May 29th, 2013
Protokolle sind für zwei etablierte Motor Koordinationsaufgaben, die beschleunigte Rotarod und Reck, auch zwei Tests in Oxford entwickelt kurzem den statischen Stäbe und Barren präsentiert. Diese Tests können motorischen Beeinträchtigungen möglicherweise von Interesse in ihrem eigenen Recht, sowie als möglichen Variablen in Tests von anderen Bereichen des Verhaltens.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die motorische Koordination bei Mäusen zu messen. Dies wird durch eine erste Prüfung an der beschleunigenden Rotorstange erreicht. Als nächstes wird die motorische Koordination an der Onalstange getestet.
Das Tier kann auch an statischen Stäben getestet werden. Zuletzt kann die Leistung an den Parallelstangen gemessen werden. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden, die zeigen, ob die Maus Beeinträchtigungen in der motorischen Koordination aufweist.
Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Technik noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da es schwierig ist, die Maus für alle folgenden Tests korrekt auf dem Gerät zu platzieren. Bringen Sie die Mäuse fünf bis 20 Minuten vor dem Test in den Versuchsraum, um sicherzustellen, dass sie vollständig wach sind. Die Rotorstangenszene hier wurde an der Universität Oxford gebaut.
Der Stab hat einen Durchmesser von drei Zentimetern und eine Reihe paralleler Rillen auf seiner Oberfläche, die den Mäusen helfen, ihn besser zu greifen. Ein Flansch auf jeder Seite verhindert, dass die Maus den Stab verlässt. Sie haben einen Durchmesser von 30 Zentimetern und einen Abstand von sechs Zentimetern.
Die Stange wird 30 Zentimeter von der Basis des Geräts entfernt befestigt. An der Basis befindet sich eine weich gepolsterte Oberfläche, um Stürze vor Beginn des Prozesses abzufedern. Bereiten Sie die Rotorstange vor, indem Sie eine Startdrehzahl von vier Umdrehungen pro Minute und eine Beschleunigungsrate von 20 Umdrehungen pro Minute einstellen.
Halten Sie die Maus zunächst am Schwanz und bringen Sie sie in einem 45-Grad-Winkel unterhalb der Horizontalen in Richtung Stab. Lassen Sie das Tier schnell los, wenn es die Stange fast berührt. Alternativ kann die Maus auf einen Dübel abgesenkt werden und der Dübel wird verwendet, um das Tier auf die Stange zu übertragen.
Starten Sie die Beschleunigung 10 Sekunden, nachdem Sie die Maus auf die Stange gesetzt haben, und notieren Sie sich die Geschwindigkeit, mit der die Maus abfällt. Wenn die Maus vor fünf Sekunden fällt und wahrscheinlich auf eine schlechte Platzierung durch den Experimentator zurückzuführen ist, sollte das Ergebnis nicht aufgezeichnet und der Versuch neu gestartet werden, wenn die Maus vor 10 Sekunden fällt. Notieren Sie sich die Zeit und erlauben Sie dem Tier noch zwei weitere Versuche.
Bei Tieren, die länger als 10 Sekunden bleiben, notieren Sie die Geschwindigkeit, mit der das Tier fällt. Gelegentlich hört die Maus auf zu laufen und greift daher um die Stange herum an, bevor sie schließlich fällt. Es ist nützlich, die Geschwindigkeit dieses Ereignisses zu beachten.
Die Leistung wird als mittlere Geschwindigkeit zwischen den Versuchen berechnet. Zum Beispiel eine Maus, die einmal vor 10 Sekunden fällt und dann bis zu 12 Umdrehungen pro Minute eingeschaltet bleibt. Das zweite Mal erhält vier plus 12 geteilt durch zwei, was acht Umdrehungen pro Minute entspricht.
Die horizontale Stange misst die Kraft und Koordination der Gliedmaßen im Fall, während eine Stange mit einem Durchmesser von zwei Millimetern am häufigsten verwendet wird. Stangen mit größerem Durchmesser können zu verfeinerten Leistungsbewertungen führen. 38 Zentimeter lange Messingstangen werden von einer hölzernen Stützsäule 49 Zentimeter über der Bankoberfläche gehalten.
Die Stangen werden unter Spannung gehalten, wenn sie in die Kerben der Stützen eingepasst werden, die leicht zusammengezogen sind. Beginnen Sie den Test mit der Zwei-Millimeter-Stange. Halten Sie die Maus am Schwanz fest und legen Sie sie auf die Bank vor dem Gerät.
Schieben Sie es schnell. Etwa 20 Zentimeter nach hinten, um seinen Körper schnell senkrecht zur Stange auszurichten. Heben Sie das Tier an, so dass es die horizontale Stange in der Mitte nur mit seinen vier Poren greifen kann.
Lassen Sie das Heck los und starten Sie gleichzeitig eine Stoppuhr. Wenn die Maus die Stange nicht greift und die Position des Experimentators die Ursache sein kann. Zeichnen Sie den Sturz nicht auf und testen Sie das Tier nach einer kurzen Pause erneut.
Wenn die Maus vor fünf Sekunden fällt, und dies offensichtlich nicht auf eine schlechte Platzierung durch den Experimentator zurückzuführen ist, wiederholen Sie dies bis zu dreimal, um eine Punktzahl von mehr als fünf Sekunden zu erhalten. Notieren Sie entweder die Zeit, die die Maus fällt, oder die Zeit, bis ein vier Arme eine Spalte mit einer maximalen Testzeit von 30 Sekunden berührt, nehmen Sie die beste Punktzahl als das Datu-Recht, um den horizontalen Balken zu bewerten. Wenn die Masse zwischen einer und fünf Sekunden abfällt, wird zwischen sechs Sekunden und 10 Sekunden eine Punktzahl erzielt.
Erziele zwei Punkte zwischen 11 Sekunden und 20 Sekunden. Erziele drei Punkte zwischen 21 Sekunden und 30 Sekunden. Erziele vier Punkte, die nach 30 Sekunden fallen oder einfach bis 30 Sekunden auf der Stange bleiben.
Erhält fünf Punkte, und die Maus erhält ebenfalls fünf Punkte, wenn sie ein Ende berührt. Unterstützung mit seinen vier Ports zu jeder Zeit während des Tests. Wird auf dem Zwei-Millimeter-Stab eine Punktzahl von fünf erreicht, kann das Tier nach einer kurzen Ruhepause auf dickeren Stäben getestet werden.
Das Punktesystem für die Vier- und Sechs-Millimeter-Balken ist das gleiche wie für den Zwei-Millimeter-Riegel, und das Endergebnis ist die kumulierte Summe. Also eine Maus, die auf der Zwei-Millimeter-Leiste fünf Punkte erzielt, aber nach 13 Sekunden von der Vier-Millimeter-Leiste fällt. Fünf plus Punkte sind acht.
Bei diesem Test zur motorischen Koordination werden Holzstäbe oder -stäbe unterschiedlicher Dicke, 35, 28, 22, 15 und neun Millimeter mit einem Durchmesser von jeweils 60 Zentimetern, die mit einer G-Klemme an einem Laborregal in 60 Zentimeter Höhe über dem Boden befestigt werden. 10 Zentimeter vom Ende entfernt in der Nähe der Bank wird eine Markierung angebracht, um die Ziellinie zu markieren. Platzieren Sie die Maus zunächst am äußersten Ende des breitesten Stabes, der vom Regal abgewandt ist, und notieren Sie die Zeit, die das Tier benötigt, um sich zum Regal zu orientieren, und die Gesamtlaufzeit.
Wenn sich die Maus beim Orientieren auf den Kopf stellt und sich unter dem Stab festklammert, ordnen Sie sie willkürlich der maximalen Punktzahl von 120 Sekunden zu. Das Tier wird nicht an den anderen Stangen getestet und erhält ebenfalls einen maximalen Transitwert. Wenn die Maus nach dem Ausrichten herunterfällt oder die maximale Testzeit von 120 Sekunden erreicht, testen Sie sie nicht an schmaleren Stäben.
Eine maximale Punktzahl wird auch vergeben, wenn sich die Maus beim Queren des Stabes nach der Orientierung auf den Kopf stellt, die Maus wieder in den Heimatkäfig zurückbringt und sie vor dem Test ruhen lässt. Die nächstkleinere Rute. Setzen Sie das Tier wie zuvor gezeigt auf den kleineren Stab.
Wenn die Maus innerhalb von fünf Sekunden abfällt, ersetzen Sie sie, und lassen Sie bis zu zwei weitere Versuche zu. Notieren Sie die Zeit, bis der Stab umgedreht wird oder bis die Maus herunterfällt. Zum Aufstellen der Parallelstangen stützen Sie zwei Stäbe mit einer Länge von einem Meter und einem Durchmesser von vier Millimetern im Abstand von 30 Millimetern auf eine Holzstütze.
Säulen 60 Zentimeter über dem Boden. Platzieren Sie die Maus in der Mitte der beiden Balken, wobei die Längsachse senkrecht zu den Balken verläuft. Beide vorderen Poren sollten sich auf einem Balken befinden, beide hinteren Poren auf dem anderen Balken.
Die Ritzung ist ähnlich wie bei den statischen Stäben. Es werden zwei Messungen genommen: die Zeit, bis sich die Maus um 90 Grad zur Startposition orientiert, und die Zeit, bis sie eine der Endstützen erreicht. Ebenso müssen Orientierung und Transit erreicht werden, ohne dass sich das Tier auf den Kopf stellt, andernfalls wird die maximale Zeit zugewiesen.
Wenn das Tier vor fünf Sekunden stürzt, liegt dies wahrscheinlich an einer schlechten Platzierung und das Tier sollte erneut getestet werden. Ursprünglich wurde ein statischer Stab verwendet, um das Fortschreiten der Krankheit bei mutierten Mäusen mit oder ohne Anreicherung der Umgebung in ihren Heimkäfigen zu überwachen. Das Anreicherungsprogramm verzögerte dramatisch das Auftreten einer motorischen Dysfunktion an der Stange, die mit einer Verzögerung des Einsetzens einer schlechten Umklammerung der Hinterhand einherging.
Ein allgemeines Anzeichen von neurologischem Ment: Scrapy infizierte Mäuse zeigten eine Abnahme der Leistung des horizontalen Stabs ab Woche 16 nach der Injektion im Rotorstabtest ab Woche 18 und statische Stäbe ab mindestens Woche 19. Hippocampusläsionen hatten keinen Einfluss auf irgendein Maß der motorischen Fähigkeiten, aber 1 2 9 s zwei SV-Mäuse waren im Vergleich zur C 57 black six-Belastung der Rotorstange und der statischen Stäbe nach ihrer Entwicklung beeinträchtigt. Diese Technik ebnete den Weg für Forscher in der Huntington-Krankheit, um die Auswirkungen der Umweltanreicherung bei mutierten Mäusen der Huntington-Krankheit zu untersuchen.
Dieser Artikel stellt Protokolle zur Beurteilung der motorischen Koordination bei Mäusen mittels verschiedener Aufgaben vor, einschließlich des beschleunigenden Rotarod- und des Horizontalstangen-Tests. Zusätzlich werden zwei kürzlich entwickelte Tests, statische Stäbe und Parallelstangen, vorgestellt, die motorische Beeinträchtigungen identifizieren können.