La detección precoz de la disfunción renal hemodinámico inducido por medicamentos Usando tecnología ecográfica en ratas

El objetivo general de este procedimiento es proporcionar una metodología ecográfica paso a paso para detectar la disfunción renal utilizando un modelo de rata de nefrotoxicidad inducida por fármacos. Esto se logra colocando primero la sonda de ultrasonido usando el sistema de rieles y aislando la aorta. A continuación, se ajusta el ángulo de la sonda para obtener una vista completa del riñón en el centro de la pantalla y la imagen en modo B se almacena utilizando la velocidad de fotogramas más alta posible.

A continuación, se abre la ventana acústica Doppler color para aislar la arteria renal y la vena renal. Por último, se utiliza la onda pulsada o la línea indicadora amarilla PW para evaluar el flujo en la arteria renal derecha y sinistore se utiliza para recoger los datos a la velocidad de fotogramas más alta posible. En última instancia, las imágenes de ultrasonido de alta resolución se utilizan para mostrar los cambios hemodinámicos en el riñón después de una lesión renal aguda inducida por cisplatino.

Este método puede responder a preguntas clave en el campo de la monitorización de la función renal, como los cambios hemodinámicos causados por una lesión renal. Aunque este método puede proporcionar información sobre la hemodinámica renal, también se puede aplicar a otros sistemas, como los modelos de ratón. El día 0, después de anestesiar a los animales según el protocolo de texto y aplicar ungüento para los ojos, use una cuchilla No.40 y crema depilatoria para eliminar el vello del pecho.

Mientras monitorea los signos vitales del animal, configure un sistema de ultrasonido MS250 de alta resolución con una frecuencia central de 21 MHz conectado al puerto activo y la aplicación preestablecida en el riñón. Coloque al animal anestesiado en posición supina en la plataforma y, utilizando el sistema de rieles, coloque la sonda de ultrasonido en la línea media del animal en un ángulo de 90 grados con respecto a la línea paraesternal izquierda que aísla la aorta. Desde esta posición, deslice la plataforma con el animal de modo que la sonda quede al nivel de la arteria renal izquierda o derecha.

Con los micromanipuladores, observe la arteria renal. A continuación, ajuste el ángulo de la sonda inclinándolo ligeramente a lo largo del eje Y de la sonda para obtener una vista completa del riñón en el centro de la pantalla. Una vez que se hayan obtenido imágenes de la pelvis renal y la arteria renal, almacene las imágenes utilizando la velocidad de fotogramas más alta permitida con la sonda utilizada.

A continuación, presione la tecla Doppler color en el teclado para encender la ventana acústica Doppler color. Asegúrese de que la profundidad de enfoque se encuentre en el centro del riñón. Utilice sinistore para registrar los datos a la velocidad de fotogramas más alta posible.

Para capturar imágenes en onda pulsada o vista PW, haga clic en la tecla PW para que aparezca una línea indicadora amarilla en la pantalla. Con la tecla de ángulo PW, coloque la línea amarilla en la arteria renal en un ángulo paralelo a la direccionalidad del flujo a través del vaso, asegurándose de que el ángulo Doppler sea inferior a 60 grados. En este modo, la ventana acústica se divide en secciones superior e inferior.

Utilice sinistore para capturar la imagen de las formas de onda que indican la velocidad del flujo arterial en la sístole máxima y la diástole. Después de la toma de imágenes, coloque al animal debajo de una lámpara de calefacción en un área de recuperación limpia en decúbito esternal. Monitoree continuamente los signos vitales del animal hasta que se recupere por completo de la anestesia antes de devolverlo al centro de alojamiento.

Veinticuatro horas después de la realización de las imágenes basales, administrar una inyección interperitoneal de 10 miligramos por kilogramo de cisplatino en una dosis única a los animales de tratamiento. Administrar solución salina normal a los animales de control. Siguiendo el cronograma que se muestra aquí, y mientras monitorea los signos vitales del animal, realice una ecografía como se muestra anteriormente en el video.

Llevar a cabo el análisis de datos de acuerdo con las directrices del protocolo de texto. Las imágenes presentadas en este estudio fueron tomadas por un solo operador y los datos de las imágenes fueron analizados por un solo investigador. Los resultados mostraron que los animales tratados con cisplatino tenían una creatinina sérica que oscilaba entre 0,5 y 2,1 en el día 6.

El nivel normal de creatinina es inferior a 1,1. Las imágenes ecográficas ofrecen una alta sensibilidad sobre los datos histológicos mostrados en los siguientes estudios. En el día 6, la histología mostró patrones consistentes de lesiones intersticiales agudas de los túbulos en los riñones tratados con cisplatino en comparación con los animales normales tratados con solución salina.

Utilizando imágenes de ultrasonido de alta resolución para medir los cambios hemodinámicos en el riñón, no hubo cambios en la morfología en los animales sin tratamiento con cisplatino entre el día 0 y el 6, mientras que la morfología del pulsus parvus se detectó en los animales tratados con cisplatino en el día 6. RI significa Índice Resistivo y PI significa Índice Pulsátil. Los límites superiores para RI e PI normales son 0,7 y 1,15, respectivamente, en ratas.

La medición de estos índices para evaluar los cambios hemodinámicos en el riñón, demostró un aumento significativo en ambos animales tratados con cisplatino en el día 6. Al intentar este procedimiento, es importante asegurarse de que el animal tenga signos vitales normales bajo anestesia. Tras su desarrollo, esta técnica abrió el camino a los investigadores en el campo de los cambios hemodinámicos de la ecografía renal tras una lesión renal aguda.

Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo obtener imágenes de un riñón utilizando un modelo animal pequeño de lesión renal aguda.