Cuantificación de lípidos abundancia y evaluación de la distribución de lípidos en Caenorhabditis elegans por Nilo rojo y aceite rojo O manchas

El objetivo general de estos métodos de tinción es cuantificar la abundancia de lípidos intracelulares y evaluar la distribución de lípidos entre diferentes tejidos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el metabolismo de los lípidos, como por ejemplo, cómo se regulan genética y bioquímicamente los lípidos y qué estados de enfermedad regulan la homeostasis de los lípidos. La principal ventaja de esta técnica es que es relativamente sencilla y económica de llevar a cabo.

Para llevar a cabo la tinción de lípidos rojos del Nilo, coloque lombrices en placas en un medio de crecimiento de nematodos o NGM sembrado con E. coli de registro tardío OP50 y cultive las lombrices a 20 grados Celsius hasta la etapa L4 temprana. Lave los gusanos con un milímetro de solución PBST y transfiera la suspensión del gusano a un tubo de microfuga de 1,5 mililitros. Centrifuga los gusanos a 560 veces la gravedad durante un minuto.