使用宿主蚊子孢子生成实验性脑疟疾小鼠模型

首先使用一根管子，里面装有感染伯氏疟原虫 （一种引起疟疾的寄生虫）的雌性蚊子的唾液腺。

机械地破坏腺体，将子孢子（寄生虫的一种感染形式）释放到培养基中。

淀腺体部分和碎片。收集含有子孢子的上清液，并将它们注射到受约束的小鼠的尾静脉中。

注射的子孢子通过血液到达肝脏，在那里它们感染肝细胞并繁殖，形成裂殖子——寄生虫的一种入侵形式。

随着时间的推移，肝细胞将裂殖子释放到血液中，侵入红细胞或红细胞。

在红细胞内部，裂殖子无性复制，发育成成熟形式并在红细胞表面表达寄生虫来源的抗原。

这些抗原与内皮受体结合，包括脑血管中的内皮受体，导致感染和未感染的红细胞被隔离。

这种异常的红细胞积聚会破坏血脑屏障，导致大脑实质积液，并在小鼠中发展为脑疟疾。

首先在血餐后 17 至 22 天从笼子中收集雌性蚊子。使用镊子将 3 至 4 只蚊子放在覆盖有一滴冷 RPMI 培养基的载玻片上。然后，将载玻片放在显微镜下。

用镊子小心地将蚊子在头部和身体之间拉伸，并使用注射器和针头隔离唾液腺。接下来，用玻璃移液器吸出载玻片中的唾液腺，然后将它们转移到 1.5 毫升离心管中。然后，用一根小塑料棒将离心管内分离的唾液腺粉碎三分钟，以将子孢子与唾液腺组织分离出来。

4摄氏度下以1,000倍g离心三分钟，以纯化剩余组织中的子孢子。将含有子孢子的上清液移液到新的离心管中，并在 Neubauer 血细胞计数器中计数纯化的子孢子。子孢子表现出典型的逆时针运动。

接下来，通过加入磷酸盐缓冲盐水将纯化子孢子的浓度调整为每毫升10,000。最后，将C57BL6小鼠放入约束器中，并将其尾巴放入温水中，以更好地观察尾静脉。然后，将总共 1,000 个子孢子或 0.1 毫升注射到尾静脉中以启动感染。