Unraveling Key Players of Humoral Immunity: Advanced and Optimized Lymphocyte Isolation Protocol from Murine Peyer's Patches

Yavuz F. Yazicioglu; Halil I. Aksoylar; Rinku Pal; Nikolaos Patsoukis; Vassiliki A. Boussiotis

doi:10.3791/58490

Entwirren Key Player der humoralen Immunität: erweiterte und optimierte Lymphozyten isoliert Prot...

JoVE Journal
Cancer Research

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Unraveling Key Players of Humoral Immunity: Advanced and Optimized Lymphocyte Isolation Protocol from Murine Peyer’s Patches

Entwirren Key Player der humoralen Immunität: erweiterte und optimierte Lymphozyten isoliert Protokoll von Murine Peyer Patches

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08:25 min

November 21, 2018

DOI: 10.3791/58490-v

Yavuz F. Yazicioglu^1,2, Halil I. Aksoylar^1,2, Rinku Pal^1,2, Nikolaos Patsoukis^1,2, Vassiliki A. Boussiotis^1,2

¹Division of Hematology-Oncology, Beth Israel Deaconess Medical Center,Harvard Medical School, ²Department of Medicine, Beth Israel Deaconess Medical Center,Harvard Medical School

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

In dieser Studie präsentieren wir eine neue und effektive Protokoll für die Isolierung von Lymphozyten aus Peyer Patches (PPs), die anschließend für in Vivo und in Vitro funktionelle Assays sowie Flow durchflusszytometrischen Studien des follikulären T verwendet werden können Helfer und germinal Center B-Zellen.

Diese Methode kann wichtige Fragen zum Phänotyp von Maus Peyers Patch isoliertt T und B Zellteilmengen beantworten. Insbesondere follikuläre T-Helfer und Keimzentrum B-Zellpopulationen. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie auf mehrere mühsame Vorbereitungsschritte wie kollagennasebasierte Verdauung verzichtet, die die Qualität und Identität der isolierten Lymphozyten beeinträchtigen.

Beginnen Sie, indem Sie eine Maus in die Supine-Position legen und den Bauch mit 70% Ethanol sterilisieren. Machen Sie einen Mittellinien-Bauchschnitt durch die Haut und Peritoneum von der Schambein bis zum Rippenkäfig, um die Peritinaalhöhle zu öffnen und das Cecum und die ileocecal Kreuzung zu lokalisieren. Machen Sie so distal wie möglich an der Kreuzung geschnitten, um den Dünndarm vom Cecum zu trennen.

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