El manguito de constricción se presenta en este artículo está diseñado para inducir a la aterosclerosis en la arteria carótida común murino. Debido a la forma cónica de su luz interior del manguito implantado genera regiones bien definidas de baja tensión, alta cizalla oscilatoria y activar el desarrollo de lesiones ateroscleróticas de los diferentes fenotipos inflamatorios.
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Artículo de método
Implantación de un manguito de la carótida para provocar esfuerzo cortante aterosclerosis inducida en ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
Es ampliamente aceptado que las alteraciones en la tensión de cizallamiento vascular activar la expresión de genes inflamatorios en las células endoteliales y por lo tanto inducen la aterosclerosis (revisado en 1 y 2). El papel de la tensión de corte ha sido ampliamente estudiado in vitro la investigación de la influencia de la dinámica de flujo en las células endoteliales cultivadas 1,3,4 e in vivo en animales de mayor tamaño y los seres humanos 1,5,6,7,8. Sin embargo, los pequeños modelos animales altamente reproducible que permita una investigación sistemática de la influencia del esfuerzo cortante en el desarrollo de la placa son poco frecuentes. Recientemente, Nam et al. 9 introducen un modelo de ratón en el que la ligadura de las ramas de la arteria carótida crea una región de bajo flujo y oscilatorio. Aunque este modelo hace que la disfunción endotelial y la formación rápida de las lesiones ateroscleróticas en ratones hiperlipidémicos, no se puede excluir que la respuesta inflamatoria observada es, al menos en parte, una consecuencia of endoteliales y / o daño de los vasos debido a la ligadura.
A fin de evitar estas limitaciones, un manguito de tensión de corte modificando ha sido desarrollado basándose en la dinámica de fluidos calculado, en forma de cono cuya luz interior fue seleccionado para crear regiones definidas de baja tensión, de corte alto y oscilante dentro de la arteria carótida común 10. Mediante la aplicación de este modelo en ratones knockout de apolipoproteína E (ApoE) alimentados con una dieta alta en colesterol de tipo occidental, las lesiones vasculares se producen aguas arriba y aguas abajo de la banda. Su fenotipo se correlaciona con la dinámica del flujo regional 11, confirmada por imágenes en vivo por resonancia magnética (MRI) 12: tensión de corte baja y laminar aguas arriba de la banda hace que la formación de placas extensas de un fenotipo más vulnerables, mientras que la oscilación descendente de la tensión de corte el manguito induce lesiones ateroscleróticas estables 11. En las regiones de alta tensión de corte y flujo laminar de alta dentro de la banda,por lo general no se observan las placas de ateroma.
En conclusión, el esfuerzo de corte, modificando el procedimiento del manguito es un método fiable quirúrgica para producir las lesiones ateroscleróticas fenotípicamente diferentes en los ratones deficientes en ApoE.
Protocolo
1. La preparación del modificador de esfuerzo cortante (puño)
- El modificador de esfuerzo cortante consta de dos mitades longitudinales de un cilindro con una luz en forma de cono. Las conchas están hechas de media polyetherketone termoplásticas producidas por un procedimiento de fundición de plástico. Los elementos de fundición se envían al mismo tiempo conectado al corredor. Por lo tanto, las conchas de la mitad tienen que ser cortada antes de su uso. Cada elenco contiene conchas medio de diferentes tamaños que van desde 150 m - 300 m (menor diámetro interior en el extremo de aguas abajo).
- La preparación del manguito debe real....
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Discusión
Con el fin de minimizar la variación experimental se recomienda trabajar con animales de casi la misma edad y con la historia misma dieta. Una investigación recientemente publicado demuestra que el modificador de esfuerzo cortante aplicado en ratones de tipo salvaje podría ser un buen modelo para la investigación de la disfunción endotelial y principios de la respuesta inflamatoria inducida por la alteración de la dinámica de flujo 13. Sin embargo, para la investigación de la placa aterosclerótica desarrollo .......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este estudio fue apoyado en parte por la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG), el proyecto de GZ PI 771/1-1, SFB 656 "Imagen Molecular Cardiovascular", Münster, Alemania (proyectos C6, Z2, B3, y PM3), la Unión Europea Red de Excelencia "de diagnóstico Imagen Molecular-DIMI "(WP 11.1 y 11.2). El estudio fue financiado en parte también por la Fundación Británica del Corazón, el Reino Unido.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Nombre | Empresa | Comentarios | |
| Modificador de esfuerzo cortante (polyetherketone) | Promolding BV http://promolding.nl | Los moldes son enviados al mismo tiempo conectado a los corredores. Por lo tanto, los elementos individuales tienen que ser cortada antes de su uso. |
Referencias
- Chiu, J. J., Chien, S. Effects of disturbed flow on vascular endothelium: pathophysiological basis and clinical perspectives. Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).
- Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. The role of shear stress in the pathogenesis of atheroscle....
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