Infektion von primären nasalen Epithelzellen, die an einer Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche gezüchtet wurden, zur Charakterisierung menschlicher Coronavirus-Wirt-Interaktionen

Die hier beschriebenen Protokolle befassen sich mit Schlüsselfragen wie der Replikationskinetik, dem Wirtszelltropismus, der Induktion des angeborenen Immunsystems und der Induktion der Zytotoxizität im Nasenepithel bei Infektionen mit humanen Coronaviren. Dieses Protokoll ermöglicht die Untersuchung der Interaktionen zwischen humanen Coronavirus-Wirten in einer organoiden Mikroumgebung, die die Merkmale des In-vivo-Nasenepithels, einschließlich seiner heterogenen Zellpopulation und mukoziliären Funktionen, genau rekapituliert. Diese Technik kann auf andere ALI-Kultursysteme angewendet werden, z. B. auf solche, die aus den unteren Atemwegen stammen.

Darüber hinaus kann das System verwendet werden, um klinische Krankheitszustände wie asthmatische oder Mukoviszidose-Atemwege nachzuahmen. Züchten und differenzieren Sie die nasale Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche (ALI-Kulturen) in Transwells mit einer basalen und einer apikalen Kammer. Expandieren Sie die dissoziierten menschlichen sinonasalen Zellen unter getauchten Bedingungen, und entfernen Sie anschließend das Medium aus der apikalen Kammer, um die Differenzierung der Kulturen in einer Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche zu ermöglichen.