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DOI: 10.3791/66066-v
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Los investigadores nuevos en el campo de la epigenética encontrarán en CUT&Tag una alternativa significativamente más fácil que los ensayos ChIP. CUT&Tag ha beneficiado enormemente a los estudios epigenéticos en poblaciones de células raras y primarias, generando datos de alta calidad a partir de muy pocas células. Este protocolo describe la realización de ensayos H3K4me1 CUT&Tag en mioblastos de ratón aislados de músculos de las extremidades posteriores de ratón.
La investigación de nuestro grupo se centra en cómo se regula y mantiene la estructura del genoma y la transcripción en las células madre adultas del músculo esquelético, particularmente durante los cambios de sulfato, como el compromiso, la diferenciación y la tinasis de las células madre. Las células madre del músculo esquelético adulto, que comprenden solo el 1% de las células mononucleadas en el tejido muscular, presentan un desafío para los estudios de características de la cromatina que utilizan High-C, ChIPs y ATAC seq, debido a su escasez en suspensiones unicelulares obtenidas de la digestión muscular. La inmunoprecipitación de cromatina, ChIP, ha sido una herramienta clave para perfilar las características del genoma.
Una técnica de corte y etiquetado más simple y eficiente, desarrollada por el Dr. Steven Henikoff, a menudo supera a ChIP, especialmente en el estudio de la epigenética en poblaciones de células raras. Su facilidad de uso amplía la accesibilidad para los investigadores, incluidos los no expertos en epigenética.
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