测量 HA 抗体对 Fc 介导的效应子功能的激活

取靶向流感病毒血凝素 （HA） 的抗体的梯度稀释液，HA 是一种由球状头部和茎组成的糖蛋白。

将稀释液添加到表达表面结合 HA 的转染哺乳动物细胞上。抗体与 HA 柄区域结合，形成免疫复合物。

在转录因子 NFAT 的控制下引入表达 Fc 受体并编码荧光素酶报告基因的工程化 T 细胞。

在孵育过程中，HA 结合抗体与 Fc 受体结合，而 HA 头与唾液酸结合，触发 T 细胞活化并增加胞质钙浓度。

这种激活启动信号转导级联反应，导致 NFAT 去磷酸化，从而触发其核转位。

NFAT 与其在基因组中的反应元件结合，驱动荧光素酶表达。

添加可渗透细胞的生物发光底物。荧光素酶氧化底物，产生信号。

发光降低伴抗体浓度降低证实了 HA 柄特异性抗体介导的 T 细胞活化。