Encyclopedia of Experiments: Biology
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- एक वाई-भूलभुलैया में वाई-आकार का कनेक्टर होता है जिसमें सीधे या पतला ट्यूबों द्वारा इससे जुड़ी तीन फ्लाई शीशियों के साथ। मक्खियां भूलभुलैया के माध्यम से उस उत्तेजना के साथ पक्ष की ओर जाती हैं जिसे वे पसंद करते हैं । प्रयोग शुरू करने के लिए, प्रत्येक शीशी में अस्थिर रसायनों युक्त समाधान के साथ एक ऊतक कागज जगह है । फिर, उन्हें पतला ट्यूबों से कनेक्ट करें । पतला ट्यूब मक्खियों की भूलभुलैया के केंद्र में लौटने की क्षमता को सीमित करता है और अस्थिर रसायनों के प्रसार को धीमा कर देता है ।
इसके बाद, उन्हें धीमा करने के लिए ठंड के भूखे मक्खियों। रासायनिक संज्ञाहरण का उपयोग न करें, क्योंकि इससे परख के परिणाम प्रभावित हो सकते हैं। शीशी को ठंडी मक्खियों के साथ भूलभुलैया के अंतिम भाग में जल्दी से कनेक्ट करें। मक्खियों को भूलभुलैया का पता लगाने के लिए छोड़ दें। उज्ज्वल प्रकाश के कारण किसी भी वरीयता को कम करने के लिए, दूर-लाल प्रकाश के तहत इस कदम को पूरा करें, जो मक्खियों को दिखाई नहीं देता है। अंत में, भूलभुलैया के प्रत्येक पक्ष पर मक्खियों की गिनती करें। भूलभुलैया में उनका स्थान उस रासायनिक सुगंध के प्रति उनकी वरीयता को इंगित करता है।
उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम जंगली प्रकार ड्रोसोफिला के साथ वाई-भूलभुलैया परख का एक सेटअप देखेंगे।
- अगले सुबह परख का संचालन करने से पहले, दिन के अंत में, गीले तौलिया से प्रदान की जाने वाली नमी के साथ ग्लास शीशियों में 10 से 20 प्रायोगिक लाइनों के साथियों को स्थानांतरित करें। मक्खियों का परीक्षण 16 से 18 घंटे में किया जाना चाहिए, या वे डिलिंचन या भुखमरी के कारण मर सकते हैं । अगले दिन, वाई-भूलभुलैया को इकट्ठा करें । वाई के आकार के कनेक्टर को दो ग्लास शीशियों में शामिल करके शुरू करें जो ट्रिम्ड पिपेट युक्तियों के साथ फोम कनेक्टर का उपयोग करके हैं जो नाली बनाते हैं । उनका टेपरिंग आकार इन एक तरह से मार्ग बनाता है ।
"वाई" की तीसरी शाखा एक लोडिंग ट्यूब से जुड़ी हुई है, एक पिपेट टिप के बड़े हिस्से से बनाया गया है, और लोडिंग शीशी से भूलभुलैया के विकल्प बिंदु तक जाने की अनुमति देता है। प्रत्येक टेपरिंग सुरंग से परे एक कांच की शीशी होती है, जिसमें से एक गंध से भरी होनी चाहिए। इन्हें टिश्यू पेपर के 28 मिलीमीटर वर्गों में भिगोकर 40-माइक्रोलीटर बोलस के रूप में लोड किया जाता है। दोनों में से कौन सा गंध होता है।
परीक्षण करने के लिए, पहले मक्खियों को बर्फ पर संक्षेप में ठंडा करें, इसलिए मक्खियों को धीमा कर दिया जाता है। यह एलईडी बल्बों से दूर-लाल प्रकाश के नीचे और 25 डिग्री सेल्सियस पर होना चाहिए। धीरे-धीरे मक्खियों की पलटन को लोडिंग शीशी में छोड़ दें और परीक्षण मक्खियों के साथ वाई-भूलभुलैया लोड करें। गैस संज्ञाहरण का उपयोग न करें।
- मक्खियों को लोडिंग शीशी में जल्दी और धीरे-धीरे स्थानांतरित करना वास्तव में महत्वपूर्ण है। यह वास्तव में इस प्रयोग का सबसे कठिन कदम है क्योंकि मक्खियों को वाई-भूलभुलैया में गंध के प्रसार से पहले तेजी से उठना पड़ता है।
- मक्खियों को 24 घंटे के लिए भूलभुलैया का पता लगाने की अनुमति दी जानी चाहिए, इसलिए अधिकतम संख्या में मक्खियां एक या अन्य ग्लास शीशी में जाती हैं। विभिन्न ट्यूबों में मौजूद मक्खियों की संख्या घ्राण सूचकांक की गणना करने के लिए कार्य करती है। 10 मक्खियों तक के व्यवहार से इकट्ठे हुए मानक सांख्यिकीय तरीकों को इस मूल्य पर लागू किया जाना चाहिए।
यदि 10-फ्लाई साथियों को लगातार परिणाम प्रदान नहीं किए जा रहे हैं, तो परीक्षण 20-फ्लाई साथियों के साथ चलाए जा सकते हैं। भूलभुलैया के घटकों को साफ करने के लिए, उन्हें भिगोना, उन्हें खत्म करना, आरबीएस 35 एमडी में रात भर। नल के पानी में कुल्ला और हवा सुखाने से पहले डीआई पानी में अंतिम कुल्ला के साथ इसका पालन करें।
