Un ensayo para detectar el estallido oxidativo en los discos foliares de Arabidopsis tras la inmunitaria

0 visualizaciones • 2:58 min. • July 8th, 2025

Obtener discos foliares de Arabidopsis thaliana. Sumérjalos en pocillos de microplacas que contengan agua doblemente destilada para evitar la desecación.

Incube los discos para permitir la recuperación de la herida.

Después de la incubación, retire el agua. Agregue una mezcla de reacción que contenga péptidos derivados de bacterias, enzima peroxidasa de rábano picante y luminol.

Con un lector de microplacas, mida la luminiscencia a lo largo del tiempo.

Los receptores de reconocimiento de patrones, o PRR, en las células vegetales, se unen a los péptidos bacterianos, que son patrones moleculares asociados a microbios.

Además, el PRR se asocia con su correceptor, experimentando fosforilación mutua, activando proteínas quinasas similares a receptores y causando una afluencia de calcio intracelular.

Esto, a su vez, activa el homólogo de la oxidasa respiratoria transmembrana, o proteínas RBOH.

El RBOH activado cataliza la producción de especies reactivas de oxígeno extracelulares, o ROS, causando un estallido oxidativo. Además, ROS se convierte en peróxido de hidrógeno.

La peroxidasa de rábano picante utiliza peróxido de hidrógeno para oxidar el luminol en un estado excitado, emitiendo l

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