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DOI: 10.3791/57561-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for obtaining amplicon sequence data from soil, rhizosphere, and root endosphere microbiomes. The method aims to characterize the composition and diversity of plant-associated microbial communities.
Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Amplikons Sequenzdaten von Boden, Rhizosphäre und Wurzel Endosphere mikrobiome zu erhalten. Diese Informationen kann verwendet werden, um die Zusammensetzung und Vielfalt der Anlage verbundenen mikrobieller Gemeinschaften zu untersuchen, und eignet sich für den Einsatz mit einer Vielzahl von Pflanzenarten.
Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, drei Kompartimente des Wurzelmikrobioms, des Bodens, der Rhizosphäre und der Wurzelendosphäre, unter Verwendung von Community-Profiling des ribosomalen 16S-RNA-Gens zu charakterisieren. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen der mikrobiellen Ökologie zu beantworten, wie z. B. die biotischen und abiotischen Faktoren, die die wesentlichen Treiber der Mikrobiomstruktur sind. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie jeden Schritt standardisiert, von der Trennung von Wurzel und Rhizosphäre über die DNA-Extraktion bis hin zur Vorbereitung einer Sequenzierungsbibliothek.
Dieses Verfahren wird von Tuesday Simmons, einer Doktorandin im Coleman-Derr-Labor, demonstriert. Zu Beginn des Protokolls werden Bodenproben in großen Mengen mit einem ethanolsterilisierten Bodenkernsammler entnommen, um einen Boden zu erhalten, der frei von Pflanzenwurzeln ist. Sammle einen Kern etwa 23 bis 30 Zentimeter von der Basis der Pflanze entfernt.
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