利用宿主蚊媒来源的子孢子建立小鼠实验性脑型疟疾模型

从含有感染了疟原虫伯氏疟原虫（Plasmodium berghei）的雌性蚊子唾液腺的试管开始——伯氏疟原虫是一种引起疟疾的寄生虫。

机械破坏腺体，释放子孢子 ——一种具有感染性的寄生虫形态进入培养基中。

离心收集腺体组分和碎片。收集含有子孢子的上清液，注射至固定的小鼠尾静脉中。

注入的子孢子通过血液传播并到达肝脏，在那里感染肝细胞并进行增殖，形成裂殖子 ——一种具有侵袭性的寄生虫形态。 

随着时间推移，肝细胞将裂殖子释放入血液中，侵入红细胞（RBCs）。

在红细胞内，裂殖子进行无性复制，发育为成熟形态，并在红细胞表面表达寄生虫来源的抗原。

这些抗原可结合内皮受体，包括脑血管中的受体，导致感染和未感染的红细胞滞留。

这种异常的红细胞积聚会破坏血脑屏障，导致脑实质内液体积聚，并在小鼠中引发脑型疟疾。

从吸血后 17 至 22 天的雌蚊笼中采集蚊虫。用镊子将 3 至 4 只蚊虫置于载玻片上，载玻片表面滴有一滴冷的 RPMI 培养基。然后将载玻片置于显微镜下。

用镊子轻轻拉伸蚊子的头部与身体，用注射器和针头分离唾液腺。接着，用玻璃移液管吸取载玻片上的唾液腺，将其转移至1.5毫升离心管中。然后，用小型塑料棒在离心管内研磨分离的唾液腺组织3分钟，以释放唾液腺中的子孢子。

在4°C、1,000 × g 条件下离心3分钟，以从残留组织中纯化子孢子。用移液器将含有子孢子的上清液转移至新的离心管中，并使用Neubauer血细胞计数板对纯化的子孢子进行计数。子孢子呈现典型的逆时针运动。

接下来，通过添加磷酸盐缓冲液将纯化的子孢子浓度调整为每毫升10,000个。最后，将一只C57BL6小鼠放入固定器中，并将其尾巴浸入温水中以更清楚地显示尾静脉。然后，向尾静脉注射总共1,000个子孢子（即0.1毫升）以启动感染。