Name: Técnica robótica automatizada de dispensación de Orientación de la superficie de las células y Bioprinting (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 14 s
Description: Aprende una técnica robótica automatizada de dispensación para bioprinting con orientación topográfica celular. Este método permite controlar la distribución y comportamiento celular en hidrogeles para estudios de ingeniería biomédica.

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El trabajo presentado aquí está respaldado por la Fundación Nacional de Investigación de Singapur bajo el programa CREATE (NRF-Technion): La Iniciativa de Medicina Regenerativa en el Programa de Investigación de Terapia de Restauración Cardíaca y por la Financiación del Sector Público (PSF) 2012 del Consejo de Investigación de Ciencia e Ingeniería (SERC) bajo la Agencia para la Ciencia, Tecnología e Investigación (A*STAR).

NOTA: Este protocolo describe el uso de un sistema de dispensación asistida por robot (Figura 1A) de nuevo a la presión como un ataque químico de la superficie (Figura 1B) y bioprinter a base de extrusión (Figura 1C) 10. 1. Modificación de una superficie de poliestireno <ol><li> Utilice 1 hojas mm de poliestireno desde placas de cultivo tisular de poliestireno tienden a inclinarse hacia arriba en el centro, arruinando la consistencia altura tanto de grabado y de impresión. NOTA: Como las láminas de poliestireno no se modifican para la adhesión celular, se lleva a cabo tratamiento de plasma. </li><li> tratamiento con plasma de oxígeno. <ol><li> En primer lugar, seleccionar una presión de 2 bar en el regulador del cilindro de oxígeno conectada a la máquina de plasma. A continuación, cambie la máquina de plasma y la entrada de las siguientes condiciones en el panel de mandos de la máquina: 150 W, 30 SSCM de oxígeno, 10 min (para la energía, el flujo de gas y la hora, respectivamente). </li><li> Coloque el substrat de poliestirenoE en la cámara de plasma, sellar la puerta y pulse el botón de inicio en el panel de control. Remojar el sustrato de poliestireno tratada con plasma de oxígeno en suero bovino fetal y se incuba a 37 ° C durante 2 horas antes de lavar tres veces con fosfato 1x solución salina tamponada (PBS). </li></ol></li></ol> 2. Programación Patrones de impresión <ol><li> Utilizar el Programa para Primera atacar la superficie con una aguja o un bisturí. <ol><li> Cuando se utiliza una aguja, insertar una aguja textil 1,5 mm de diámetro (desde el interior con gran cuidado) en la boquilla de una jeringa de dispensación (ya sea 5 o 10 ml) hasta que se aprieta y se fija. Si se utiliza un bisturí, elegir un bisturí ronda manipulado de forma tal que se puede sujetar en el mecanismo de sujeción del brazo de la impresión. NOTA: El lápiz graba mejor que la hoja de bisturí patrones curvos. </li><li> La primera vez que se intenta crear un arreglo bioprinted, dibujar el patrón deseado en papel cuadriculado con ejes numerados para generar las coordenadas XY. Entonces yonput las coordenadas del dibujo grabado / bioprinted en el software de hoja de cálculo (Figura 2). NOTA: El &quot;patrón deseado&quot; puede ser de muchas formas, tales como lineal, en forma de S, o circular. La elección depende del modelo experimental requerido, tales como líneas paralelas lineales para la diferenciación de las MSC en cardiomiocitos como se ha demostrado aquí. La función de gráfico de dispersión permite la visualización del patrón de trama propuesta. </li><li> Abra el / la dispensación de software de impresión. Seleccionar &quot;Programa&gt; Agregar programa&quot; seguido de &quot;Edición&gt; Añadir punto&quot; para configurar el programa. Exportar el X y la coordenada y los valores obtenidos a partir de la hoja de cálculo en la impresión / software utilizando la dispensación de &quot;copiar y pegar&quot; función. </li><li> Calibrar la altura &quot;z&quot; del robot antes de cada ejecución con el fin de colocar la boquilla de lápiz / impresión sobre la superficie. <ol><li> En el / software de dispensación de impresión, seleccione la opción &quot;Robot&quot;, haga clic en &quot;Cambiar el modo y# 34; y habilitar la opción &quot;Modo de enseñanza&quot;. Una vez seleccionado, el software permite la función &quot;Jog&quot; del robot. </li><li> Para correr, primero inicializar el robot a su posición predeterminada mediante la selección de los siguientes comandos desde la barra de menú; &quot;Robot&gt; Inicializar Meca&quot;, a continuación, seleccione &quot;Robot&gt; Jog&quot;. Introducir los valores numéricos (en mm) en el &quot;X e Y&quot; ranuras requeridas para colocar el lápiz exactamente en el origen del patrón. </li><li> A continuación, introduzca un valor numérico (en mm) en la ranura para &quot;Z&quot; para colocar la boquilla de la aguja o la impresión en contacto con la superficie, pero no la flexión o sangría a la superficie. Este punto se designa como valor inicial &quot;Z&quot;. NOTA: La profundidad de cada ranura se puede variar fácilmente usando el Z-altura del sistema. Las ranuras de 40, 80, y 170 micras se demuestran a cortar en la superficie de 1 mm de espesor láminas de poliestireno (Figura 4 y Tabla 1). </li></ol></li><li> Seleccione la pde instrucciones rint para cada uno de los puntos de coordenadas, es decir, &quot;Inicio de la línea de dosificación&quot; para definir el primer punto y el inicio de impresión, &quot;línea de pase&quot; para designar los puntos intermedios y &quot;Fin de la línea de dosificación&quot; para indicar al robot para poner fin a la tirada. </li><li> Comunicar el programa al robot mediante la selección de los comandos de seguimiento de la barra de menú superior: &quot;Robot&gt; Enviar C &amp; T de datos&quot;. </li><li> Iniciar la marcha / impresión de grabado, cambiando el robot al modo &quot;Run&quot;. Para ello, selecciona &quot;Robot&gt; Modo de Cambio&gt; Cambiar el modo de funcionamiento&quot; en la barra de menú superior. </li><li> Iniciar el procedimiento de impresión pulsando el botón de &quot;inicio&quot; verde en la consola dispensador de robot. </li></ol></li></ol> 3. Preparación e impresión de gelatina que contienen células Bioink <ol><li> Disolver 2% de gelatina en medio esencial mínimo alfa Medio (aMEM) (suplementado con 10% de FBS y 2% de antibiótico / antimycotic) a 60 ° C durante 2 horas para preparar las soluciones bioink. </li><li> Precultivo la proteína roja fluorescente que expresan las células madre mesenquimales (RFP-MSC) a 70% de confluencia en 10 cm placas de cultivo de tejidos utilizando aMEM / 10% de SFB. Soltar las células unidas en suspensión eliminando el medio y el recubrimiento con una solución de 1x tripsina-EDTA durante 5 min a 37 ° C. </li><li> Sedimentar las células por centrifugación a 1000 xg durante 5 min y separar el sobrenadante. Resuspender el sedimento celular en 0,5 ml de PBS 1x y contar la densidad de células usando un hemocitómetro. </li><li> Después de permitir que la bioink se enfríe a temperatura ambiente, la mezcla suavemente en un volumen suficiente para la suspensión de RFP-MSC en el bioink para lograr una concentración final de 5 x 10 6 células ml-1. </li><li> Verter la bioink cojinete de células en una jeringuilla de impresión con la boquilla de sellado. Enfriar la jeringa cargada a 4 ° C con el fin de alcanzar una viscosidad imprimible. </li><li> Coloque la jeringa cargada en la automatizadasistema de dispensación robótico y conecte las líneas de presión de aire. Retire la jeringa Luer sello y adjuntar la boquilla de impresión. </li><li> Extruir la bioinks cellularized en líneas delgadas utilizando 0,05 MPa contrapresión, a las 5 mm / seg velocidad de escritura de una jeringa de 10 ml a través de un 27 G de aguja / boquilla (apretados recomienda más cilíndrica) sobre una superficie de la película de poliestireno, después de depositar previamente programada patrón descrito en el paso 2.1 para colocar el bioink cellularized en las ranuras pre-grabadas. </li><li> Después de 1 hora de incubación a temperatura ambiente, añadir 10 ml de medio de crecimiento (suplementado con 10% de FBS y antibióticos) y se incuban las células durante 24 horas (para permitir que las células para detectar y reaccionar a las características grabadas al agua fuerte) antes de ver usando un microscopio de fluorescencia invertido un aumento de 10x. </li></ol>

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Los autores declaran que no tienen ningún interés financiero contrapuesto.

El paso fundamental de este procedimiento es la entrega bioprinting real de las células madre ya que el proceso debe permitir la sedimentación de células a las características, imprimir sin bioink difusión / sangrado, entregar las células sin la muerte celular esfuerzo de corte y no desencadenar la diferenciación hacia el linaje no deseado. Si la alineación de celdas esperado no se produce, entonces la viscosidad bioink, se debe evaluar su idoneidad para la impresión. Es importante que la bi...

El patrón deliberada de colocación celular permite la formación de las culturas que imitan in vivo organización celular 1. De hecho, la investigación sobre la interacción entre múltiples tipos de células puede ser asistido por la organización de su situación espacial 2,3. La mayoría de los sistemas de modelado se basan en procedimientos de modificación de superficie para promover o prevenir la adhesión celular con la deposición de células pasiva posterior. Bioprinting ofrece un control espacial y temporal sobre la distribución de la celda 1. Además de estas funciones, bioprinting ha sido descrita como un método técnicamente sencilla, rápida y rentable para la generación de andamios geométricamente complejas 4. Se utiliza el software de diseño por ordenador y permite la introducción de células en el proceso de fabricación 4. Sistemas Bioprinting se han clasificado sobre la base de sus principios de trabajo como el láser basados, a base de inyección de tinta o de extrusión de base 4. Bioprinting de extrusión ha sido descrito como el más prometedor, ya que permite la fabricación de construcciones organizadas de tamaños clínicamente relevantes dentro de un marco de tiempo realista 4-6. Se lleva a cabo por cualquiera de presión mecánica o la parte posterior de extrusión asistida de un hidrogel bioink cojinete celular. En el método que aquí se presenta, se empleó la contrapresión. Como se ha mencionado, las células se entregan en un bioink citocompatible. Tal bioink debe apoyar la entrega de las células sin producir tensión de corte deletérea, y ser de una viscosidad suficiente para mantener la integridad de la huella impresa, sin colapsar o propagar (referido como &quot;corrimiento de la tinta&quot;) 7-10. La interacción de las células con su superficie adherente se sabe que influyen en el comportamiento celular. La topografía de la superficie se puede controlar la forma de la célula, la orientación 11, e incluso el fenotipo. En particular, la fabricación de ranuras y canales se han demostrado para inducirun estirado, morfología alargada en múltiples tipos de células. La adopción de esta morfología se ha encontrado para influir en el fenotipo de las células multipotentes y pluripotentes. Por ejemplo, cuando se alinea en ranuras, las células madre mesenquimales (MSC) mostrar evidencia de diferenciación hacia cardiomiocitos 12,13 y células musculares lisas vasculares adoptar el fenotipo contráctil sobre el sintético 10,14-17. La célula de la alineación de canales o ranuras puede ser generada en una superficie polimérica a través de una serie de métodos, por ejemplo, en el fondo de ataque químico iónico reactivo, la litografía por haz de electrones, la impresión láser directa, láser de femtosegundo, fotolitografía y grabado en seco plasma 18. Estos enfoques son a menudo mucho tiempo, requieren un aparato complejo y puede ser limitante en la forma del patrón generado. Además, no se sincroniza con el patrón bioprinting y no permiten cellularization inmediata. El movimiento coordinadamente controlada de un automatizadosistema de dispensación puede seguir patrones complejos para la deposición de soluciones. Aquí demostramos cómo el movimiento microescala controlado puede ser explotada para crear canales para la orientación de la celda. Un lápiz o escalpelo afilado se encuentra junto a la cabeza de impresión en lugar de la jeringa de extrusión y el equipo se pueden grabar la superficie del polímero bajo la dirección del software de trazado. El método ofrece versatilidad en el diseño patrón y es aplicable a materiales poliméricos usados ​​comúnmente en la bioingeniería, tales como poliestireno, PTFE, y policaprolactona. Como paso posterior al ataque químico, las células pueden bioprinted directamente a las ranuras rayados. El bioink gelatina utilizada aquí fue capaz de mantener tanto la traza y permitir que las células depositadas al sentido las características grabadas. Las células madre mesenquimales bioprinted a las ranuras grabadas se demostraron para alargar lo largo de ellos en líneas distintas.

<table><tbody><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de dispensación robótico</td><td>Janome</td><td>2300N</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de plasma</td><td>Femto Science</td><td>Covance</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio USB Microscopio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>óptico</td><td>Olympus</td><td>IX71</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td> Empresa</td><td>Número de catálogo</td><td>Comentarios</td></tr><tr><td>SoftwareHoja de</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>cálculo</td><td>Excel</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Excel Impresión Excel Software de coordenadas</td><td>Janome</td><td>JR C-Points</td><td></td></tr><tr><td>Software de imagen</td><td>Institutos Nacionales de Salud (NIH)</td><td>ImageJ</td><td></td></tr><tr><td>Nombre</td><td>Compañía</td><td>Número de catálogo</td><td>Comentarios</td></tr><tr><td>Equipo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stylus (Blade)</td><td>OLFA</td><td>AK-5</td><td></td></tr><tr><td>5 ml jeringa de impresión</td><td>San-ei Tech</td><td>SH10LL-B</td><td></td></tr><tr><td>30 G aguja</td><td>de impresión San-ei Tech</td><td>SH30-0.25-B</td><td></td></tr><tr>Hojas <td></td> de<td>poliestireno de 1 mm</td><td>Comprado localmente</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>10270-098</td><td></td></tr><tr>Gelatina <td>Invitrogen</td><td></td><td></td><td>salina tamponada con fosfato</td></tr><tr><td>de piel porcina, fuerza de gel 300, Tipo A</td><td>Sigma Aldrich</td><td>9000-70-8</td><td></td></tr><tr><td>&alpha; MEM</td><td>Invitrogen</td><td>41061-029</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotc antimicótico</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A5955-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Células madre mesenquimales de proteína fluorescente roja (RFP-MSCs)</td><td>Cyagen Biosciences Incorporación</td><td>RASMX-01201</td><td></td></tr></tbody></table>

técnica robótica automatizada de dispensación de orientación de la superficie de las células y bioprinting

Automated Robotic Dispensing Technique for Surface Guidance and Bioprinting of Cells

Este manuscrito describe la introducción de características de orientación celular seguido de la entrega directa de las células de estas características en un bioink hidrogel usando un sistema de dispensación robótico automatizado. Se seleccionó la bioink particular, ya que permite que las células se sedimentan hacia y detectan las características. El sistema de distribución bioprints células viables en bioinks de hidrogel utilizando un cabezal de impresión contrapresión asistida. Sin embargo, mediante la sustitución de la cabeza de impresión con un lápiz o un bisturí afilado, el sistema de dispensación puede también ser empleado para crear señales topográficas a través de ataque químico de la superficie. El movimiento de la aguja se puede programar en pasos de 10 micras en los ejes X, Y y Z. Las ranuras estampadas fueron capaces de orientar las células madre mesenquimales, influir en ellos para adoptar una morfología alargada en alineación con la dirección de las ranuras. El patrón podría ser diseñado utilizando software de trazado de líneas rectas, círculos concéntricos, y las ondas sinusoidales. En un procedimiento posterior, fibroblastos y células madre mesenquimales se suspendieron en un bioink gelatina 2%, para bioprinting en una contrapresión impulsado cabezal de impresión de extrusión. El bioink rodamiento celular a continuación, se imprime usando las mismas coordenadas programadas utilizados para el grabado. Las células bioprinted fueron capaces de detectar y reaccionar a las características grabadas como se demuestra por su orientación alargada a lo largo de la dirección de las ranuras grabadas.

Los resultados representativos demuestran que el sistema de dispensación robótica asistida contrapresión se puede utilizar como un bioprinter a base de extrusión para llevar a cabo tanto de ataque químico de la superficie y la impresión bioink (Figura 1 A). Se puede utilizar para la generación de ranuras grabadas en superficies de polímero, y para imprimir posteriormente un bioink cojinete célula directamente a las características (Figura 1 B y C). <...

Este protocolo describe una metodología de bioimpresión que utiliza un sistema de depósito robótico automatizado que incorpora señales de guía topográficas grabadas con la deposición de precisión de una célula que contiene biotinta de hidrogel. Las células impresas se entregan directamente a las características grabadas y son capaces de detectar y orientarse con ellas.

Técnica robótica automatizada de dispensación de Orientación de la superficie de las células y Bioprinting

This manuscript describes the introduction of cell guidance features followed by the direct delivery of cells to these features in a hydrogel bioink using ...

El objetivo general de esta técnica automatizada de dispensación robótica consiste en crear una superficie para la guía topográfica de células y luego entregar células a estas características siguiendo un patrón programado, lo que permite controlar el comportamiento y la distribución celular. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la ingeniería biomédica, como la forma en que las topologías de superficie pueden afectar el comportamiento celular, tanto en monocultivo como en co-cultivo. La principal ventaja de esta técnica es que requiere menos tiempo para programar e imprimir el patrón de guía celular en comparación con métodos más establecidos.También incluye un paso de entrega celular para dispensación controlada. Tuvimos la idea de este método cuando nos dimos cuenta de que los patrones 2D de células depositadas en hidrogeles podrían beneficiarse de la orientación de la superficie. Por ello, desarrollamos esta técnica para imprimir hidrogeles de manera que coincidiera con las características de la superficie.Este protocolo describe el uso de un sistema robótico de dispensación asistido por presión inversa como biopresora basada en grabado de superficies y extrusión. Para preparar una superficie de poliestireno para el grabado e impresión, seleccione una lámina de poliestireno de un milímetro de espesor. Las láminas más gruesas se deformarán más.Luego, trate la lámina con plasma de oxígeno. Ajuste el regulador de gas oxígeno a dos bares. A continuación, encienda la máquina de plasma y active la bomba de vacío.Proceda a programar la máquina para 150 vatios y un flujo de gas oxígeno de 30 centímetros cúbicos estándar por minuto, y exponga la lámina a estas condiciones durante 10 minutos. Luego, evacúe la cámara, cierre la puerta y comience el ciclo. A continuación, sumerja la lámina tratada en suero bovino fetal puro e incúbele a 37 grados Celsius durante dos horas con agitación.Después del tratamiento con suero, lave la lámina tres veces con PBS 1X y esterilice la lámina. Después del último lavado, deje la lámina en un horno a 37 grados Celsius para que se seque durante la noche, aproximadamente 12 horas. Primero prepare un estilete de impresión para el grabado.Con mucha precaución, inserte una aguja textil de 1,5 milímetros de diámetro en la boquilla de una jeringa dispensadora hasta que quede encajada y asegurada. Cuando intente crear por primera vez un arreglo bioprintado, dibuje el patrón deseado en un papel cuadriculado con ejes numerados para generar las coordenadas x, y. Luego ingrese las coordenadas del patrón en una hoja de cálculo.A continuación, en el software de impresión, seleccione Programa, Agregar programa, seguido de Editar, Agregar punto para establecer el programa. Luego, copie los valores de las coordenadas x e y de la hoja de cálculo al software de dispensación de impresión. Antes de cada ejecución, calibre la altura z del robot para ajustar la posición de contacto del estilete.Primero, seleccione la opción Robot. Luego, haga clic en Cambiar modo y active la opción Modo de enseñanza. Esto habilita la función JOG del robot.Para mover el robot manualmente, primero coloque el robot en su posición predeterminada seleccionando Robot, Meca Inicializar. Luego, seleccione Robot, Mover Manualmente. A continuación, en los campos x e y, ingrese la distancia en milímetros necesaria para colocar el estilete exactamente en el origen del patrón.Luego, también en milímetros, introduzca un valor numérico en la ranura z para colocar el estilete o la boquilla en contacto con la superficie sin flexionarla ni hundirla. Esto se designa como el valor inicial de z. La profundidad de cada surco puede variarse utilizando la altura z.Por ejemplo, las ranuras cortadas podrían tener una profundidad de 40, 80 o 170 micrones. Se requiere concentración y una observación cuidadosa para encontrar un punto de contacto en el que no haya flexión del estilete ni indentación visible en la superficie. Para garantizar el éxito, recomendamos preparar varias láminas y ejecutar el programa a diferentes alturas en z para hallar la posición inicial ideal.El siguiente paso consiste en definir la instrucción de impresión para cada uno de los puntos de coordenadas. Utilice la dispensación al inicio de la línea para definir el primer punto y la iniciación de la impresión. Utilice el paso de línea para designar los puntos intermedios y, finalmente, utilice la dispensación al final de la línea para indicarle al robot que finalice la impresión.Para comunicar el programa al robot, seleccione Robot, Enviar datos de C&T. Luego, inicie la ejecución seleccionando Robot, Cambiar modo, Cambiar al modo de ejecución y cambie la configuración a Ejecutar. Finalmente, comience la impresión.Para preparar el bioink, disuelva 2% de gelatina en MEM alfa suplementado con 10% de SFB y 2% de antibiótico antimicótico. Coloque el medio a 60 grados Celsius durante dos horas para permitir que la gelatina se disuelva en el medio. Cultive las células para el bioink hasta alcanzar una confluencia del 70% en placas de 10 centímetros.Pueden utilizarse cualquier tipo de células que respondan a características de orientación en la superficie, y deben expresar una etiqueta fluorescente para que puedan observarse durante el proceso de inclusión. Libere las células adheridas en suspensión eliminando el medio, lavando las células con PBS y recubriendo las células con una solución de tripsina-EDTA 1X durante cinco minutos a 37 grados Celsius. Después de neutralizar la tripsina con medio, recolecte las células en suspensión y péletelas a 1.000 g durante cinco minutos.Describa el sobrenadante y re-suspenda las células en 0,5 mililitros de medio. Después de medir la densidad celular, mezcle la suspensión con la solución de biotinta enfriada para obtener una solución con cinco millones de células por mililitro. A continuación, vierta la biotinta cargada con células en una jeringa de impresión preparada y bloqueada con una tapa tipo conector.Enfríe la jeringa cargada a cuatro grados Celsius para alcanzar una viscosidad adecuada para imprimir. Luego, retire la jeringa cargada y enfriada, quite la tapa de la jeringa y coloque la boquilla de impresión. A continuación, inserte la jeringa cargada en el sistema de dispensación y conéctela a las líneas de presión de aire.Para imprimir la biotinta sobre el patrón previamente diseñado, es necesario que los bordes y las líneas sean nítidos. La impresión precisa se logra mediante la optimización de la presión posterior del dispensador y del calibre de la aguja del cabezal de impresión. Establezca la presión posterior del dispensador en 0,05 megapascales para una jeringa de 10 mililitros con una aguja cónica de calibre 34.Luego, en el software, configure la velocidad de escritura a cinco milímetros por segundo sobre una superficie de película de poliestireno. Ahora, siguiendo el patrón programado, deposite la biotinta celularizada sobre las ranuras previamente grabadas. Después de depositar las células, deje que la lámina incube durante 20 minutos a temperatura ambiente.Posteriormente, cubra el andamiaje celular impreso con el medio de crecimiento adecuado e incube las células durante 24 horas para permitir que se adhieran antes de continuar con experimentos adicionales. Las células madre sembradas mediante bioprintado dentro de la bio-tinta finalmente sedimentaron sobre la superficie y detectaron, alargándose a lo largo de la dirección de las líneas grabadas discretamente. Las células sembradas en medio de cultivo sin bioprintado también se alinearon en la dirección de las estructuras.Sin embargo, también cubrieron toda la superficie, por lo tanto, la bio-tinta restringió las células al trazo impreso. Cuando se sembraron sobre láminas sin las características grabadas, las células no mostraron ninguna orientación ni alineación. Después de ver este video, deberías tener una buena comprensión de cómo grabar con precisión surcos en la lámina de poliestireno y luego bioprintar células dentro de los surcos con precisión.Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en aproximadamente de dos a tres horas. Es muy útil para investigadores en el campo de la bioingeniería para exponer interacciones en la superficie celular en modelos donde se requiere anisotropía y posicionamiento celular. No olvide que la bio-tinta contiene células vivas y es muy importante utilizar una técnica estéril al imprimir las láminas.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

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Se presenta un protocolo para la impresión robótica de esferoides de células cancerosas en un formato de placa de 96 pocillos de alto rendimiento utilizando un sistema acuoso de dos fases.

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Aquí, describimos la producción a gran escala de esferoides estromales /células madre (ASC) derivados de tejido adiposo utilizando un sistema de pipeteo automatizado para sembrar la suspensión celular, asegurando así la homogeneidad del tamaño y la forma del esferoide. Estos esferoides ASC se pueden utilizar como bloques de construcción para enfoques de bioimpresión 3D.

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