行为小鼠海马空间受限振荡的记录

该协议描述了用多柄线性硅探针记录局部场电位的情况。利用电流源密度分析转换信号, 可以重建小鼠海马区的局部电活动。利用这种技术, 可以在自由运动小鼠中研究空间限制的脑振荡。

这种方法可以帮助回答神经科学领域的关键问题，例如神经元网络活动如何在精细的时间和空间尺度上组织。该技术的主要优点是，使用线性硅探针电流数据分析可以重建在传统场电位记录中无法轻松检测到的局部振荡。要开始此过程，请使用热珠消毒器对手术器械进行消毒，然后用 70% 乙醇擦拭所有工作表面。

接下来，通过将耳杆轻轻插入耳道，将麻醉的动物安装在立体定位框架中。一旦鼠标的头部被耳杆稳定下来，将咬嘴放在鼻子上以连续输送异氟醚，然后在眼睛上涂抹软膏以防止干燥。之后，在鼠标下方放置加热垫并皮下注射丁丙诺啡以确保术后镇痛。

随后，剃光它的头并用 70% 乙醇对皮肤进行消毒。使用手术剪刀，沿着颅骨中线在皮肤上切开一个切口，然后使用手术夹打开皮肤。借助立体定位对齐工具对齐动物的头部，以调平前囟和 lambda。

前囟和 lambda 之间的高度偏移应小于 50 微米。此外，通过在左侧和右侧距前囟的指定距离处测量深度，沿内侧轴调平头部。如果头部倾斜，请调整头部。

用 3% 过氧化氢清洁头部，然后用无菌棉布擦干。使用适当的立体定向图谱确定开颅手术相对于前囟的位置。使用 0.9 毫米的钻头，在小脑上方的骨骼上钻两个螺丝孔，以放置地面和参考螺钉。

此外，钻一到三个孔用于锚固螺钉以稳定植入物。地脚螺钉的位置将取决于开颅手术的位置。使用合适的螺丝刀将螺钉插入骨骼中。

注意不要渗透到大脑中。现在，通过在植入侧周围的矩形区域中用钻头慢慢减薄颅骨来进行开颅手术。经常用消毒的磷酸盐缓冲液润湿骨骼。

用 27 号注射针轻轻刺穿剩余的变薄的头骨，然后用镊子将其取出。接下来，用 27 号注射针小心地刺穿硬脑膜。使用一把镊子，弯曲针尖形成一个小钩子，然后用这个钩子去除硬脑膜。

然后，涂抹磷酸盐缓冲液以防止大脑表面干燥。然后，将电极插入工具安装在立体定位支架上，并将探头在前囟上归零。将探头移动到开颅手术上方的立体定位坐标，并缓慢穿透大脑表面。

确保探针轴不弯曲并避免通过血管植入。然后，慢慢降低探头，直到比所需深度高出约 200 微米。接下来，用消毒的凡士林覆盖硅探针的开颅手术和小腿以进行保护。

随后，涂抹牙科水泥，将探针的底座固定在颅骨的锚固螺钉上。水泥应用后，立即将探头缓慢移动到目标深度。涂抹粘接剂后推进最后 200 微米，以减少探针的横向移动，并确保目标区域的组织损伤最小。

水泥固化后，用烧灼器熔化蜡，将探针从插入工具中释放出来。然后，从插入装置中松开连接器板，并使用鳄鱼夹将其放置在颅骨上的合适位置。使用牙科水泥将连接板固定到颅骨上。

在探针植入海马体的情况下，将连接板放在对侧顶骨上。然后，将连接器板的接地线和参考线焊接到小脑上方的两个螺钉上连接的电线上。将保护盖修剪到正确的高度，并将其放在硅探针上。

之后，使用牙科水泥固定连接器板和颅骨的盖子，避开裸露的颅骨周围的皮肤。手术后，对小鼠进行适当的镇痛治疗至少两天。单屋鼠标以防止损坏植入物。

此处显示了针对 CA1 区域的慢性植入硅探针的记录。电流源密度分析沿探头的各个柄应用。在这个例子中，单个尖锐的波纹事件导致 CA1 放射层中突出的电流汇，在第二个例子中，记录了齿状回颗粒细胞层中的两个不同位置。

通过应用 60 至 80 赫兹带通滤波器分离高 γ 波段，在位于颗粒单元层的两个记录位点之一上显示局部伽马脉冲。请注意，只有在将记录的信号转换为 CSD 后才能检测到局部 gamma 振荡活动。CSD，而不是 LFP 信号，识别两个记录站点之间的相位和幅度异步周期。

此部分显示了同步 Gamma 活动的简短纪元。此处的迹线说明了 LFP 和 CSD 迹线的相位差和幅度差指数。看完这个视频，你应该对如何在海马体中植入硅探针有了很好的了解。