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Die Wurzel Mikrobiom zu erkunden: Extrahieren von Bakteriengemeinschaft Daten aus dem Boden, die ...
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JoVE Journal Genetics
Exploring the Root Microbiome: Extracting Bacterial Community Data from the Soil, Rhizosphere, and Root Endosphere

Die Wurzel Mikrobiom zu erkunden: Extrahieren von Bakteriengemeinschaft Daten aus dem Boden, die Rhizosphäre und die Wurzel Endosphere

Full Text
28,430 Views
09:55 min
May 2, 2018

DOI: 10.3791/57561-v

Tuesday Simmons1, Daniel F. Caddell1, Siwen Deng1, Devin Coleman-Derr1,2

1Department of Plant and Microbial Biology,University of California, Berkeley, 2Plant Gene Expression Center,USDA ARS

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for obtaining amplicon sequence data from soil, rhizosphere, and root endosphere microbiomes. The method aims to characterize the composition and diversity of plant-associated microbial communities.

Key Study Components

Area of Science

  • Microbial Ecology
  • Plant-Microbe Interactions
  • Community Profiling

Background

  • The root microbiome consists of various compartments, including soil, rhizosphere, and root endosphere.
  • Understanding these compartments can reveal the factors influencing microbiome structure.
  • 16S ribosomal RNA gene profiling is a standard method for studying microbial communities.
  • This protocol standardizes the process from sample collection to sequencing library preparation.

Purpose of Study

  • To characterize the root microbiome across different compartments.
  • To investigate the drivers of microbiome structure.
  • To provide a standardized protocol for researchers.

Methods Used

  • Collection of bulk soil samples using an ethanol-sterilized soil core collector.
  • Sampling at a depth of 23 to 30 centimeters from the base of the plant.
  • Separation of root and rhizosphere for analysis.
  • DNA extraction and preparation of sequencing libraries.

Main Results

  • Standardized protocol facilitates consistent microbiome analysis.
  • Provides insights into the composition of plant-associated microbial communities.
  • Enables investigation of biotic and abiotic factors affecting microbiome structure.
  • Demonstrated by a graduate student in the Coleman-Derr Laboratory.

Conclusions

  • The protocol is suitable for a wide range of plant species.
  • It enhances understanding of microbial diversity in plant environments.
  • Future applications can expand knowledge in microbial ecology.

Frequently Asked Questions

What is the main goal of this protocol?
The main goal is to characterize the root microbiome across different compartments using community profiling.
How are soil samples collected?
Soil samples are collected using an ethanol-sterilized soil core collector at a depth of 23 to 30 centimeters from the base of the plant.
What method is used for community profiling?
The 16S ribosomal RNA gene is used for community profiling of the microbiome.
Who demonstrates the protocol?
The protocol is demonstrated by a graduate student in the Coleman-Derr Laboratory.
What are the advantages of this technique?
The technique standardizes each step from sample collection to DNA extraction and library preparation.
What can this research help to understand?
This research can help understand the composition and diversity of plant-associated microbial communities.

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Amplikons Sequenzdaten von Boden, Rhizosphäre und Wurzel Endosphere mikrobiome zu erhalten. Diese Informationen kann verwendet werden, um die Zusammensetzung und Vielfalt der Anlage verbundenen mikrobieller Gemeinschaften zu untersuchen, und eignet sich für den Einsatz mit einer Vielzahl von Pflanzenarten.

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, drei Kompartimente des Wurzelmikrobioms, des Bodens, der Rhizosphäre und der Wurzelendosphäre, unter Verwendung von Community-Profiling des ribosomalen 16S-RNA-Gens zu charakterisieren. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen der mikrobiellen Ökologie zu beantworten, wie z. B. die biotischen und abiotischen Faktoren, die die wesentlichen Treiber der Mikrobiomstruktur sind. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie jeden Schritt standardisiert, von der Trennung von Wurzel und Rhizosphäre über die DNA-Extraktion bis hin zur Vorbereitung einer Sequenzierungsbibliothek.

Dieses Verfahren wird von Tuesday Simmons, einer Doktorandin im Coleman-Derr-Labor, demonstriert. Zu Beginn des Protokolls werden Bodenproben in großen Mengen mit einem ethanolsterilisierten Bodenkernsammler entnommen, um einen Boden zu erhalten, der frei von Pflanzenwurzeln ist. Sammle einen Kern etwa 23 bis 30 Zentimeter von der Basis der Pflanze entfernt.

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