基于微电极阵列的小鼠脊髓切片神经元网络评估

取一个含有 aCSF 的微电极阵列或 MEA。将小鼠脊髓切片放入孔中，并用加重网固定。

MEA 孔放入记录系统中。在显微镜下，确保 MEA 电极与浅背角或 SDH（富含中间神经元的区域）之间的最大接触。

保持连续的脑脊液流动以平衡组织。

神经元通过动作电位进行交流。钠离子流入使膜去极化，然后钾离子流出，导致复极化。膜短暂超极化，阻止新的动作电位，直到静息电位恢复。

记录来自MEA电极的自发神经元活动。在多个电极上同时出现的信号表明突触连接的神经元网络。

引入钾通道抑制剂以延长去极化，从而增加整个网络的动作电位频率和同步节律活动。

显示一致信号的电极越多，表明抑制剂介导的同步活性。

要开始记录背角活动，请使用装满人工脑脊液的大尖端巴斯德移液器将切片从培养箱转移到MEA孔中，并添加额外的人工脑脊液。

使用细短毛画笔将切片放置在 60 个电极记录阵列上。然后，在组织上放置一个加重的网，将其固定到位并促进与MEA电极的良好接触。

将 MEA 置于记录头载物台。使用倒置显微镜检查组织在电极上的位置，以确认尽可能多的电极位于浅表 DH 下方。确保至少两到六个电极不接触切片。

相机连接到设备后，拍摄切片相对于 MEA 的参考图像，以便在分析期间使用。然后，按记录软件中的开始DAQ并确认所有电极都接收到清晰的信号。

接下来，将灌注入口和出口管连接到充满人工脑脊液的MEA孔上，并打开灌注系统。检查流速并确保流出量足以防止过溶胶溢出。平衡组织五分钟后，记录原始基线数据五分钟。

灌注入口管从人工脑脊液移至4-氨基吡啶溶液，等待12分钟，使4-氨基吡啶诱导的节律活性达到稳态。然后，记录五分钟的4-氨基吡啶诱导的活性，并为后续记录做好准备，以测试药物或检查4-氨基吡啶的稳定性。