Name: Examen de gusto: Una prueba breve y validada (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Aprende a realizar un examen de gusto validado que mide respuestas gustativas humanas mediante evaluación anatómica oral y análisis de genotipo TAS2R38. Este método breve permite investigar procesamiento sensorial y su relación con el sistema inmune innato.

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Premios de los institutos nacionales de la salud apoyó esta investigación (R01DC013588 a NAC, R21DC013886 NAC y RRD y suplemento de investigación administrativa de NIDCD para promover la aparición de médico-científicos en investigación Chemosensory a JED). Se recopilaron datos de genotipo de equipos adquiridos en parte con fondos del NIH de OD018125.

La Universidad de la Junta de revisión institucional de Pennsylvania aprobó este protocolo. Se excluyeron los temas si eran menores de 18 años de edad o embarazadas.
1. bucal evaluación: Evaluación de la enfermedad e identificación de la papila
<ol><li>Indicar el tema para abrir la boca.</li>
	<li>
Utilizando una fuente de luz como una linterna o una linterna, iluminar la cavidad oral y examinar los siete subsitios del área (lengua, piso de boca, mucosa bucal, mucosa labial, encía, paladar duro y trígono retromolar).
	<ol>
<li>Visualizar la superficie dorsal de la lengua. Indicar el tema que levante la lengua y examinar la superficie ventral de la lengua y piso de boca, asegurándose de que dar el examen posterior a los molares.</li>
		<li>Utilizando un depresor de lengüeta, lateralize mejilla del sujeto para visualizar la mucosa bucal, así como la encía lateral bilateral que rodea los dientes superiores e inferiores.</li>
		<li>Extender el examen anterior levantando los labios superiores e inferiores para visualizar las superficies de la encía anterior y mucosa labial.</li>
		<li>Finalmente, se visualiza el paladar duro y trígono retromolar.</li>
		<li>Tenga en cuenta las lesiones, abrasiones y masas o signos de inflamación.</li>
		<li>Una vez más, pedir el tema para abrir la boca y extender la lengua.</li>
		<li>Utilice una fuente de luz para visualizar la superficie dorsal de la lengua.</li>
		<li>Identificar la presencia o ausencia de FP, p. ej., una superficie lisa de la lengua</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tenga en cuenta los resultados de la examinación de la cavidad bucal antes de proceder con las pruebas de sabor. Si investigadores llevar a cabo esta prueba de gusto en un contexto médico, resultados inesperados deben incitar la work-up adicional.</li>
</ol>2. psicofísico gusto prueba
Nota: Las descripciones para el psicofísico gusto que siguen la prueba y recursos también están disponibles en la siguiente página web: https://osf.io/hn87s/.
<ol><li>
Preparación tastant
	<ol>
<li>Preparar soluciones como se indica a continuación. Hacer de cada solución, utilizando un matraz aforado para asegurar la precisión de las concentraciones de a ± 0,0002 muestras M. disolver con agua ultrapura. Adaptar la elección de compuestos para los objetivos de la investigación. Los compuestos incluidos aquí se significan como un ejemplo.<ol>
<li>Benzoato de denatonio (amargo): preparar una solución stock de 4.99 x 10-3 M benzoato de denatonio disolviendo 2,228 g de benzoato de denatonium en 1 L de agua. Añadir 180 μl de esta solución madre a un matraz aforado de 500 mL. Añadir agua para llevar el volumen a 500 mL, produciendo una solución con una concentración final de 1,8 μm.</li>
			<li>PTC (amargo): lugar de 0,0135 g de PTC en un matraz aforado de 500 mL. Añadir agua para llevar el volumen a 500 mL. PTC es difícil de disolver, así que coloque una barra de agitación en el matraz y calentar la solución hasta 70 ° C en una placa caliente. Utilice la barra de agitación para mezclar la solución hasta que todo soluto disuelva (~ 15 min). Esto produce una solución con una concentración final de 180 μm.</li>
			<li>Quinina (amargo): lugar de 0,011 g de quinina dihidrato del ácido clorhídrico en un matraz aforado de 500 mL. Añadir agua para llevar el volumen a 500 mL, produciendo una solución con una concentración final de 56 μm.</li>
			<li>Cloruro de sodio (salado): colocar 7,5 g de cloruro de sodio en un matraz aforado de 500 mL. Añadir agua para llevar el volumen a 500 mL, produciendo una solución con una concentración final de 0.25 M.</li>
			<li>Sacarosa (dulce): colocar 60 g de sacarosa en un matraz aforado de 500 mL. Añadir agua para llevar el volumen a 500 mL, produciendo una solución con una concentración final de 0,35 M.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Tienda sabor soluciones a 4 º C. Algunos utilizados compuestos del gusto son sensibles a la luz, y los investigadores deben envolverlos en papel de aluminio u otros materiales para reducir su exposición a la luz.</li>
		<li>Para identificar errores comunes en la preparación de la solución, llenar una copa de cata con la vieja solución y uno con la nueva solución. Probar cada solución para verificar que son idénticos en la fuerza.</li>
		<li>Incluir el agua como una solución de control, presentada en la primera posición para verificar temas entienden el procedimiento de prueba. Presentar temas con cada una tastant el control tastant dos veces, procurando para evitar que presenta la misma tastant consecutivamente. Por ejemplo, para probar cinco tastants únicas, cuentan con doce muestras en el cuestionario (ver 2.2): los cinco tastants y agua, cada uno presenta dos veces. Alícuota de 5 mL de agua en frascos de centelleo de vidrio individuales. Etiqueta las tapas del frasco con una etiqueta azul oscurezca con el número 1.</li>
		<li>Repita este proceso para cada tastant. Tapas de frasco de etiqueta con una pegatina circular según el orden de presentación y algún código de color, en el ejemplo se detallan a continuación; coincidir con las etiquetas del frasco con las etiquetas en el cuestionario de gusto (ver 2.2). Agua (azul oscuro) Quinina (azul claro) NaCl (verde) PTC (amarillo) Sacarosa (naranja) Benzoato de denatonio (rojo) NaCl (azul oscuro) Benzoato de denatonio (azul claro) Agua (verde) Quinina (amarillo) Sacarosa (naranja) PTC (rojo)</li>
		<li>Paquete de muestras colocándolos en dos cajas, las muestras 1-6 y 7 – 12 en cajas etiquetadas "caja A" y "caja B", respectivamente (figura 1); otras estrategias de embalaje son posibles.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2.jpg"> Figura 1: probar el kit de. Temas utilizan el juego de intensidad de sabor de ritmo y calidad de tastants colores varios. Una caja contiene muestras 1-6, caja B contiene 7 – 12. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<ol start="2"><li>
Cuestionario de gusto
	<ol>
<li>Preparar el cuestionario de sabor utilizando una escala de categoría para valorar la intensidad de sabor y una opción obligada para identificar la calidad del sabor de cada tastant (figura 2).</li>
		<li>Coloque etiquetas circulares del color apropiado y el número al lado de la muestra correspondiente en el cuestionario de gusto (consulte 2.1.6).</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig2.jpg"> Figura 2: entrada de cuestionario, compuesto por una escala de categoría de calificación de intensidad de sabor y forzada elección respuesta tastant calidad. El cuestionario de gusto incluirá una entrada para cada uno de los colores tastants probado. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<ol start="3"><li>
Administración de prueba de sabor
	<ol>
<li>Proporcionan a temas con caja A, caja B, una botella de agua, vacíe el depósito, pluma y que contienen entradas de lápiz y papel gusto cuestionario para 12 muestras. Utilice la misma marca de agua embotellada durante toda la duración de cualquier estudio dado. Como alternativa a un cuestionario de papel, puerto el material en el software de encuestas en línea y administrado a través de tabletas o de escritorio o portátil. Una plantilla de ejemplo está disponible en https://osf.io/hn87s/.</li>
		<li>Instruir a sujetos que se pedirá a la intensidad y la calidad (p. ej., salado, amargo, amargo, dulce o sin sabor) de cada tastant. También, informar a temas que no tenga todas las cualidades.</li>
		<li>Explicar el procedimiento de prueba, como sigue: Enjuáguese la boca dos veces con agua y escupa hacia fuera en la Copa siempre. Vierta todos los de la muestra 1 en la boca y manténgalo ahí durante 5 segundos antes de escupir la solución en la taza. No hacer gárgaras ni tragar la solución. Círculo una de las 13 líneas verticales correspondientes con la intensidad de la muestra, en una escala de 0 a 12, de "no hay intensidad en absoluto" a "muy intensa" y elija una calidad única para describir el sabor. Después, enjuáguese la boca con agua dos veces antes de proceder a la siguiente muestra.</li>
		<li>Observar el tema degustación y calificación de la muestra 1 (agua). Si el calificación se desvía de "ninguna intensidad en absoluto" y "sin sabor", reiteran las instrucciones del cuestionario antes de permitir que la prueba que proceda.</li>
		<li>Revisar el cuestionario final para integridad.</li>
		<li>Puntuación de grados de intensidad en una escala de 0 a 12 de las líneas verticales que las asignaturas en un círculo. Promedio de las dos clasificaciones de la intensidad de cada una tastant; Este valor se utilizará para el análisis.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. genotipo
<ol><li>Recoger saliva de cada tema utilizando un kit de colección de ADN de saliva.</li>
	<li>Purificar el ADN genómico de la muestra siguiendo las instrucciones del fabricante.</li>
	<li>Determinar el genotipo TAS2R38 con SNP genotyping ensayos (rs713598, rs1726866, rs10246939)40.</li>
	<li>Determinar el genotipo de TAS2R19 con SNP genotyping ensayos (rs10772420)36.</li>
</ol>4. validación genotipo-fenotipo
<ol><li>Revisar los datos de control combinados disponibles más de 800 temas de genotipados TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) y TAS2R19 (rs10772420) en la siguiente página web: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.</li>
	<li>Basado en genotipo de TAS2R38 del sujeto, comparar su respuesta gusto psicofísico para el PTC compuesto amargo con las normas para los individuos del mismo genotipo. Las respuestas deben coincidir; sin embargo, en casos raros, TAS2R38 genotipo no perfectamente predecir PTC resultados sensoriales35.</li>
	<li>Deben respuestas muestran importantes diferencias, comparar gusto respuesta del tema quinina con las normas para los individuos del mismo genotipo TAS2R19 . Respuestas para la intensidad de la quinina y genotipo deben coincidir con36. Si todos resultados gusto no se corresponde con el genotipo, es posible que el sujeto (a) no entiende la tarea (b) proporcionar calificaciones falsas o simulación de enfermedad o (c) se ha producido un error de colección de datos por parte del investigador.</li>
	<li>Identificar afloramientos de punto de datos y tal vez excluirlos de análisis (figura 3). Correspondencia de los resultados sensoriales con genotipificación objetivo valida la confiabilidad del procedimiento de pruebas psicofísica.</li>
</ol>

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</ol>

NAC y la RRD son co inventores de una patente bajo examen (terapia y diagnóstico para infección respiratoria 61/697.652, WO2013112865).

La importancia de este método es que utiliza un enfoque multidisciplinario con las características de la medicina (examen oral), psicología experimental (la prueba del sabor) y genética (un paso de la validación). Información del gusto es propenso a desarrollar como una herramienta de diagnóstico y pronóstica porque gusto proporciona una ventana en la función de proteínas en el cuerpo. Desde un punto de vista de la psicología experimental, la adición de un simple examen puede identificar a temas que no son apropiados par...

Medidas de percepción del gusto humano pueden ser parte de la atención médica y un objetivo de la investigación biomédica, con todo gusto ha recibido escasa atención en comparación con la audición y la visión (tabla 1). Desde la perspectiva médica, cuando los clínicos evaluación pacientes quejarse de pérdida de gusto, en la mayoría de los casos la pérdida real es de olor1, que ha llevado al despido de la pérdida de gusto como una queja de presentación infrecuente y a menudo inválida. Distorsiones del gusto (disgeusia) son más comunes y se presentan con frecuencia de los efectos secundarios de medicamentos o lesiones de nervios periféricos2,3, pero ni forma tiene un tratamiento eficaz (aparte de detener la medicación). Los médicos han ignorado también pérdida de gusto porque hasta ahora ha tenido poco valor diagnóstico o pronóstico sobre su propia. Sin embargo, aunque la medida del gusto ha sido un remanso, lo puede ser entrando en la medicina convencional con la reactivación de una apreciación histórica que gusto puede ser una herramienta de diagnóstico o pronóstico4,5. Por ejemplo, percepción de amargura puede predecir la función inmune6 o la voluntad de un paciente a tomar la medicación7. Sin embargo, los investigadores biomédicos han descuidado en gran medida sabor. Esta falta de atención puede, en parte, reflejan el hecho de que primeros avances en la comprensión de este sistema sensorial tiene sus raíces en la psicología experimental8, un campo que los de medicina pueden ser relativamente desconocidos. Por otra parte, renovado interés en el gusto ha marcó el comienzo de sabor estandarizado métodos9 que se basan en métodos anteriores10, que al mismo tiempo integral son muy largo e inadecuado para entornos clínicos. Por último, confianza en las medidas de gusto puede ser débil porque temas informe acerca de su propia experiencia y validación de sus observaciones ha faltado hasta ahora. Nuestra esperanza es que una simple medida que los investigadores o médicos pueden administrarse fácilmente ganará en popularidad con ambos componentes. Aquí se describe un protocolo de examen de sabor simple que consta de tres partes: una evaluación de la cavidad oral, la prueba del sabor y un paso de validación usando genotipo innato. En primer lugar, ofrecemos contexto biológico para estos procedimientos, que combinar prácticas sencillas en la medicina, las medidas sensoriales de psicología experimental y de validación de las respuestas mediante genotipo y genética.
Percepción del gusto se inicia en la boca, así que un examen gusto eficaz debe incluir una evaluación clínica breve de enfermedades bucodentales obvio, enrojecimiento, inflamación y otros la descoloración. La cavidad oral contiene siete subsitios: la lengua, encía, piso de boca, mucosa bucal, mucosa labial, paladar duro y trígono retromolar. Últimos estudios del gusto humano centrado en los participantes sanos o con enfermedades bien definidas, pero como gusto prueba se convierte en rutina en exámenes médicos, es importante registrar la condición de la cavidad bucal como parte del procedimiento.
La lengua sí mismo es una estructura muscular en mucosa; que salpican su superficie dorsal es las papilas, las pequeñas estructuras elevadas que dan a la lengua su textura única y contienen células del receptor del gusto. Clasificamos las papilas por su forma: fungiformes, filiformes, foliadas y circunvalada. Las papilas fungiformes (FP) son anterolaterally situado en la lengua y redondas, con una forma de la seta11. Los investigadores han publicado varios métodos útiles para cuantificar FP y orientamos a los lectores a estas fuentes para medición protocolos12,13,14,15,16. Las papilas foliadas, en forma de las páginas de un libro (folia), se encuentran exclusivamente en la parte posterior lateral de la lengüeta superficie11. Las papilas circunvaladas, encontradas en el surco terminal de la base de la lengua, son grandes estructuras en forma de cúpula, rodeadas por las paredes de la mucosa (Latín circum, "surround" + bonificación, "la pared")11. Las papilas más numerosas, filiformes, son largas y delgadas y no contienen receptores gustativos.
Las personas difieren en la anatomía de la lengua. Mientras que las fuentes de esta variación anatómica son desconocidas, está determinada en parte por la variación genética innata, con investigadores informes 31% concordancia de la anatomía de la lengua entre dicigotos gemelos y 60% concordancia entre gemelos monozigóticos17. Densidad papilar también difiere entre las personas, y aunque es raro, al menos una enfermedad genética (dysautonomia familiar) resulta en un ausencia congénita del gusto papilas18,19,20. Por lo tanto, antes de realizar pruebas psicofísicas, es útil confirmar la presencia de FP como parte de la evaluación breve y tenga en cuenta el tamaño relativo y el color de la lengua y la evidencia de la enfermedad oral.
Las papilas del gusto contienen el sensoriales células que cuando estimulan la sensación de gusto iniciar. Los seres humanos son capaces de detectar por lo menos cinco clases de gusto: salado, agrio, amargo, dulce y umami. Mientras que el salado, dulce y umami gusto la señal de la presencia de fuentes de alimentos valiosos que contiene cloruro de sodio, glucosa y aminoácidos, respectivamente, amargor y acidez señal de la presencia de potenciales toxinas y ácidos de la descomposición bacteriana de alimentos, respectivamente e inducir comportamiento aversivo21. Gusto salado y amargo es transduced por la activación de los canales iónicos encontrados en algunos tipos de células del gusto, aunque la comprensión de la transducción salada está evolucionando y puede requerir tipo de las células así22,23. Amargo, dulce y umami surgen de la activación de receptores g-proteína-juntados en tipo II las células gustativas, cada una adaptada a un gusto particular. Heterodímeros de subunidades de receptores particulares tres transducen dulce y umami, mientras que los compuestos amargos activan un grupo de 25 diferentes receptores amargos24. Estos receptores amargos pueden responder a múltiples compuestos amargos, y un solo compuesto amargo estimula a menudo más de un receptor25. A pesar de la reciente expansión del conocimiento sobre la base molecular del sabor, nuevas vías26 y nuevos descubrimientos más allá de las calidades del cinco gusto tradicionales (p. ej., calcio27 o ácido graso28 percepción) pueden aguardan.
Hay al menos dos aspectos sorprendentes de las familias de gusto de los receptores: genes que codifican estos receptores pueden difieren marcadamente en la secuencia de la DNA y por lo tanto, la función entre la gente, y muchos tejidos del cuerpo expresan estos genes21,29 , 30 , 31. estos sitios extraorales incluyen el cerebro, tiroides, superior e inferior de las vías respiratorias y el tracto gastrointestinal, entre muchos otros21,29,30,31. Mientras que los receptores del gusto en estas localizaciones no participan en la percepción del sabor en el sentido tradicional, es probable que sientan el ambiente químico local29,32. Por ejemplo, el epitelio ciliado del tracto respiratorio superior expresa los receptores amargos T2R38 (amargo sabor del Receptor 38), que responde a compuestos químicos producidos por bacterias e influye en la respuesta inmune innata32, como aumento de depuración mucociliar y los niveles de péptidos antimicrobianos y óxido nítrico. Este hallazgo tiene implicaciones médicas para la rinosinusitis crónica, una enfermedad de infección bacteriana crónica y la inflamación del tracto respiratorio superior y senos paranasales.
De particular relevancia para el gusto examen que Describimos aquí es que el receptor de gusto amargo T2R38, codificado por el gen TAS2R38 , exhibe variabilidad genética y la sensibilidad de gusto por lo tanto variable. Las diferencias perceptivas para la feniltiocarbamil compuesto amargo (PTC) primero fueron descritas por el químico Arthur Fox33; Este compuesto fue identificado más adelante como un agonista de los receptores de T2R3834. Surgen de las diferencias individuales de la secuencia de ADN del gen TAS2R38 , que tiene tres polimorfismos de nucleótido, cada rendimiento substituciones del aminoácido (A49P, A262V y I296V; R: alanina, prolina P:, V: valina, isoleucina I:). Resultan dos haplotipos comunes, PAV y AVI, con individuos PAV/PAV siendo muy sensibles a la PTC ("catadores"), individuos AVI/AVI ser relativamente insensibles ("no catadores") e individuos heterozigóticos AVI/PAV siendo más variable en su sensibilidad 35. hay más ejemplos de las variaciones genéticas que afectan a la percepción amarga, p. ej., receptor del gusto T2R19, codificada por el gen TAS2R19 , semejantemente exhibe variabilidad genética y la diferente sensibilidad de gusto al amargo compuesto 36de la quinina. Asimismo, la variación en TAS2R31 afecta la amargura percibida de uno de los edulcorantes de alta potencia37,38,39.
Aquí describimos un método rápido para caracterizar el sentido del paciente del gusto que se basa en protocolos de alto rendimiento en medicina clínica, psicología experimental y la genética.

<table><tbody><tr><td>Linterna de diagnóstico desechable</td><td>Primacare</td><td>DL-9223</td><td></td></tr><tr><td>Faro delantero UltraLite Pro</td><td>Integra LifeSciences</td><td>AX2100BIF</td><td></td></tr><tr><td>Millipore Q-Gard 2 sistema de purificación de agua</td><td>EMB Millipore</td><td>QGARD00D2</td><td></td></tr><tr><td>benzoato de denatonio&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>Feniltiocarbamida</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>Clorhidrato de quinina Sigma</td><td>Aldrich</td><td>Q1125</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro de sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S1679</td><td></td></tr><tr><td>Sacarosa</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>Viales de centelleo de vidrio</td><td>Thomas Scientific</td><td>1230L59</td><td>Igual que Wheaton n.º de catálogo 986580</td></tr><tr><td>Oragene Discover OGR-500 Kit de recolección de ADN</td><td>DNA Genotek</td><td>OGR-500</td><td></td></tr><tr><td>prepIT Reactivos del protocolo L2P</td><td>DNA Genotek</td><td>PT-L2P-5</td><td></td></tr><tr><td>rs713598 TaqMan Ensayo de genotipado SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___8876467_10</td><td></td></tr><tr><td>rs1726866 TaqMan Ensayo de genotipado SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506827_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10246939 TaqMan Ensayo de genotipado SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506826_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10772420 TaqMan Ensayo de genotipado SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___1317426_10</td><td></td></tr></tbody></table>

examen de gusto: una prueba breve y validada

Taste Exam: A Brief and Validated Test

La importancia emergente del gusto en la medicina y la investigación biomédica y el nuevo conocimiento sobre sus bases genéticas, nos ha motivado para complementar métodos clásicos de pruebas de sabor de dos maneras. En primer lugar, explicamos cómo hacer una evaluación breve de la boca, incluyendo la lengua, para que las papilas del gusto actual y evidencia de la enfermedad en cuestión. En segundo lugar, nos basamos en genética a comparación de los informes de intensidad de amargor percibido y genotipos de los receptores innatos para validar datos de prueba de sabor. Discordancia entre las medidas objetivas del genotipo y de informes subjetivos de la experiencia de sabor puede identificar errores de colección de datos, sujetos distraídos o aquellos que no han entendido o seguir instrucciones. Nuestra expectativa es que gusto rápido y válido las pruebas pueden persuadir a los investigadores y los clínicos para evaluar sabor regularmente, hacer pruebas de sabor tan común como pruebas de audición y visión. Finalmente, porque muchos tejidos del cuerpo expresan receptores de sabor, gusto respuestas pueden proporcionar a un servidor proxy para la sensibilidad del tejido en el cuerpo y, por lo tanto, servir como una prueba rápida, punto de atención para diagnóstico de guía y herramienta de investigación para evaluar el receptor del gusto función de la proteína.

Resultados de la prueba del sabor han sido agrupados para todos los sujetos evaluados (n = 840) y se presentan después de la segregación por genotipo. El conjunto de datos completo es accesible en https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ y pueden ser revisado para evaluar cada tastant y genotipos TAS2R38 y TAS2R19 . Resultados confirman la existencia de las diferencias de percepción del sabor de PTC entre temas agrupados por TAS2R38 genotipo de receptor (<st...

Este protocolo mide respuestas de gusto humano e incluye una breve valoración anatómica, una prueba corta del sabor y un método de validación mediante reportado sensación y gusto del receptor genotipo del sujeto.

Examen de gusto: Una prueba breve y validada

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo médico y sensorial sobre el sentido del gusto de cada persona. La principal ventaja de esta técnica es su brevedad e idoneidad para la investigación biomédica. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia el diagnóstico y tratamiento de la rinosinusitis crónica porque los receptores del gusto forman parte del sistema inmunitario innato.Demostraré el procedimiento en nuestro miembro del laboratorio, David y Lauren harán las soluciones de sabor. Comience instruyendo al sujeto para que abra la boca. Utilice una luz para iluminar la cavidad bucal y examine los siete subsitios de la zona.Aquí la lengua dorsal es fácilmente visible. Usando un depresor de lengua para deprimir la lengua, la faringe posterior se hace visible. A continuación, la lateralización de la lengua permite exponer el trígono retromolar izquierdo y la mucosa bucal izquierda.Aquí se visualiza la encía anterior y la mucosa labial. A medida que se levanta la lengua del sujeto, la superficie ventral de la lengua se hace visible. Y esto permite el examen de los sujetos en el suelo de la boca.A continuación, se lateraliza de nuevo la lengua para examinar el trígono retromolar derecho y la mucosa bucal derecha. Y por último se visualiza el paladar duro y blando. Observa lesiones, abrasiones y masas o signos de inflamación.Utilice una fuente de luz para visualizar la superficie dorsal de la lengua e identificar la presencia o ausencia de papilas fungiformes o superficie lisa de la lengua. Finalmente, anote los resultados del examen de la cavidad bucal antes de continuar con la prueba de sabor. Comience preparando las soluciones de sabor utilizando un matraz aforado para cada una para garantizar la precisión de las concentraciones.Disuelva las muestras con agua ultrapura. Envuelva cualquier solución sensible a la luz con papel de aluminio para reducir la exposición a la luz. A continuación, almacene las soluciones gustativas a cuatro grados centígrados.Para identificar errores comunes en la preparación de la solución, llene una taza de degustación con la solución vieja y otra con la solución nueva. Pruebe cada solución para verificar que sean idénticas en fuerza. A continuación, etiquete los tapones de los viales con una pegatina circular según el orden de presentación y un código de colores.Con el fin de hacer coincidir las etiquetas de los viales con las etiquetas del cuestionario de degustación. Empaque las muestras colocándolas en sus respectivos soportes. A continuación, prepare el cuestionario de sabor utilizando una escala de categorías para calificar la intensidad del sabor y una elección forzada para identificar la calidad del sabor de cada degustador.Por último, coloque etiquetas circulares del color y número apropiados junto a la muestra apropiada en el cuestionario de sabor. Proporcione al sujeto la caja de muestras, una botella de agua, un vaso vacío, un bolígrafo y un cuestionario de degustación que contenga entradas para 12 muestras. Explique el procedimiento de prueba e informe al sujeto que se le pedirá que califique tanto la intensidad como la calidad de cada catador.Hágales saber que es posible que no experimenten todas las cualidades. Comience la prueba pidiéndole al sujeto que se enjuague la boca dos veces con agua y la escupe en la taza provista. Pídales que viertan toda la muestra en su boca y la mantengan allí durante cinco segundos antes de escupir la solución en la taza.Dígales que no hagan gárgaras ni traguen la solución. A continuación, indique al sujeto que encierre en un círculo una de las 13 líneas verticales correspondientes a la intensidad de la muestra. En una escala de 0 a 12.De ninguna intensidad a extremadamente intensa. Y elija una sola cualidad para describir el sabor. A continuación, pida al sujeto que se enjuague la boca con agua dos veces antes de pasar a la siguiente muestra.Observe el tema degustando y calificando la muestra uno de agua. En caso de que la calificación se desvíe de ninguna intensidad y ningún sabor, repita las instrucciones del cuestionario antes de permitir que la prueba continúe. Después de que se hayan probado todas las muestras, revise el cuestionario terminado para ver si está completo.Por último, puntúa las puntuaciones de intensidad en una escala de 0 a 12 a partir de las líneas verticales que el sujeto encerró en un círculo. Y promediar las dos calificaciones de intensidad para cada cata para su posterior análisis. Los resultados de la prueba de sabor confirman la existencia de diferencias perceptivas de sabor para el compuesto amargo, feniltiocarbamida o PTC entre los sujetos agrupados por el genotipo del receptor TAS2R38.Las puntuaciones de la intensidad de PTC son significativamente diferentes en tres genotipos. La motivación detrás de este estudio fue tratar de evaluar o desarrollar un examen rápido en el punto de servicio que pudiéramos hacer en la clínica y que evaluara la función de este receptor que creemos que desempeña un papel en el desarrollo de la sinusitis crónica. La idea aquí es si podríamos usar esta prueba de sabor para predecir cuáles de nuestros pacientes tienen un alto riesgo de desarrollar sinusitis y, lo que es más importante, qué pacientes son buenos candidatos quirúrgicos para que realicemos nuestra cirugía de senos paranasales, o cuáles lo harán mal con nuestra cirugía de senos paranasales.Por lo tanto, estamos tratando de usar esta prueba de sabor para pronosticar la enfermedad sinal-nasal del paciente. Una vez que pasamos por todas las pruebas de sabor, lo confirmamos mediante el genotipado de los pacientes. Y como se puede ver en la figura tres, en su mayor parte el genotipo del paciente sigue el patrón de su fenotipo.Lo que significa que cuanto más amargo sabían, tendían a ser dominantes para este receptor. Sin embargo, hay algunos valores atípicos. Lo que demuestra que hay homocigotos funcionales, PAV/PAV, que dicen que no probaban PTC y, por otro lado, había algunos individuos AVI/AVI no funcionales que probaban PTC con amargura.Eso significa que, independientemente de la prueba de sabor que desarrollemos, si hay pacientes que no cumplen con nuestras expectativas, probablemente queramos confirmar la prueba de sabor mediante el genotipado de T2R38. Una vez dominado, el examen y la prueba de sabor se pueden realizar en menos de 30 minutos. Después de ver este video, debe comprender cómo realizar un examen oral, anotar evidencia de enfermedad y realizar una breve prueba de sabor.

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Conocimiento de los mecanismos moleculares que subyacen en la transducción del gusto ha disfrutado recientemente de importantes avances, en gran parte debido al uso de modelos animales. Sin embargo, la gran diversidad en el sentido del gusto y la especificidad entre los órdenes de mamíferos estudios en el tejido humano. Se describe una técnica de biopsia para recoger las células vivas el sabor de las papilas de la lengua humana.

Técnica para recopilar fungiformes (gusto) Las papilas de la lengua humana

Este video describe el ensayo de preferencia gustativa, un método conductual utilizado para medir la atracción o evitación hacia soluciones coloreadas que tienen un sabor diferente al evaluar la coloración abdominal de la mosca después de la ingestión de la sustancia preferida. El protocolo presentado demuestra el procedimiento utilizado para medir la preferencia de las moscas hacia soluciones de diferentes concentraciones de sacarosa.

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Quimiorrecepción oral de ácidos grasos y la asociación con la dieta y los grasos preferencias de alimentos puede permitir la identificación de los mecanismos implicados en el desarrollo de la obesidad y por qué los cambios en la dieta puede ser difícil para muchas personas.

Medición oral de ácidos grasos Umbrales, Percepción de grasa, alimentos grasos gusto, y papilas Densidad en Humanos

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El sabor dulce tiene un poderoso atractivo hedónico entre personas de todas las edades, especialmente los niños. En este trabajo se describe un método fiable y válido que puede utilizarse para determinar el nivel de dulzor más preferido, lo que lo convierte en una valiosa herramienta psicofísica para los científicos.

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El gusto es un proceso sensorial importante que facilita la atracción hacia sustancias beneficiosas y evita las sustancias tóxicas.  Este protocolo describe un ensayo de ingestión simple para determinar la preferencia gustativa de Drosophila por un compuesto químico determinado.

Ensayo Preferencia gusto por adulto<em&gt; Drosophila</em

Presentamos tres nuevos métodos para estudiar la codificación gustativa . Utilizando un animal simple, la polilla Manduca sexta ( Manduca ) , describimos un protocolo de disección, el uso de tetródos extracelulares para registrar la actividad de múltiples neuronas receptoras gustativas y un sistema para administrar y controlar pulsos de tastantes precisamente sincronizados.

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Este documento describe métodos para la preparación de tejidos, tinción y análisis de papilas gustativas completas fungiformes, circunvaladas y del paladar que producen consistentemente papilas gustativas enteras e intactas (incluidas las fibras nerviosas que las inervan) y mantienen las relaciones entre las estructuras dentro de las papilas gustativas y la papila circundante.

Tinción, visualización y análisis de papilas gustativas fungiformes, circunvaladas y del paladar

Las herramientas psicofísicas miden la funcionalidad del sistema de sabor tanto para fines de investigación como de evaluación de la salud. Este artículo describe un método para medir los umbrales de detección del gusto que puede determinar la concentración más baja de sacarosa, cloruro de sodio o glutamato monosódico que pueden probar personas de tan solo 6 años.

Método de seguimiento psicofísico para evaluar los umbrales de detección del gusto en niños, adolescentes y adultos: la prueba del umbral de detección del gusto (TDT)

Este trabajo ilustra un procedimiento estándar y la determinación del umbral por el índice R para evaluar la sensibilidad táctil lingual espacial utilizando una prueba de orientación de rejillas.

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Examen de gusto: Una prueba breve y validada

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