Name: Acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina aumenta la eficacia del pulmón Orthotopic Engraftment de la célula de cáncer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: Aprende a aumentar la eficiencia del trasplante de células de cáncer de pulmón en ratones mediante el acondicionamiento previo de las vías respiratorias con bleomicina. Este método permite modelar diversos subtipos de cáncer.

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Este estudio fue financiado por becas del Instituto Nacional del cáncer (R01CA166376 y R01CA191489 a D.X. Nguyen) y el Departamento de defensa (W81XWH-16-1-0227 a D.X. Nguyen).

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2015%5BTitle%5D)+AND+%22CA-Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2015.</a> CA-Cancer J Clin. 65, 5-29 (2015).</li>
<li>Gaspar, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+metastases+in+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Anticanc%22%5BJournal%5D)">Brain metastases in lung cancer.</a> Expert Rev Anticanc. 4, 259-270 (2004).</li>
<li>Hess, K. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16518827">Metastatic patterns in adenocarcinoma.</a> Cancer. 106, 1624-1633 (2006).</li>
<li>Hoffman, P. C., Mauer, A. M., Vokes, E. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10841143">Lung cancer.</a> Lancet. 355, 479-485 (2000).</li>
<li>Travis, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chest+Med%22%5BJournal%5D)">Pathology of lung cancer.</a> Clin Chest Med. 23 (1), 65-81 (2002).</li>
<li>Chen, Z., Fillmore, C. M., Hammerman, P. S., Kim, C. F., Wong, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-small-cell+lung+cancers%3A+a+heterogeneous+set+of+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Non-small-cell lung cancers: a heterogeneous set of diseases.</a> Nat Rev Cancer. 14, 535-546 (2014).</li>
<li>Kim, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+human+non-small-cell+lung+cancer%3A+raising+the+bar%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Sym%22%5BJournal%5D)">Mouse models of human non-small-cell lung cancer: raising the bar.</a> Cold Spring Harb Sym. 70, 241-250 (2005).</li>
<li>Meuwissen, R., Berns, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+for+human+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Dev%22%5BJournal%5D)">Mouse models for human lung cancer.</a> Gene Dev. 19, 643-664 (2005).</li>
<li>Junttila, M. R., de Sauvage, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+tumour+micro-environment+heterogeneity+on+therapeutic+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Influence of tumour micro-environment heterogeneity on therapeutic response.</a> Nature. 501, 346-354 (2013).</li>
<li>Nguyen, L. V., Vanner, R., Dirks, P., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells%3A+an+evolving+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells: an evolving concept.</a> Nat Rev Cancer. 12, 133-143 (2012).</li>
<li>Minchinton, A. I., Tannock, I. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16862189">Drug penetration in solid tumours.</a> Nat Rev Cancer. 6, 583-592 (2006).</li>
<li>Leblond, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+cell+therapy+techniques+for+respiratory+disease%3A+intratracheal+delivery+of+genetically+engineered+stem+cells+in+a+murine+model+of+airway+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Developing cell therapy techniques for respiratory disease: intratracheal delivery of genetically engineered stem cells in a murine model of airway injury.</a> Hum Gene Ther. 20, 1329-1343 (2009).</li>
<li>Vaughan, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lineage-negative+progenitors+mobilize+to+regenerate+lung+epithelium+after+major+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lineage-negative progenitors mobilize to regenerate lung epithelium after major injury.</a> Nature. 517, 621-625 (2015).</li>
<li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((p63%28%2B%29Krt5%28%2B%29+distal+airway+stem+cells+are+essential+for+lung+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">p63(+)Krt5(+) distal airway stem cells are essential for lung regeneration.</a> Nature. 517, 616-620 (2015).</li>
<li>Mahoney, J. E., Kim, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tracing+the+potential+of+lung+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Tracing the potential of lung progenitors.</a> Nat Biotechnol. 33, 152-154 (2015).</li>
<li>Wang, D., Morales, J. E., Calame, D. G., Alcorn, J. L., Wetsel, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+alveolar+epithelial+type+II+cells+abrogates+acute+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Transplantation of human embryonic stem cell-derived alveolar epithelial type II cells abrogates acute lung injury in mice.</a> Mol Ther. 18, 625-634 (2010).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 100, 8407-8411 (2003).</li>
<li>Suzuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+the+size+of+central+fibrosis+in+peripheral+adenocarcinoma+of+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of the size of central fibrosis in peripheral adenocarcinoma of the lung.</a> Ann Thorac Surg. 69, 893-897 (2000).</li>
<li>Cancer Genome Atlas Research, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+molecular+profiling+of+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Comprehensive molecular profiling of lung adenocarcinoma.</a> Nature. 511, 543-550 (2014).</li>
<li>Scotton, C. J., Chambers, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bleomycin+revisited%3A+towards+a+more+representative+model+of+IPF%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Lung+C%22%5BJournal%5D)">Bleomycin revisited: towards a more representative model of IPF?</a> Am J Physiol-Lung C. 299, L439-L441 (2010).</li>
<li>Hay, J., Shahzeidi, S., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+bleomycin-induced+lung+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of bleomycin-induced lung damage.</a> Arch Toxicol. 65, 81-94 (1991).</li>
<li>Vaccaro, C. A., Brody, J. S., Snider, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+wall+basement+membranes+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Alveolar wall basement membranes in bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> Am Rev Respir Dis. 132, 905-912 (1985).</li>
<li>Venkatesan, N., Ebihara, T., Roughley, P. J., Ludwig, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+large+and+small+proteoglycans+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Resp+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Alterations in large and small proteoglycans in bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats.</a> Am J Resp Crit Care. 161, 2066-2073 (2000).</li>
<li>Moore, B. B., Hogaboam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+models+of+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Lung+C%22%5BJournal%5D)">Murine models of pulmonary fibrosis.</a> Am J Physiol-Lung C. 294, L152-L160 (2008).</li>
<li>Izbicki, G., Segel, M. J., Christensen, T. G., Conner, M. W., Breuer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+bleomycin-induced+lung+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Time course of bleomycin-induced lung fibrosis.</a> Int J Exp Pathol. 83, 111-119 (2002).</li>
<li>Schrier, D. J., Phan, S. H., McGarry, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+the+nude+%28nu%2Fnu%29+mutation+on+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.+A+biochemical+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">The effects of the nude (nu/nu) mutation on bleomycin-induced pulmonary fibrosis. A biochemical evaluation.</a> Am Rev Respir Dis. 127, 614-617 (1983).</li>
<li>Ponomarev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+triple-modality+reporter+gene+for+whole-body+fluorescent%2C+bioluminescent%2C+and+nuclear+noninvasive+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+I%22%5BJournal%5D)">A novel triple-modality reporter gene for whole-body fluorescent, bioluminescent, and nuclear noninvasive imaging.</a> Eur J Nucl Med Mol I. 31, 740-751 (2004).</li>
<li>Morten, B. C., Scott, R. J., Avery-Kiejda, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Three+Different+Methods+for+Determining+Cell+Proliferation+in+Breast+Cancer+Cell%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Comparison of Three Different Methods for Determining Cell Proliferation in Breast Cancer Cell.</a> J. Vis. Exp. , (2016).</li>
<li>Tseng, J. C., Kung, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+bioluminescence+imaging+of+mouse+tumor+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+protocols%22%5BJournal%5D)">Quantitative bioluminescence imaging of mouse tumor models.</a> Cold Spring Harbor protocols. , pdb prot078261 (2015).</li>
<li>Byrne, F. L., McCarroll, J. A., Kavallaris, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyses+of+Tumor+Burden+In+Vivo+and+Metastasis+Ex+Vivo+Using+Luciferase-Expressing+Cancer+Cells+in+an+Orthotopic+Mouse+Model+of+Neuroblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Analyses of Tumor Burden In Vivo and Metastasis Ex Vivo Using Luciferase-Expressing Cancer Cells in an Orthotopic Mouse Model of Neuroblastoma.</a> Methods Mol Biol. 1372, 61-77 (2016).</li>
<li>Parkinson, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+necropsy+and+selected+tissue+and+sample+collection+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Diagnostic necropsy and selected tissue and sample collection in rats and mice.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li>
<li>Tammela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Wnt-producing+niche+drives+proliferative+potential+and+progression+in+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A Wnt-producing niche drives proliferative potential and progression in lung adenocarcinoma.</a> Nature. 545, 355-359 (2017).</li>
<li>DuPage, M., Dooley, A. L., Jacks, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+mouse+lung+cancer+models+using+adenoviral+or+lentiviral+delivery+of+Cre+recombinase%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Conditional mouse lung cancer models using adenoviral or lentiviral delivery of Cre recombinase.</a> Nat Protoc. 4, 1064-1072 (2009).</li>
<li>Byrne, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interrogating+open+issues+in+cancer+precision+medicine+with+patient-derived+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Interrogating open issues in cancer precision medicine with patient-derived xenografts.</a> Nat Rev Cancer. 17, 254-268 (2017).</li>
<li>Nguyen, D. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WNT%2FTCF+signaling+through+LEF1+and+HOXB9+mediates+lung+adenocarcinoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">WNT/TCF signaling through LEF1 and HOXB9 mediates lung adenocarcinoma metastasis.</a> Cell. 138, 51-62 (2009).</li>
<li>Raghu, G., Nyberg, F., Morgan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+interstitial+lung+disease+and+its+association+with+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Brit+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of interstitial lung disease and its association with lung cancer.</a> Brit J Cancer. 91, Suppl 2. S3-S10 (2004).</li>
<li>Hubbard, R., Venn, A., Lewis, S., Britton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+and+cryptogenic+fibrosing+alveolitis.+A+population-based+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Resp+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Lung cancer and cryptogenic fibrosing alveolitis. A population-based cohort study.</a> Am J Resp Crit Care. 161, 5-8 (2000).</li>
<li>Nagai, A., Chiyotani, A., Nakadate, T., Konno, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+in+patients+with+idiopathic+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Tohoku+J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Lung cancer in patients with idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Tohoku J Exp Med. 167, 231-237 (1992).</li>
<li>Rock, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+stromal+populations+contribute+to+pulmonary+fibrosis+without+evidence+for+epithelial+to+mesenchymal+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Multiple stromal populations contribute to pulmonary fibrosis without evidence for epithelial to mesenchymal transition.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 108, E1475-E1483 (2011).</li>
<li>Saito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+after+surgery+for+pathologic+stage+IA+non-small+cell+lung+cancer+associated+with+idiopathic+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Survival after surgery for pathologic stage IA non-small cell lung cancer associated with idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Ann Thorac Surg. 92, 1812-1817 (2011).</li>
<li>Stevens, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+Matrix+Receptor+Expression+in+Subtypes+of+Lung+Adenocarcinoma+Potentiates+Outgrowth+of+Micrometastases%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Extracellular Matrix Receptor Expression in Subtypes of Lung Adenocarcinoma Potentiates Outgrowth of Micrometastases.</a> Cancer Res. 77, 1905-1917 (2017).</li>
<li>Harrison, J. H., Lazo, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+dose+continuous+infusion+of+bleomycin+in+mice%3A+a+new+model+for+drug-induced+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">High dose continuous infusion of bleomycin in mice: a new model for drug-induced pulmonary fibrosis.</a> J Pharmacol Exp Ther. 243, 1185-1194 (1987).</li>
<li>Shcherbo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+far-red+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Bright far-red fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Nature Methods. 4, 741-746 (2007).</li>
<li>Aso, Y., Yoneda, K., Kikkawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+and+biochemical+study+of+pulmonary+changes+induced+by+bleomycin+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Morphologic and biochemical study of pulmonary changes induced by bleomycin in mice.</a> Lab Invest. 35, 558-568 (1976).</li>
<li>Kim, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bronchioalveolar+stem+cells+in+normal+lung+and+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification of bronchioalveolar stem cells in normal lung and lung.</a> Cell. 121, 823-835 (2005).</li>
<li>Fichtner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+non-small+cell+lung+cancer+xenografts+as+models+for+the+identification+of+predictive+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenografts as models for the identification of predictive biomarkers.</a> Clin Cancer Res. 14, 6456-6468 (2008).</li>
<li>Zhang, X. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+non-small+cell+lung+cancer+xenograft+models+with+genetic+aberrations+within+EGFR%2C+KRAS+and+FGFR1%3A+useful+tools+for+preclinical+studies+of+targeted+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenograft models with genetic aberrations within EGFR, KRAS and FGFR1: useful tools for preclinical studies of targeted therapies.</a> J Transl Med. 11, 168(2013).</li>
</ol>

Los autores no declaran a intereses financieros en competencia.

Sorprendentes paralelismos clínicos han documentado entre cáncer de pulmón y otras enfermedades crónicas del pulmón36. En particular, los pacientes con fibrosis pulmonar idiopática (IPF) tienen una predilección mayor para desarrollar cáncer de pulmón, y esta asociación es independiente de fumar historia37,38. IPF se caracteriza por la destrucción progresiva de la arquitectura pulmonar y deterioro de la función respiratorio a través de la d...

Cáncer de pulmón es la principal causa del cáncer relacionadas con las muertes en todo el mundo1. Pacientes con cáncer de pulmón eventualmente sucumban de metástasis a órganos distantes, en particular para el sistema nervioso central, hígado, glándulas suprarrenales y huesos2,3,4. Tumores malignos torácicos han sido tradicionalmente clasificadas como cáncer de pulmón de células pequeñas (CPCP) o de células no pequeñas lung cancer (NSCLC)5. NSCLC es el más frecuentemente diagnosticado malignidad y puede subdividirse en diferentes subtipos histológicos, como el adenocarcinoma de pulmón (LUAD) y pulmón carcinoma de células escamosas (LUSC)6. Análisis genómico del cáncer de pulmón primario humano resecado ha revelado que los tumores dentro de un determinado histotype también pueden expresar diversas perturbaciones moleculares, contribuyendo a su evolución clínica divergente y confusión paciente pronóstico aún más. La notable heterogeneidad del cáncer de pulmón representa un desafío significativo al diseño racional, pruebas preclínicas y aplicación de estrategias terapéuticas eficaces. Por lo tanto, hay que ampliar el repertorio de modelos de cáncer de pulmón experimental manejable para estudiar los orígenes celulares diversos subtipos moleculares y etapas de esta enfermedad.
Diversos enfoques usando los modelos animales han sido empleados para el estudio de pulmón cáncer en vivo, cada uno con sus ventajas y desventajas dependiendo de las preguntas biológicas de interés. Modelos de ratón modificados genéticamente (GEMMs) pueden dirigirse a alteraciones genéticas específicas en un tipo de célula progenitora dado, resultante en tumores que progresan en un anfitrión inmunocompetente7. Aunque extremadamente potente y clínicamente relevantes, la morbosidad de tumor latencia, variabilidad o pulmón asociada GEMMs puede ser prohibitiva para algunas mediciones cuantitativas y la detección de metástasis de etapa tardía en órganos distantes8. Un enfoque complementario es el uso de modelos de aloinjerto, por el que las células cancerosas de pulmón, ya sea directamente de un tumor de ratón obtenidos o derivados primero como las líneas celulares establecidas en la cultura, son nuevamente introducidas en anfitriones syngeneic. Análogamente, xenoinjertos de cáncer de pulmón se establecen de líneas celulares humanas o muestras tumorales derivados pacientes. Xenoinjertos de línea celular humana o xenoinjertos paciente derivadas (PDXs) se mantienen generalmente en ratones inmunodeprimidos y por lo tanto excluye de vigilancia inmune completa9. A pesar de este inconveniente, que proporcionan una vía para propagar limitando cantidades de humanos hay y estudio fundamental en vivo propiedades de las células de cáncer en humanos, que codifican para aberraciones genómicas más complejas que los tumores GEMM.
Una propiedad útil de aloinjertos y xenoinjertos es que son susceptibles a la tradicional limitación celular dilución ensayos, empleados para cuantificar la frecuencia del tumor iniciar células (TICs) dentro de una población de células malignas10. En estos experimentos, un número definido de las células se inyecta por vía subcutánea en el flanco de los animales y la frecuencia de los TICs puede estimarse en base a la tasa de toma del tumor. Tumores subcutáneos sin embargo pueden ser más hipóxico11 y no pueden modelo claves limitaciones fisiológicas del microambiente del tumor de pulmón. Intratraqueal entrega de madre epitelial o células progenitoras en los pulmones de los ratones es un método para estudiar la regeneración pulmonar y las vías respiratorias la célula de vástago biología12. Sin embargo, la tasa de engraftment de esta técnica puede ser relativamente baja, a menos que los pulmones son sometidos primero a formas fisiológicas de lesiones, tales como infección viral13,14. Apoyo de las células stromal inflamatorias o la interrupción de la membrana basal de pulmón puede mejorar la retención de las células trasplantadas en nichos de células relevantes en la15de las vías aéreas distales. Agentes de inducción de fibrosis puede también previamente la condición los pulmones para mejorar el engraftment de células pluripotentes inducidas16 y17de las células madre mesenquimales. Si otras formas de lesión de las vías respiratorias pueden afectar la tasa de engraftment, capacidad de iniciación tumoral y consecuencia de las células de cáncer de pulmón todavía debe evaluarse sistemáticamente.
En este estudio, se describe un método para aumentar la eficiencia de orthotopic engraftment de la célula de cáncer de pulmón, por acondicionamiento previo de los pulmones de los ratones con lesión. LUAD se presenta en las vías aéreas distales con un subconjunto significativo de estos cánceres en el desarrollo de un tejido conectador fibrótico18 que a menudo se correlaciona con mal pronóstico19. Bleomicina, un peptide nonribosomal natural del híbrido-polyketide, ha sido ampliamente utilizada para inducir fibrosis pulmonar en ratones20. Instilación de las vías respiratorias de la bleomicina primero promueve el desgaste epitelial de los alvéolos y el reclutamiento de células inflamatorias, incluyendo macrófagos, neutrófilos y monocitos21. Esto es seguido por remodelación tisular en las vías aéreas distales, reorganización de la membrana del sótano22,23 y deposición de matriz extracelular (ECM)24. Los efectos de una inyección de bleomicina solo son transitorios, con fibrosis resolver después de 30 días en la mayoría de los estudios de25. Utilizando modelos de aloinjertos y xenoinjertos, probamos si acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina puede aumentar significativamente el índice de toma de LUAD células en los pulmones.

<table><tbody><tr><td>Bleomicina</td><td>Sigma</td><td>B5507-15UN</td><td>PRECAUCIÓN Peligro para la salud GHS08</td></tr><tr><td>Catéter Exel 24G</td><td>Fisher 1484121</td><td></td><td>Retire la aguja. Para inyección intratraqueal</td></tr><tr><td>Ketamina (Ketaset inl 100 mg/mL C3N 10 mL)</td><td>Butler Schein</td><td>56344</td><td>Para anestesiar ratones</td></tr><tr><td>Xilacina</td><td>Butler Schein</td><td>33198</td><td>Para anestesiar ratones</td></tr><tr><td>Ketoprofeno, 5.000 mg</td><td>Cayman Chemical 10006661</td><td></td><td>Analgésico</td></tr><tr><td>Puralube Pomada Oftálmica Veterinaria</td><td>BUTLER ANIMAL HEALTH COMPANY LLC</td><td>8897</td><td>Para prevenir la sequedad ocular bajo anestesia,</td></tr><tr><td>D-Luciferin en polvo</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>122799</td><td>Para imágenes luminiscentes. Reconstituya el polvo con PBS para una concentración de trabajo de 15 mg/mL. Proteger de la luz</td></tr><tr><td>Soporte de intubación para roedores</td><td>Braintree Scientific</td><td>RIS-100</td><td>Soporte recomendado para inyección intratraqueal</td></tr><tr><td>MI-150 ILUMINADOR 150W MI-150</td><td>DOLAN-JENNER INDUSTRIES</td><td>MI-150 / EEG2823M</td><td>Para iluminar y visualizar la tráquea</td></tr><tr><td>Pinzas Graefe, 2,75 (7 cm) de largo serrat</td><td>Roboz</td><td>RS-5111</td><td>Para inyección intratraqueal</td></tr><tr><td>Jeringa Luer-Lok Estéril 5ml</td><td>BD / Fisher</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Satinado Smooth de Conair Afeitadora recargable para mojado/seco de doble lámina</td><td>Conair-To</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Tijeras Bonn Tijeras, 3.5" rectas de 15 mm Cuchillas de corte seguro</td><td>Roboz</td><td>RS-5840SC</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico de 15 mL</td><td>BD / Fisher</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de centrífuga de 1,5 mL</td><td>USA SCIENTIFIC INC</td><td>1615-5500</td><td></td></tr><tr><td>Centelleo de vial 7 mL Vidrio de borosilicato GPI</td><td>Fisher</td><td>701350</td><td></td></tr><tr><td>Puntas de pipeta con filtro (200 &mu; L)</td><td>USA SCIENTIFIC INC</td><td>1120-8710</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato</td><td>Life Technologies</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>0.25% Tripsina-EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>DMEM alta glucosa</td><td>Life Technologies</td><td>11965-092</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Medio 1640</td><td>Life Technologies</td><td>11875-093</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino USDA</td><td>Life Technologies</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina</td><td>Life Technologies</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Anfotericina B</td><td>Sigma</td><td>A2942-20ML</td><td></td></tr><tr><td>Tinción azul de tripán 0.4%</td><td>Life Technologies</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>Contador de células automatizado Countess</td><td>Life Technologies</td><td>AMQAX1000</td><td></td></tr><tr><td>Frasco T/C 75cm cuello cuadrado, gorra azul</td><td>Fisher / Corning</td><td>353135</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum Xenogen Bioluminiscence</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>124262</td><td>Para in vivo imágenes de bioluminiscencia</td></tr><tr><td>Software de imagen viva</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>128113</td><td>Para in vivo análisis de bioluminiscencia</td></tr><tr><td>XGI-8 Sistema de anestesia gaseosa</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>118918</td><td>Para anestesia con isoflurano</td></tr><tr><td>BD Ultra-Fine II Jeringa de insulina de aguja corta 1 cc. 31 g x 8 mm (5/16 in)</td><td>BD / Fisher</td><td>BD328418</td><td>Para inyección de luciferina retroorbital</td></tr><tr><td>Jeringa 1ml</td><td>BD / Fisher</td><td>14-823-434</td><td>Para inyecciones intraperitoneales</td></tr><tr><td>Aguja de 26 G x 1/2 pulg.</td><td>BD / Fisher</td><td>305111</td><td>Para inyecciones intraperitoneales</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehído</td><td>VWR</td><td>43368-9M</td><td>PRECAUCIÓN Peligro para la salud GHS07, GHS08. Para la fijación de tejido</td></tr><tr><td>Pipet-Lite Pipeta, Unv. SL-200XLS+</td><td>METTLER-TOLEDO INTERNATIONAL</td><td></td><td></td></tr> 17014411 <tr><td>Hematoxilina de Mayer</td><td>CIENCIAS DE LA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA</td><td>517-28-2</td><td></td></tr><tr><td>Tinción de eosina Y 0,25% (p/v) en 57%</td><td>Fisher</td><td>67-63-0</td><td></td></tr><tr><td>Kit de tinción tricrómico Masson</td><td>IMEB Inc</td><td>K7228</td><td>Para tinción tricrómática masson para visualizar el colágeno</td></tr><tr><td>Superfrost plus portaobjetos de vidrio</td><td>Fisher</td><td></td><td></td>1255015</tr><tr><td>Placa de 6 pocillos</td><td>Corning</td><td>C3516</td><td></td></tr><tr><td>Kit universal de detección de micoplasma</td><td>ATCC</td><td>30-1012K</td><td></td></tr><tr><td>OCT Compuesto de inclusión</td><td>ELECTRÓNICA MICROSCOPY SCIENCES</td><td>62550-12</td><td>Para la inclusión de tejido para secciones congeladas</td></tr><tr><td>Criostato de investigación Leica CM3050 S</td><td>Leica</td><td>CM3050 S</td><td>Para seccionar el tejido para el análisis</td></tr> <tr><td>de tinciónMicroscopio de fluorescencia todo en uno Keyence</td><td>Keyence</td><td>BZ-X700</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Institutos Nacionales de Salud de EE. UU.</td><td>IJ1.46</td><td>http://rsbweb.nih.gov/ij/ download.html</td></tr><tr><td>Prism 7.0 para Mac OS X</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Ratones atímicos (Crl:NU(NCr)-Foxn1nu)</td><td>Charles River</td><td>NIH-553</td><td></td></tr><tr><td>NSG (NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ) ratones</td><td>Jackson Laboratories</td><td>5557</td><td></td></tr><tr><td>B6129SF1/J ratones</td><td>Jackson Laboratories</td><td>101043</td><td></td></tr><tr><td>células NIH-H2030</td><td>ATCC</td><td>CRL-5914</td><td></td></tr><tr><td>368T1</td><td>generosamente proporcionadas por Monte Winslow (Universidad de Standford)</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>células PC9</td><td>Nguyen DX et al. Cell. 2009; 138:51 y ndash; </td><td></td> 62-H2030 <td></td></tr><tr><td>Células BrM3</td><td>Nguyen DX et al. Célula 2009; 138:51 y ndash; 62</td><td>-</td><td></td></tr></tbody></table>

acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina aumenta la eficacia del pulmón orthotopic engraftment de la célula de cáncer

Pre-Conditioning the Airways of Mice with Bleomycin Increases the Efficiency of Orthotopic Lung Cancer Cell Engraftment

Cáncer de pulmón es una enfermedad refractaria mortal tratamiento biológico heterogéneo. Para entender y tratar con eficacia el espectro clínico completo de tumores malignos torácicos, se necesitan modelos animales adicionales que pueden recapitular fases y subtipos de cáncer de pulmón humanas diversas. Aloinjerto o xenoinjerto modelos son versátiles y permiten la cuantificación de capacidad tumorígena en vivo, usando las células malignas de origen murino o humano. Sin embargo, se han realizado métodos previamente descritos del engraftment de la célula de pulmón cáncer en sitios no-fisiológicos, tales como el flanco de los ratones, debido a la ineficiencia del trasplante orthotopic de células en los pulmones. En este estudio, se describe un método para mejorar el acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con la bleomicina de agente induce fibrosis orthotopic engraftment de la célula de cáncer de pulmón. Como un experimento de prueba de concepto, se aplicó este enfoque para engraft las células del tumor del subtipo de adenocarcinoma de pulmón, obtenida de fuentes humanas, o de ratón en varias cepas de ratones. Demostramos que hiriendo a las vías respiratorias con bleomicina antes de la inyección de células de tumor aumenta el engraftment de células tumorales de 0-17% 71-100%. Este método había mejorado significativamente, incidencia de tumor de pulmón y posterior consecuencia utilizando cepas de ratón y diferentes modelos. Además, las células de cáncer de pulmón engrafted difusión desde los pulmones a órganos distantes pertinentes. Por lo tanto, proporcionamos un protocolo que puede utilizarse para establecer y mantener nuevos modelos ortotópico de cáncer de pulmón con limitación de la cantidad de células o muestra biológica y evaluar cuantitativamente la capacidad tumorigénica de las células de cáncer de pulmón en configuración fisiológico correspondiente .

Para aumentar la eficiencia del engraftment de la célula cáncer LUAD en los pulmones de ratones, hemos desarrollado un protocolo que primero las condiciones de las vías respiratorias utilizando bleomicina seguida de la inyección de células de tumor ortotópico (figura 1). Se confirmó que incluso cuando se administra en ratones athymic immunocompromised, bleomicina induce fibrosis transitoria día 14 según lo evidenciado por la pérdida de la arquitectura de las ...

Se describe un método para mejorar considerablemente orthotopic engraftment de células de cáncer de pulmón en los pulmones murinos por acondicionamiento previo de las vías respiratorias con lesiones. Este enfoque también puede aplicarse para estudiar las interacciones estromales dentro del microambiente de la pulmonar, diseminación metastásica, comorbilidades de cáncer de pulmón, y generar más eficientemente paciente derivados de xenoinjertos.

Acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina aumenta la eficacia del pulmón Orthotopic Engraftment de la célula de cáncer

Lung cancer is a deadly treatment refractory disease that is biologically heterogeneous. To understand and effectively treat the full clinical spectrum of ...

El objetivo general de este procedimiento es aumentar la eficiencia del trasplante de células de cáncer de pulmón iniciadoras de tumores en las vías respiratorias de ratones. Este método puede ayudar a establecer nuevos modelos preclínicos para responder a preguntas clave en la biología del cáncer, incluidas las causas de la resistencia a los medicamentos y la relación entre la fibrosis y el cáncer de pulmón. La principal ventaja de esta técnica es que aumenta la eficiencia del trasplante de células iniciadoras de tumores en los pulmones de una variedad de cepas de ratones.Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la terapia, ya que nos permite modelar una mayor variedad de subtipos de cáncer de pulmón humano, que se sabe que tienen diferentes respuestas clínicas al tratamiento. Para este protocolo, primero se debe inyectar bleomicina a los ratones. Luego, después de 14 días, se inyectan las células tumorales.El procedimiento para ambas inyecciones es muy similar y se describe aquí. Dos horas antes de la inyección, descongele el caldo de bleomicina en hielo y dilúyalo hasta la concentración de trabajo. Manténgalo en hielo.Para un bolo celular, tenga preparada una suspens

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Este video describe un método para injertar células de adenocarcinoma de pulmón en pulmones murinos mediante el preacondicionamiento de las vías respiratorias con un agente inductor de fibrosis: bleomicina. Este método mejora significativamente el injerto ortotópico de células de cáncer de pulmón en pulmones...

Injerto de adenocarcinoma: un método para implantar células cancerosas en los pulmones murinos

El uso de un modelo que imita el estado de las enfermedades pulmonares en los seres humanos es crítico para el estudio de la fisiopatología y / o la etiología de una enfermedad en particular y para el desarrollo de la intervención terapéutica. Aquí un método intubación endotraqueal no invasivo que puede entregar directamente materiales exógenos a los pulmones del ratón se presenta.

No Invasiva Intratraqueal Intubación para Estudiar la Patología y Fisiología de pulmón de ratón

En este artículo se presenta un método rápido y sencillo para la administración de bleomicina directamente en la tráquea ratón a través de la intubación. Las principales ventajas de este método son que es altamente reproducible, fácil de dominar, y no requiere equipo especializado ni largos tiempos de recuperación.

Un método mejorado para la rápida intubación de la tráquea en ratones

Describimos a un no-invasivo multimodal enfoque basado en la tomografía molecular Micro-CT y la fluorescencia para la evaluación longitudinal del modelo ratón pulmonar la fibrosis inducido por la instilación intratraqueal doble de bleomicina la proyección de imagen.

Un Multimodal enfoque de imagen basados en tomografía Molecular Micro-CT y la fluorescencia para la evaluación Longitudinal de la Fibrosis pulmonar inducida por bleomicina en ratones

Aquí presentamos un método eficaz para investigar la actividad antifibrotica de las células mesenquimales humanas infundidas por vía intravenosa obtenidas de todo el cordón umbilical tras la inducción de la lesión pulmonar mediante una inyección endotraqueal de bleomicina en C57BL /6 ratones. Este protocolo se puede extender fácilmente a las pruebas preclínicas de otras terapias.

Inducción de lesión pulmonar de ratón por inyección endotraqueal de bleomicina

Se han establecido varios modelos animales de fibrosis pulmonar utilizando bleomicina para aclarar la patogenia de la fibrosis pulmonar y encontrar nuevas dianas farmacológicas. Sin embargo, la mayoría de los modelos de fibrosis pulmonar dirigidos al tejido pulmonar tienen una administración desigual del fármaco. En este trabajo se propone un modelo de fibrosis pulmonar uniforme inducida por la nebulización nasal de bleomicina.

Un modelo murino de fibrosis pulmonar inducida por nebulización nasal de bleomicina

Este protocolo describe el aislamiento de macrófagos intersticiales pulmonares (MI) y su transferencia adoptiva después de la estimulación de IL-33 de los alvéolos pulmonares en un modelo de ratón, lo que puede facilitar el estudio in vivo de la fibrosis pulmonar idiopática (FPI).

Transferencia adoptiva de macrófagos estimulados por IL-33 en modelos de ratón inducidos por bleomicina para estudiar su efecto sobre la fibrosis pulmonar idiopática in vivo

Este protocolo demuestra la técnica de aspiración orofaríngea para su uso en el modelo murino de fibrosis pulmonar con bleomicina.

Administración orofaríngea de bleomicina en el modelo murino de fibrosis pulmonar

La terapia celular ofrece una intervención prometedora para la fibrosis pulmonar mediante el uso de células progenitoras para reparar el tejido dañado y mejorar la función pulmonar. Dado que las imágenes desempeñan un papel fundamental en el seguimiento de la integración celular, en este trabajo describimos el seguimiento in vivo guiado por imágenes magnéticas de la terapia celular para la fibrosis pulmonar en un modelo de ratón.

Seguimiento in vivo guiado por imágenes de células progenitoras epiteliales pulmonares distales trasplantadas para fibrosis pulmonar mediante imágenes de partículas magnéticas

Este protocolo describe un método para inducir fibrosis pulmonar en ratones a través de la administración orofaríngea repetida de bleomicina, produciendo características patológicas muy parecidas a las de la fibrosis pulmonar idiopática.

Modelo murino refinado de fibrosis pulmonar idiopática

Aquí presentamos un protocolo para modelar la fibrosis pulmonar en ratones utilizando bleomicina aerosolizada administrada a través de la tráquea. Este método optimizado permite una administración uniforme, cuantitativa y precisa sin incisión quirúrgica, mejorando la reproducibilidad y fiabilidad de la fibrosis inducida por bleomicina.

Un método refinado de administración intratraqueal de bleomicina basado en aerosoles para modelos reproducibles y mínimamente invasivos de fibrosis pulmonar en ratones

Aprende a aumentar la eficiencia del trasplante de células de cáncer de pulmón en ratones mediante el acondicionamiento previo de las vías respiratorias con bleomicina. Este método permite modelar diversos subtipos de cáncer.

Acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina aumenta la eficacia del pulmón Orthotopic Engraftment de la célula de cáncer (Video) | JoVE Journal

Acondicionamiento previo de las vías respiratorias de los ratones con bleomicina aumenta la eficacia del pulmón Orthotopic Engraftment de la célula de cáncer

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