17 de agosto de 2018
Este protocolo mide respuestas de gusto humano e incluye una breve valoración anatómica, una prueba corta del sabor y un método de validación mediante reportado sensación y gusto del receptor genotipo del sujeto.
Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo médico y sensorial sobre el sentido del gusto de cada persona. La principal ventaja de esta técnica es su brevedad e idoneidad para la investigación biomédica. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia el diagnóstico y tratamiento de la rinosinusitis crónica porque los receptores del gusto forman parte del sistema inmunitario innato.
Demostraré el procedimiento en nuestro miembro del laboratorio, David y Lauren harán las soluciones de sabor. Comience instruyendo al sujeto para que abra la boca. Utilice una luz para iluminar la cavidad bucal y examine los siete subsitios de la zona.
Aquí la lengua dorsal es fácilmente visible. Usando un depresor de lengua para deprimir la lengua, la faringe posterior se hace visible. A continuación, la lateralización de la lengua permite exponer el trígono retromolar izquierdo y la mucosa bucal izquierda.
Aquí se visualiza la encía anterior y la mucosa labial. A medida que se levanta la lengua del sujeto, la superficie ventral de la lengua se hace visible. Y esto permite el examen de los sujetos en el suelo de la boca.
A continuación, se lateraliza de nuevo la lengua para examinar el trígono retromolar derecho y la mucosa bucal derecha. Y por último se visualiza el paladar duro y blando. Observa lesiones, abrasiones y masas o signos de inflamación.
Utilice una fuente de luz para visualizar la superficie dorsal de la lengua e identificar la presencia o ausencia de papilas fungiformes o superficie lisa de la lengua. Finalmente, anote los resultados del examen de la cavidad bucal antes de continuar con la prueba de sabor. Comience preparando las soluciones de sabor utilizando un matraz aforado para cada una para garantizar la precisión de las concentraciones.
Disuelva las muestras con agua ultrapura. Envuelva cualquier solución sensible a la luz con papel de aluminio para reducir la exposición a la luz. A continuación, almacene las soluciones gustativas a cuatro grados centígrados.
Para identificar errores comunes en la preparación de la solución, llene una taza de degustación con la solución vieja y otra con la solución nueva. Pruebe cada solución para verificar que sean idénticas en fuerza. A continuación, etiquete los tapones de los viales con una pegatina circular según el orden de presentación y un código de colores.
Con el fin de hacer coincidir las etiquetas de los viales con las etiquetas del cuestionario de degustación. Empaque las muestras colocándolas en sus respectivos soportes. A continuación, prepare el cuestionario de sabor utilizando una escala de categorías para calificar la intensidad del sabor y una elección forzada para identificar la calidad del sabor de cada degustador.
Por último, coloque etiquetas circulares del color y número apropiados junto a la muestra apropiada en el cuestionario de sabor. Proporcione al sujeto la caja de muestras, una botella de agua, un vaso vacío, un bolígrafo y un cuestionario de degustación que contenga entradas para 12 muestras. Explique el procedimiento de prueba e informe al sujeto que se le pedirá que califique tanto la intensidad como la calidad de cada catador.
Hágales saber que es posible que no experimenten todas las cualidades. Comience la prueba pidiéndole al sujeto que se enjuague la boca dos veces con agua y la escupe en la taza provista. Pídales que viertan toda la muestra en su boca y la mantengan allí durante cinco segundos antes de escupir la solución en la taza.
Dígales que no hagan gárgaras ni traguen la solución. A continuación, indique al sujeto que encierre en un círculo una de las 13 líneas verticales correspondientes a la intensidad de la muestra. En una escala de 0 a 12.
De ninguna intensidad a extremadamente intensa. Y elija una sola cualidad para describir el sabor. A continuación, pida al sujeto que se enjuague la boca con agua dos veces antes de pasar a la siguiente muestra.
Observe el tema degustando y calificando la muestra uno de agua. En caso de que la calificación se desvíe de ninguna intensidad y ningún sabor, repita las instrucciones del cuestionario antes de permitir que la prueba continúe. Después de que se hayan probado todas las muestras, revise el cuestionario terminado para ver si está completo.
Por último, puntúa las puntuaciones de intensidad en una escala de 0 a 12 a partir de las líneas verticales que el sujeto encerró en un círculo. Y promediar las dos calificaciones de intensidad para cada cata para su posterior análisis. Los resultados de la prueba de sabor confirman la existencia de diferencias perceptivas de sabor para el compuesto amargo, feniltiocarbamida o PTC entre los sujetos agrupados por el genotipo del receptor TAS2R38.
Las puntuaciones de la intensidad de PTC son significativamente diferentes en tres genotipos. La motivación detrás de este estudio fue tratar de evaluar o desarrollar un examen rápido en el punto de servicio que pudiéramos hacer en la clínica y que evaluara la función de este receptor que creemos que desempeña un papel en el desarrollo de la sinusitis crónica. La idea aquí es si podríamos usar esta prueba de sabor para predecir cuáles de nuestros pacientes tienen un alto riesgo de desarrollar sinusitis y, lo que es más importante, qué pacientes son buenos candidatos quirúrgicos para que realicemos nuestra cirugía de senos paranasales, o cuáles lo harán mal con nuestra cirugía de senos paranasales.
Por lo tanto, estamos tratando de usar esta prueba de sabor para pronosticar la enfermedad sinal-nasal del paciente. Una vez que pasamos por todas las pruebas de sabor, lo confirmamos mediante el genotipado de los pacientes. Y como se puede ver en la figura tres, en su mayor parte el genotipo del paciente sigue el patrón de su fenotipo.
Lo que significa que cuanto más amargo sabían, tendían a ser dominantes para este receptor. Sin embargo, hay algunos valores atípicos. Lo que demuestra que hay homocigotos funcionales, PAV/PAV, que dicen que no probaban PTC y, por otro lado, había algunos individuos AVI/AVI no funcionales que probaban PTC con amargura.
Eso significa que, independientemente de la prueba de sabor que desarrollemos, si hay pacientes que no cumplen con nuestras expectativas, probablemente queramos confirmar la prueba de sabor mediante el genotipado de T2R38. Una vez dominado, el examen y la prueba de sabor se pueden realizar en menos de 30 minutos. Después de ver este video, debe comprender cómo realizar un examen oral, anotar evidencia de enfermedad y realizar una breve prueba de sabor.
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Este protocolo mide las respuestas gustativas humanas e incluye una breve evaluación anatómica, una prueba gustativa corta y un método de validación mediante la sensación reportada por el sujeto y su genotipo de receptores del gusto. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en los campos médico y sensorial sobre el sentido del gusto de cada persona.
Este método permite una evaluación rápida y en el lugar de atención médica de la función de los receptores del gusto, que sirve como un indicador de la sensibilidad del tejido en la investigación biomédica. Al vincular la percepción subjetiva del sabor con datos objetivos de genotipo, apoya la reducción de riesgos mecanicistas en la validación de dianas para vías sensoriales y relacionadas con el sistema inmunitario. La brevedad y la reproducibilidad de la prueba facilitan su integración en flujos de trabajo de descubrimiento en los que la modulación de los receptores del gusto constituye una hipótesis terapéutica.
El método se integra en las primeras etapas del descubrimiento para validar dianas de receptores del gusto, apoya la preparación para cribados mediante la administración estandarizada de sustancias sapidas y orienta las decisiones traslacionales a través de la correlación genotipo-fenotipo.