldning af fartøjer (arterier og vener), fortsætte infusion forbi punktet når det kan ses spændende den venøse løsning. Kigge efter tegn på en vellykket perfusion herunder visualiseringen af en casting agent i kranspulsårerne, pulmonale arterier, tarmen og leveren Vaskulaturen.
- Kontraststof vil helbrede efter ca 20 min ved stuetemperatur. Efter hærdning, høste de enkelte organer, efter behov, og ordne dem i 10% neutrale bufferet formalin. Lave hele slagtekroppe, hvis prøverne ikke anvendes til mikro-CT-scanning dagen efter. Hvis kroppene skal bruges den efterfølgende dag, placere dem på en metal plade og placere dem i køleskab ved 4 ° C til helbrede natten over.
3. mikro-CT Scanning og parametre
Bemærk: Specifikke billede erhvervelse parametre vil være afhængig af maskinen i brug.
- Erhverve X-ray beregnet tomografi billeder af hver mus dagen efter perfusion ved hjælp af en mikro-CT scanner med en X-ray tube spænding på 55 kVp, en strøm af 150 μA, en system forstørrelse faktor af 2.19 og en CCD kamera pixel binning faktor 2. Dette giver en effektiv pixelstørrelse af 29 µm.
- Lå mus slagtekroppen liggende på tabellen mikro-CT-scanneren og opnå en spejder X-ray scanning.
- Fokus detektoren synsfeltet 57.4 mm (aksial) x 37,1 mm (transaxial) på torso til at afbilde den fulde længde af aorta.
- Erhverve 180 billede fremskrivninger med en rotation tilvækst af 2 grader og en gang hver projektion af 2800 ms.
- Rekonstruere billeder ved hjælp af en modificeret Feldkamp algoritme; den rekonstruerede voxel størrelse er 29 x 29 x 29 µm3 (Skive tykkelse = 29 µm) ved hjælp af den multimodale 3D visualisering plug-in for den software, der anvendes her.
4. efterbehandling og Rendering
- Konvertere CT data til en DICOM-format ved hjælp af passende software.
- Analysere billeder til at identificere, om en aneurisme var til stede. Måle mindre akse diameter på det bredeste sted af aortabuen, faldende torakal aorta, og abdominale aorta som tidligere beskrevet18 (figur 1).
Bemærk: I vores undersøgelse, billeder blev analyseret af to uafhængige observatører, (en blindet) udnytter en DICOM viewer til at identificere, om en aneurisme var til stede. Mindre akse diameter blev målt på det bredeste sted af aortabuen, faldende torakal aorta, og abdominale aorta som tidligere beskrevet19 (figur 1). Mener ikke-aneurysmal arteriel segmenter af BAPN-ubehandlet mus etableret normal fartøjet diametre tjener som alder-matchede kontrolværdier. - Aneurismer er defineret som en lokaliseret eller diffus dilatation af aorta segmenter til diameter større end 50% af reference diameter. Find disse baseret på de ovenstående målinger.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For at evaluere denne protokol, 20 mandlige voksne mus, blandet baggrund som tidligere beskrevet19 og 20-30 ugens i alder, med eller uden BAPN behandling, var perfunderet med en bly-baserede røntgenfast silikonegummi (Se tabel af materialer ) ved hjælp af den protokol, der er beskrevet ovenfor. De gennemgik mikro-CT-scanning på den følgende dag (figur 1 og figur 2). Der ikke var nogen betydelige forskelle i alderen mus blandt nogen af de sammenlignede grupper.
Mindre akse diametre blev derefter kvantificeret i disse mus. Den gennemsnitlige diameter af den opstigende aorta i BAPN-behandlede mus var betydeligt større end den ubehandlede alder-matchede kontrol (1,43 ± 0,56 mm vs 0,93 ± 0,11 mm; p = 0,023, uparrede studerende t-test). Hæmning af lysyl oxidase med BAPN ikke har en betydelig indvirkning på den gennemsnitlige faldende bryst eller abdominale aorta diametre i forhold til alder-matchede kontrol (p > 0.082, uparrede studerende t-test, figur 3).
En aneurisme var defineret som værende 1,5 x den gennemsnitlige diameter af den ubehandlede gruppe. Der var en betydelig stigning i antallet af mus med aneurismer i den BAPN-behandlet sammenlignet med den BAPN-ubehandlet kontrol (50% af BAPN-behandlede mus vs 0% for ubehandlede mus; P = 0.042) af Fisher eksakt test. Aneurismer i de BAPN-behandlede mus blev identificeret udelukkende i aorta, med de fleste identificeret i thorax aorta (8 ud af 10 aneurismer identificeret). 4 mus udviklet mere end 1 aneurisme med BAPN-behandling (tabel 1).
Figur 1: repræsentative tværsnits micro-CT billederne. A. Dette er en tværsnits billeddannelse af de BAPN-ubehandlet mus. B. Dette er en tværsnits billeddannelse af de BAPN-behandlede mus. Mindre akse diameter målingerne foretages på niveau med aortabuen.
Figur 2: tre-dimensionelle genopbygningen af musen aorta aneurisme og dissektion identificeret af mikro-CT. A. Dette er en repræsentativ 3D rekonstruktion af en BAPN-behandlede mus med en saccular abdominalt aortaaneurisme og en aortabuen aneurisme. B. Dette panel viser repræsentant faldende torakal aorta dissektion i en BAPN-behandlede mus. Sand og falsk lumen er adskilt af intima flappen. Den sande lumen (TL) er den normal passage af blod og den falske lumen (FL) er den nyoprettede passage.
Figur 3: effekt af BAPN behandling på aorta diametre. Disse paneler viser den gennemsnitlige mindre akse fartøj diametre måles af micro-CT i BAPN-ubehandlet og BAPN-behandlet mandlige mus. Disse mus fast besluttet på at have en aneurisme er fremhævet med rødt. Middelværdien af den ubehandlede gruppe er repræsenteret som en stiplet linje i hvert panel. en. Dette er den opstigende aorta/arch (AAo/Arch); 0,93 ± 0,11 vs 1.43 ± 0,56 mm; p = 0,023. b. Dette er den nedadgående torakal aorta (DTA); 0,82 ± 0,04 vs 1.11 ± 0,43 mm; p = 0.0817. c. Dette er den abdominale aorta; 0,66 ± 0,11 vs 0.89 ± 0.58 mm; p = 0.296. Alle data præsenteres som gennemsnit ± standardafvigelse. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
| Ingen BAPN (n = 8) |
BAPN (n = 12) |
|
| Samlede dyr med aneurisme | 0 | 6 * |
| Samlede antal aneurismer | 0 | 10 |
| AAO/ARCH | 0 | 5 |
| DTA | 0 | 3 |
| ABD AORTA | 0 | 2 |
Tabel 1. Anatomiske distribution af identificerede aneurismer i mandlige mus med og uden BAPN behandling. Denne tabel viser forekomsten af aneurismer som identificeret af micro-CT (n = 20). AAO = opstigende aorta; DTA = faldende torakal aorta; ABD AORTA = abdominale aorta. p < 0,05.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Mikro-CT billeddannelse kan bruges til at give meget detaljerede og tre-dimensionelle rekonstruktioner af vaskulære patologi i dyremodeller. Gennem brug af intravaskulære kontrast-forbedret medier, kan ikke forbedret blødt væv, såsom lumen af et blodkar, skelnes fra dem, der styrke. Mens laser Doppler, microangiography, magnetisk resonans angiografi, histologi med fluorescens, eller to-foton mikroskopi kan bruges til at vurdere vaskulære senge, de typisk fokuserer på et begrænset område af undersøgelse og/eller er begrænset til to-dimensionelle vurderinger. Mikro-CT giver en omkostningseffektiv mulighed for at indhente detaljerede billeddannelse af vaskulære strukturer, som kan støtte i at få en forståelse af de underliggende angiogenese og vaskulære biologi. Yderligere metoder af imaging små dyr omfatter i vivo mikro-CT og digital subtraktion angiografi. Svarende til den teknik beskrevet her, i vivo mikro-CT er afhængig af en udefrakommende kontraststof at øge opløsningen. Fenestra VC og Isovue-370 er 2 sådanne blod-pool kontrastmidler, der er tilgængelige for mikro-CT. Fenestra VC er blevet brugt og er rapporteret at have en maksimal gennemsnitlig forbedring af ~ 620 Hounsfield enheder i aorta 20 min efter injektion20. Andre nanopartikel-baserede kontrastmidler har også vist potentiale i både CT og Mr. Venstre ventrikel kateterisation uden at åbne brystet er en anden metode til hele musen perfusion af microimaging, der har været beskrevet21. Ultralyd tænkelig nemlig de langsgående målinger af fartøjet diameter er en sidste metode, der kan bruges i overlevelse undersøgelser.
Under denne procedure kræver passende perfusion en høj grad af opmærksomhed på detaljer. Det er vigtigt for Vaskulaturen at være helt exsanguinated før perfusion med et kontraststof. Hvis leveren ikke Blancher og forbliver dens mørk rød farve, kan ekstra skylning med en heparinized saltopløsning være nødvendig før perfusion med en kontrast. Ufuldstændig exsanguination af Vaskulaturen kan påvirke den endelige billedkvalitet, optræder som udfylder defekter i Vaskulaturen eller kunstig distale vascular tillukning. Yderligere, indsættelse af nålen ind i venstre hjertekammer er en delikat procedure, der kan rive den ventrikulære væg eller skæres igennem i højre hjertekammer. Hvis nålen er sat ind i højre hjertekammer, lungerne vil være perfunderet hurtigt og bliver gule tidligt under perfusion, fører til en ufuldstændig vaskulære perfusion. Et fartøj brud er en endelige komplikation, der fører til en ufuldstændig perfusion. Chancen for et fartøj brud kan minimeres ved at sikre tilstrækkelig dræning fra venøs cirkulation inden indledningen perfusion via arteriel træet. Retrograd injektion er en alternativ metode til at perfusing en vaskulær seng, som tidligere er blevet beskrevet til billede koronar Vaskulaturen11. Vi valgte en antegrad metode til perfusion som det mere præcist repræsenterer fysiologisk blodgennemstrømningen i thorax og abdominale aorta. Kvaliteten af billedet opnået med micro-CT begrænser muligheden for at vurdere aorta for murene blodprop eller hæmatom. Men de bløde væv kan visualiseres ganske godt afhængigt af hvordan CT-protokollen er formuleret. For vores undersøgelser bemærket vi segmenter af aorta med påfyldning defekter formentlig på grund af stenoses fra intraluminal blodprop. Teknikken som beskrevet er bedst til at vurdere det intravaskulære rum.
I Resumé giver denne protokol en sikker teknik for højopløselig undersøgelse af Vaskulaturen af en murine model af aorta aneurisme og dissektion. Kvantitative analyser kan nås nemt ved hjælp af micro-CT billederne, som er i stand til at give en præcis støbt af Vaskulaturen. Med henblik på de eksperimenter, der er illustreret i denne publikation, valgte vi at måle den største aorta diameteren for at efterligne måling af aorta aneurismer i klinisk praksis. En kombination af anatomiske landemærker og skive placering afstande kan udnyttes til at måle specifikke segmenter af aorta, hvis det er relevant. Det er også vist, at perfused animalske Vaskulaturen kan afbildet og digitalt adskilt fra skelet baggrunden til den ønskede mængde til at oprette en tre-dimensionelle repræsentation af de store blodkar og dens mindre distale grene. Denne protokol bevarer de kardiovaskulære væv af interesse, som kan være indlejret i paraffin og anvendes til histologiske skæring til yderligere undersøgelse.
Mikro-CT er en lovende imaging modalitet for studiet af vaskulære biologi. Med sin høje rumlige opløsning giver det mulighed for at vurdere struktur, organisation og patologi af blodkar. Fremgangsmåden i dette manuskript kræver flere færdigheder og teknikker, herunder animalske håndtering og forberedelse, image erhvervelse og kvantificering af resultaterne. Denne artikel har med succes demonstreret en anvendelse af vaskulære perfusion at identificere aortopathies i mus. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at vurdere dens anvendelighed i andre dyremodeller og sygdomsprocesser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at oplyse.
Acknowledgments
Vi vil gerne takke Mark Smith for hans hjælp med Radiografisk billeddannelse. Dette arbejde er støttet af NIH T32 Grant for tværfaglig forskning i hjerte-kar-sygdom (BOA), American Heart Association (SMC) og NIH R35 Grant (DKS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microfil | Flow Tech, Inc | MV-122 | We use yellow, a different color can be ordered as desired. Kit includes MV-Compound, MV-Diluent, and MV-Curing Agent. |
| Heparin (1000 U/mL) | Sagent Pharmaceuticals | 25021-400-10 | |
| Phosphate buffered saline | Corning | 21-031-CV | |
| Isoflurane | Vet One, MWI | 502017 | |
| 3-Aminopropionitrile fumarate salt | Sigma-Aldrich | A3134 | |
| Single syringe pump | Fisher Scientific | 14-831-200 | |
| 27-gauge scalp vein set needle | Exel Int | 26709 | 27G x 3/4", 12" tube |
| Inveon Micro-CT scanner | Siemens Medical Solutions | ||
| Osirix MD | Pimxmeo SARL | Version 8.0.2 | |
| Inveon Research Workplace | Siemens Medical Solutions | Version 4.2 | |
| Rodent Chow | Harlan Teklad | 2018sx |
References
- Meszaros, I., et al. Epidemiology and clinicopathology of aortic dissection. CHEST. 117 (5), 1271-1278 (2000).
- Kochanek, K. D., et al. Deaths: final data for 2009. National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1-116 (2011).
- Li, J. S., Li, H. Y., Wang, L., Zhang, L., Jing, Z. P. Comparison of beta-aminopropionitrile-induced aortic dissection model in rats by different administration and dosage. Vascular. 21 (5), 287-292 (2013).
- Huffman, M. D., Curci, J. A., Moore, G., Kerns, D. B., Starcher, B. C., Thompson, R. W. Functional importance of connective tissue repair during the development of experimental abdominal aortic aneurysms. Surgery. 128 (3), 429-438 (2000).
- Wu, D., Shen, Y. H., Russel, L., Coselii, J. S., LeMaire, S. A. Molecular mechanisms of thoracic aortic dissection. Journal of Surgical Research. 184 (2), 907-924 (2013).
- Bruel, A., Ortoft, G., Oxlund, H. Inhibition of cross-links in collagen is associated with reduced stiffness of the aorta in young rats. Atherosclerosis. 140 (1), 135-145 (1998).
- Martinez-Revelles, S., et al. Lysyl oxidase induces vascular oxidative stress and contributes to arterial stiffness and abnormal elastin structure in hypertension: Role of p38MAPK. Antioxidants & Redox Signaling. 27 (7), 379-397 (2017).
- Kumar, D., Trent, M. B., Boor, P. J. Allylamine and beta-aminopropionitrile induced aortic medial necrosis: Mechanisms of synergism. Toxicology. 125 (2-3), 107-115 (1998).
- Ren, W., et al. β-Aminopropionitrile monofumarate induces thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice. Scientific Reports. 6, 28149 (2016).
- Kanematsu, Y., et al. Pharmacologically-induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice. Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).
- Weyers, J. J., Carlson, D. D., Murry, C. E., Schwartz, S. M., Mahoney, W. M. Jr Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging. J Vis Exp. (60), e3740 (2012).
- Cortell, S. Silicone rubber for renal tubular injection. Journal of Applied Physics. 26 (1), 158-159 (1969).
- Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents. American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 282 (5), R1267-R1279 (2002).
- Marxen, M., et al. MicroCT scanner performance and considerations for vascular specimen imaging. Medical Physics. 31 (2), 305-313 (2004).
- Yang, J., Yu, L. X., Rennie, M. Y., Sled, J. G., Henkelman, R. M. Comparative structural and hemodynamic analysis of vascular trees. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 298 (4), H1249-H1259 (2010).
- Jia, L. X., et al. Mechanical stretch-induced endoplasmic reticulum stress, apoptosis, and inflammation contribute to thoracic aortic aneurysm and dissection. The Journal of Pathology. 236 (3), 373-383 (2015).
- Kurihara, T., et al. Neutrophil-derived matrix metalloproteinase 9 triggers acute aortic dissection. Circulation. 126 (25), 3070-3080 (2012).
- Dillavou, E. D., Buck, D. G., Muluk, S. C., Makaroun, M. S. Two-dimensional versus three-dimensional CT scan for aortic measurement. Journal of Endovascular Therapy. 10 (3), 531-538 (2003).
- Muratoglu, S. C., et al. LRP1 protects the vasculature by regulating levels of connective tissue growth factor and HtrA1. Arterioclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33, 2137-2146 (2013).
- Badea, C. T., Dragova, M., Holdsworth, D. W., Johnson, G. A. In vivo small animal imaging using micro-CT and digital subtraction angiography. Phys Med Biol. 53 (19), R319-R350 (2008).
- Zhou, Y. Q., et al. Ultrasound-guided left-ventricular catheterization: A novel method of whole mouse perfusion for microimaging. Laboratory Investigation. 84, 385-389 (2004).
