Summary
Presentiamo un metodo chirurgico per indurre l'ipertrofia ventricolare destra e insufficienza in ratti.
Abstract
Insufficienza ventricolare destra (RV) indotta dal sovraccarico di pressione costante è un contributore importante alla morbosità ed alla mortalità in parecchi disordini cardiopolmonari. Affidabili e riproducibili modelli animali di insufficienza di RV sono pertanto autorizzati al fine di indagare i meccanismi della malattia e gli effetti di potenziali strategie terapeutiche. Fascia del tronco polmonare è un metodo comune per indurre l'ipertrofia RV isolato ma in generale, modelli precedentemente descritti non sono riusciti a creare un modello stabile di RV ipertrofia e scompenso.
Vi presentiamo un modello del ratto dell'ipertrofia RV indotto sovraccarico di pressione causata da tronco polmonare banding (PTB) che consente diversi fenotipi dell'ipertrofia RV con e senza insufficienza di RV. Usiamo un applicatore ligating modificate per comprimere una clip di titanio intorno al tronco polmonare di un diametro interno pre-impostato. Usiamo i diametri diversi clip per indurre le diverse fasi della progressione di malattia da lieve ipertrofia RV per insufficienza di RV scompensata.
L'ipertrofia RV si sviluppa costantemente in ratti sottoposti alla procedura di PTB e a seconda del diametro della clip bendaggio applicato, siamo in grado di riprodurre con precisione severities differenti di malattia che vanno da ipertrofia compensata a grave scompensata RV guasto con manifestazioni extra-cardiache.
Il modello presentato PTB è che un modello valido e robusto di sovraccarico pressorio indotto RV ipertrofia e scompenso che presenta parecchi vantaggi ad altri modelli banding tra cui elevata riproducibilità e la possibilità di indurre guasto RV grave e scompensata.
Introduction
Il ventricolo di destra (RV) può adattarsi ad un sovraccarico di pressione persistente. Nel tempo, tuttavia, meccanismi adattativi non riescono a sostenere la gittata cardiaca, dilata la RV e la RV non riesce alla fine. Funzione di RV è il fattore prognostico principale di parecchi disordini cardiopolmonari compreso ipertensione arteriosa polmonare (PAH), ipertensione polmonare tromboembolica (CTEPH) e varie forme di malattia di cuore congenita con un sovraccarico di pressione (o volume) di RV. Malgrado il trattamento intenso, RV fallimento rimane una causa predominante di morte in queste condizioni.
Come conseguenza la proprietà uniche1,2 e sviluppo embriologico3 del RV, conoscenza derivata da infarto di sinistra semplicemente non può essere estrapolato per insufficienza cardiaca destra. Modelli animali di insufficienza cardiaca destra sono pertanto necessari al fine di indagare i meccanismi di guasto di RV e potenziali strategie di trattamento farmacologico.
Ci sono sperimentale modelli di ipertensione polmonare indotta da SU5416 combinato con ipossia (SuHx)4 o monocrotaline (MCT)5, che indurre indebolimento RV secondario alla malattia nel vasculature polmonare. Questi modelli vengono utilizzati per valutare gli effetti terapeutici di farmaci che hanno come destinazione il sistema vascolare polmonare. Sia il SuHx che il modello MCT sono modelli non fissa postcarico del fallimento di RV. Di conseguenza, non è possibile concludere se un miglioramento nella funzione RV dopo un intervento è secondario al postcarico riducendo gli effetti vascolari polmonari o se è causato da effetti diretti sul camper. Inoltre, il modello MCT ha parecchi effetti extra cardiaci.
Nei modelli Bordatrici tronco polmonare sperimentale, il postcarico del camper è stato risolto a causa di una riduzione meccanica del tronco polmonare. Questo consente per l'indagine degli effetti cardiaci diretti di un intervento sulla RV indipendente da eventuali effetti vascolari polmonare6,7,8,9. Di solito, il bendaggio viene eseguito inserendo un ago lungo il tronco polmonare. Poi una legatura è collocata intorno l'ago e il tronco polmonare e legata con un nodo, e l'ago viene rimosso lasciando la sutura intorno al tronco polmonare. A seconda del calibro dell'ago, possono essere applicati diversi gradi di costrizioni, ma nonostante questo approccio viene ampiamente utilizzato, ha anche alcuni svantaggi. In primo luogo, il diametro del bendaggio non è esattamente lo stesso come il diametro esterno dell'ago come la legatura è legata intorno sia l'ago e il tronco polmonare. In secondo luogo, ci possono essere variazioni significative come strettamente il nodo è legato che lo rende difficile da riprodurre un certo grado di bendaggio. Questo porterà ad una variazione di diametro Bordatrici e quindi una maggiore dispersione. Infine, il nodo potrebbe allentarsi nel tempo.
Uno studio si applica una clip di tantalio chiusa a metà intorno al tronco polmonare10. Hanno compresso la clip intorno al tronco polmonare ad un'area interna di 1,10 mm2 e rispetto a ratti sottoposti a banding con una sutura utilizzando un ago da 18 G. Nel complesso, banding con il clip è stato associato con meno complicanze peri-chirurgiche e la varianza dei dati.
Sulla base dei principi descritti da Schou et al.11, abbiamo ulteriormente sviluppato e caratterizzato il tronco polmonare banding modello (PTB) di RV ipertrofia e scompenso. Qui, presentiamo la nostra esperienza nell'utilizzo di questo modello basato sui risultati di precedenti studi12,13. Per questo modello, una clip di titanio viene compressa intorno al tronco polmonare per un esatto diametro interno preimpostato, che può essere regolato al fine di indurre i fenotipi distinti di fallimento RV.
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Protocol
Tutti i ratti sono stati trattati secondo le linee guida nazionali danesi descritte nella legge danese sulla sperimentazione animale e decreto ministeriale sugli esperimenti sugli animali. Tutti gli esperimenti sono stati approvati dal comitato di revisione etica istituzionale e condotte in conformità con la legge danese per la ricerca sugli animali (numero di autorizzazione 2012-15-2934-00384, Ministero della giustizia danese).
1. adeguamento dell'applicatore Ligating
Nota: Il banding del tronco polmonare viene eseguito con un applicatore di clip ligating aperto modificate con una mascella angolato. L'applicatore è modificato con un meccanismo di arresto regolabile per interrompere la compressione quando le ganasce arriva una distanza esatta da altro. Quando un piccolo titanio legando il clip è stato compresso con l'applicatore modificata, un lume persiste tra le gambe della clip con un diametro specifico secondo la regolazione del meccanismo di arresto (Figura 1).
- Scegliere il diametro del banding desiderata, ad esempio, 0,6 mm.
- Regolare ligating applicatore fino a quando la distanza fra le ganasce è 1,0 mm quando completamente compressa. Questo lascia un lume di 0,6 mm, come le gambe di due clip hanno uno spessore di 0,2 mm ciascuno.
Figura 1: procedura il PTB. (A) il chirurgico strumenti utilizzati per la procedura PTB compreso applicatore ligating (freccia blu). Applicatore di clip (B) l'arresto regolabile meccanismo della legatura. Girando la ruota dentata (freccia blu) regolerà la posizione del perno (freccia gialla), che ferma la chiusura dell'applicatore quando le ganasce raggiungono una certa distanza gli uni dagli altri. La distanza corrisponde a due volte lo spessore delle gambe della clip più il diametro interno della clip, quando la clip è compresso e può essere calibrata utilizzando ad esempio un ago con un diametro esterno noto. (C) l'applicatore comprime una clip di titanio per un esatto diametro interno pre-specificato dall'adeguamento dell'applicatore. Diametro (D) all'interno della clip compressi possa essere regolato per indurre diversi livelli di gravità di RV ipertrofia e scompenso. Per i dati presentati, un diametro interno di 1,0 mm è stato utilizzato per indurre l'ipertrofia delicata di RV, un diametro interno di 0,6 mm è stato utilizzato per indurre insufficienza moderata di RV e un diametro interno di 0.5 mm è stato utilizzato per indurre il guasto severo di RV. (E) la clip dopo applicazione intorno al tronco polmonare. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
2. preparazione del ratto
Nota: Altri regimi di analgesici possono essere applicati.
- Utilizzare ristallo di ratto Wistar pesa circa 100 – 120 g. Al fine di mantenere la temperatura corporea durante l'intervento chirurgico, è necessario utilizzare un termoforo coperto.
- Per la chirurgia, utilizzare un ventilatore meccanico impostato su un tidal volume di circa 1,75 mL e frequenza respiratoria pari a 75 min.
- Anestetizzare il ratto con sevoflurane (7% mix in 1,5 L di O2) in una camera di induzione per 5 minuti. Intubare il ratto utilizzando una cannula IV 17 G, dove il 2 mm distale dell'ago sono state tagliate in modo che il catetere morbido coprire la punta. Rimuovere l'ago e collegare la cannula al ventilatore.
- Posto il ratto sul dorso il termoforo. Assicurarsi che l'intubazione è corretto osservando i movimenti del torace. Questi dovrebbero essere senza differenze di lato e in pace con il ventilatore.
Nota: Assenza di movimenti del torace, contrazioni addominali e inflazione dello stomaco nella parte superiore sinistra dell'addome sono segni di un tubo fuori luogo. Rimuovere la cannula, rimettere il ratto nella camera di induzione e ri-intubarla. - Dopo intubazione corretta, ridurre il sevoflurane per concentrazione di manutenzione (mix di 3,5% di O2, 1,5 L/min) e fissare le zampe del ratto per il rilievo di riscaldamento.
- Confermare amputate prober controllando i riflessi di ritiro delle estremità usando una pinza per spremere le zampe del ratto.
- Iniettare i ratti con buprenorfina (0,1 mg/kg per via sottocutanea (s.c.)) e carprofene (5 mg/kg s.c.) per alleviare il dolore post-operatorio.
- Radere il torace e disinfettare con clorexidina.
3. isolamento del tronco polmonare
- Con un paio di forbici, praticare un'incisione di 2 cm in pelle lungo la parte centrale dello sterno. Identificare i principali muscoli pettorali e tagliare il suo attacco sternale. Identificare la 2nd, 3rde 4th costa sottostante.
- Facoltativamente, è possibile afferrare il costa 2nd con una pinza di fissaggio, metta una sutura (4-0, multifilamento, assorbibile) tutto il costa 2nd dallo spazio intercostale 1st alla parte mediale inferiore dello spazio intercostale 2nd . Fare un nodo costante al fine di legare l'arteria toracica anteriore.
Nota: Questo può essere utile se l'emorragia dall'arteria toracica anteriore è un problema ricorrente. - Tagliare i 4th, 3rde costa 2nd vicino allo sterno con un paio di forbici e attentamente sezionare i muscoli intercostali fino a quando è stato eseguito un thoracotomy di sinistra completo. Se qualsiasi emorragia dall'arteria toracica anteriore si verifica, comprimere con un pean e legare l'arteria.
- Inserire un divaricatore tra lo sterno e la costae e aprirlo per ottenere un buon campo di funzionamento. Nella parte superiore del campo è il timo che copre l'aorta e il tronco polmonare. Attentamente sollevare il timo utilizzando un pean e girarla verso l'alto al fine di esporre l'aorta e il tronco polmonare sottostante.
-
Guidare la punta di un piccolo hooklet chirurgica con un angolo di 85° attraverso il seno pericardico trasversale situato dietro l'auricola sinistra. Tirare a metà strada attraverso il seno e guidare la punta del gancio verso l'alto fino a quando non appare fra l'aorta ascendente e tronco polmonare.
- Rimuovere qualsiasi tessuto connettivo che copre la punta con una forbice iris al fine di separare il tronco polmonare dall'aorta ascendente.
- Ripetere il passaggio con un gancio più grande (opzionale).
- Guida un forcipe angolato muscolo intorno al tronco polmonare attraverso il passaggio fatto con il hook(s). Afferrare l'estremità di una legatura di circa 10 cm (4-0, multifilamento) e tirare la metà della legatura indietro attraverso il passaggio. Ora il tronco polmonare è separato dall'aorta ascendente e può essere controllato tramite la legatura intorno ad esso.
4. applicazione della Clip
- Caricare l'applicatore ligating regolato con una clip. Guidare con attenzione una delle ganasce e una gamba del clip però il passaggio intorno al tronco polmonare. Utilizzare la legatura per tirare delicatamente il tronco polmonare verso l'alto e nella forcella della clip.
- Quando il tronco polmonare è nella forcella della clip e le due punte delle gambe clip sono liberi di tutto il tessuto connettivo, comprimere il clip con l'applicatore per applicare il banding.
- Osservare come la RV dilata immediatamente in risposta al banding e rimuovere la legatura.
5. chiusura del torace
- Rimuovere il pean da timo e riposizionare il timo nella sua posizione naturale. Rimuovere il retrattore.
- Chiudere il torace in tre strati: lo strato dell'intercostale, il grande muscolo pettorale e la pelle con sutura (4-0, multifilamento, assorbibile). Iniettare 2 mL di salino s.c. per sostituire il liquido perdita durante l'intervento chirurgico.
- Spegnere il sevoflurano ed e tenere il ratto sul ventilatore (1,5 L di O2) fino a quando comincia a respirare spontaneamente. Quindi, estubare il ratto.
- Trattare i ratti con buprenorfina nell'acqua potabile per i tre giorni seguenti14 o applicare un protocollo simile analgesico. Dopo tre giorni, i ratti hanno recuperato e sono senza disagio.
- Nelle settimane successive, il benessere dei ratti e dei possibili effetti negativi dovrebbe essere valutato su una base quotidiana. La guarigione della ferita dalla toracotomia dovrebbe ricevere un'attenzione particolare durante la prima settimana al fine di rilevare eventuali segni di infezione o insufficienza delle cicatrici. Se i ratti mostrano segni di omissione di prosperare tra cui pelo ispido, difficoltà motorie, problemi respiratori e perdita di peso, devono essere strettamente monitorati ed eutanasia se perdono più del 20% del loro peso corporeo o sviluppare fulminante respiratoria insufficienza.
6. sham chirurgia
- Eseguire un intervento chirurgico di sham seguendo tutti i passaggi sopra tranne per l'applicazione della clip (passaggio 4).
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Representative Results
Utilizzando la procedura descritta di PTB negli studi precedenti dal nostro gruppo12,13, abbiamo indotto ipertrofia RV (PTB mite) dalla fascia con un clip di 1,0 mm, un moderato grado di insufficienza di RV (PTB moderato) di banding con una clip di 0,6 mm e un grado severo di guasto di RV (PTB grave) dalla fascia con un clip di 0,5 mm. I ratti sottoposti alle manifestazioni extra cardiache sviluppate Bordatrici severe di guasto di RV tra cui insufficienza epatica e ascite (Figura 5E). Tutti i ratti sono stati valutati sette settimane dopo il PTB e ratti sham ha subito la stessa procedura solo senza l'applicazione della clip. Mortalità perioperatoria era meno di 1 a 6. Sette settimane il tasso di sopravvivenza era 80% per i ratti sottoposti a banding grave e quasi il 100% in ratti sottoposti a lieve o moderata bandeggio o sham chirurgia.
Per la valutazione degli effetti della procedura PTB, abbiamo usato l'ecocardiografia con risonanza magnetica cardiaca (MRI) per valutare i volumi di RV e gittata cardiaca. Escursione sistolica tricuspide aereo anulare (TAPSE) è stata misurata come la distanza del piano anulare tricuspide con la contrazione di RV nella vista del quattro-alloggiamento apicale. Una media di tre cicli fuori respirazione è stata utilizzata come un valore rappresentativo. Volume end-diastolic (EDV) di RV e volume telesistolico (ESV) sono stati valutati da disegno dell'endocardio in una serie di immagini di asse corto attraverso la RV ottenuti tramite MRI per ogni ratto e frazione di eiezione di RV (EF) calcolato come EF = (EDV-ESV) / EDV. Gittata cardiaca è stata misurata tra le valvole polmonare e la clip utilizzando una sequenza di MRI di contrasto di fase. Registrazioni digitali delle pressioni di RV sono state ottenute da un catetere micro suggerimento installato nel camper prima di eutanasia. Ulteriori dettagli dei metodi sono state descritte in precedenza12. Ipertrofia di RV è stata valutata come il rapporto tra il peso di RV diviso per il peso del ventricolo sinistro (LV) plus setto e come il peso del camper diviso per la lunghezza della tibia per correggere la dimensione del ratto. Tutti i metodi sono stati applicati come descritto in precedenza12.
In una settimana, le pressioni elevate di RV e RV disfunzione evidente da una diminuzione nel sangue arterioso e TAPSE aveva sviluppato nei ratti PTB rispetto al sham ratti azionati. Di conseguenza, gli interventi o trattamenti farmacologici possono essere avviati già a questo punto del tempo se uno si propone di indagare gli effetti in caso di errore RV stabilito. Dopo altre sei settimane, RV pressione era ulteriormente aumentata. Le differenze del fenotipo moderato vs la RV grave guasto erano ancor più pronunciate indicato tramite una diminuzione graduale nella gittata cardiaca sia TAPSE con la severità aumentata del banding (Figura 2 e Figura 3). Dettagliata differenze emodinamiche tra PTB grave ratti e mite PTB 4 settimane dopo la chirurgia sono state pubblicate dal nostro gruppo previousely15.
La procedura PTB ha anche causato dilatazione RV evidente tramite un aumento in RV EDV e RV ESV nei ratti PTB moderati rispetto al sham ratti operati e nei ratti PTB severi rispetto al PTB di moderata e ai sham. Una diminuzione graduale in RV EF è stato anche visto (Figura 4).
Lo sviluppo dell'ipertrofia di RV è stato associato all'entità del sovraccarico di pressione applicato dalla clip. Il rapporto tra la RV sopra il LV plus setto peso aumentato gradualmente dai ratti con un lieve banding con una clip di 1,0 mm sopra ratti fasciato con una clip di moderata 0,6 mm ai ratti fasciato con una clip di grave 0,5 mm. Risultati analoghi sono stati osservati per il peso di RV corretto per la dimensione del ratto dividendo con la lunghezza della tibia. L'ipertrofia è stato anche visto come un aumento del cardiomyocyte area trasversale nei ratti PTB rispetto al sham ratti azionati. A parte l'ipertrofia dei cardiomiociti, il sovraccarico di pressione indotto anche altri cambiamenti morfologici del RV associata a insufficienza di RV compreso fibrosi RV. In ratti sottoposti a banding grave, insufficienza di RV scompensata è stata indotta. Questo fenotipo è stato caratterizzato da segni di insufficienza con le versioni precedenti, tra cui congestione epatica, vista come una colorazione scura del fegato. Congestione epatica era solitamente accompagnata da ascite (Figura 5).
Figura 2: effetti del PTB una settimana e sette settimane dopo la procedura. (A) in ventricolare (RV) (B) la pressione sistolica del sangue arterioso e (C) tricuspide aereo anulare sistolica escursione (TAPSE) misurato una settimana dopo falsità o operazione di PTB con un moderato o un bendaggio severo rispettivamente. (D, E e F) La stessa misura sette settimane dopo le procedure e l'ulteriore sviluppo di RV errore12. Dati presentati come media ± SEM. One-way ANOVA con analisi post-hoc di Bonferroni. * * p < 0.01, * * * p < 0,001, e * * * p < 0,0001 PTB vs sham e moderato PTB grave vs PTB. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3: effetti della procedura PTB valutata da ecocardiografia. Vista di alloggiamento rappresentante quattro (A) A e (B) misure di integrale di tempo di velocità (VTI) nel tronco polmonare (pannello superiore) ed escursione sistolica tricuspide aereo anulare (TAPSE) (pannello inferiore) in un ratto di sham operati. Immagini simili (C e D) per un ratto PTB sottoposti alla fascia moderata. Tutte le immagini sono sette settimane dopo l'operazione finta o delle strisce. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4: imaging a risonanza magnetica di ratti PTB. Risonanza magnetica cardiaca (MRI) del PTB e sham operati ratti. (A), rappresentante quattro camera immagini (pannello superiore) e asse corto panorami (pannello inferiore) di ratti sham (a sinistra) e PTB ratti con un grado moderato di guasto di RV (a destra). Nel ratto PTB, le alte pressioni di RV causato sporgenti (asterisco blu) setto. (B) il PTB procedura indotta da RV dilatazione evidente tramite un aumento in volume di RV fine diastole (EDV) e volume sistolico di RV fine (ESV). (C) RV frazione di eiezione (EF) è diminuito di12. I dati presentati come media ± SEM. One-way ANOVA con alberino-hoc analisi di Bonferroni. * p < 0,05, * * p < 0.01, e * * * p < 0,0001 PTB vs sham e moderato PTB grave vs PTB. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 5: dati anatomici e istologia. Ipertrofia di RV misurata come RV (A) diviso per il peso di RV LV plus setto e (B) diviso per lunghezza tibia dai ratti con l'ipertrofia RV delicata, moderata RV guasto e guasto severo di RV sette settimane dopo la procedura PTB. (C) immagini rappresentative delle sezioni istologiche macchiate con eosine hematoxyline per la misurazione del cardiomyocyte cross area sezionale e (D) percentuale rosso analizzati sotto luce polarizzata per fibrosi da ratti sham (a sinistra) e PTB ratti con insufficienza moderata RV (a destra). (E) A fegato sano (a sinistra) e un fegato scolorito con congestione (a destra) da un ratto PTB con grave RV fallimento12,13. Dati presentati come media ± SEM. One-way ANOVA con analisi post-hoc di Bonferroni. * * p < 0.01 e * * * p < 0,0001 PTB vs sham, PTB moderata vs PTB mite e moderato PTB grave vs PTB. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
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Discussion
Descriviamo un metodo accessibile e altamente riproducibile del tronco polmonare bendaggio utilizzando un applicatore ligating modificate per comprimere una clip di titanio intorno al tronco polmonare. Regolando l'applicatore per comprimere il clip per diametri interni differenti, possono essere indotta fenotipi distinti di RV ipertrofia e scompenso tra cui insufficienza grave di RV con manifestazione extra cardiaco di scompenso.
Anche se semplice, il protocollo contiene alcuni passaggi critici. D'importanza, i ratti non possono essere troppo grandi quando subiscono la procedura PTB. Nella nostra esperienza, puledri di ratto Wistar 100 – 120 g di pesatura sono adatte per la procedura. In più grandi ratti, applicazione di un bendaggio grave può portare a RV insufficienza acuta e la morte. Altri studi6,7,8,9,10,16 hanno utilizzato principalmente più grandi ratti (160 – 260 g) ma anche diametri maggiori delle loro rispettive fasce (1.27 – 1,65 mm).
L'applicazione del bendaggio di minore gravità può anche spiegare che il relativo modesto aumenta nelle pressioni di RV riportate da altri gruppi. Banding con un G 18 ago (1,27 mm) conduce alle pressioni sistoliche di RV nella gamma di 70-90 mmHg6,7,8,9. In uno studio6, questo non era sufficiente a causare fibrosi RV o ridurre la gittata cardiaca. Qui, segnaliamo le pressioni di RV di circa 90 mmHg per un bendaggio moderata e 110 mmHg per un bendaggio severa. Con un bendaggio grave, siamo anche stati in grado di creare un fenotipo di insufficienza di RV scompensata con manifestazioni extra-cardiache tra cui epatico congestione e ascite12. Tronco polmonare banding di legatura usando un ago di 20G (0,902 mm) causato fibrosi del fegato, noce moscata-come congestione del fegato e l'ascite, ratti Sprague Dawley16 nonostante la costrizione relativamente mite rispetto al nostro studio. Ciò può essere spiegato da ceppi differenti del ratto risponde in modo diverso per il banding. Ci sono differenze significative per quanto riguarda il metabolismo17, tono adrenergico e frequenza cardiaca18 tra le razze del ratto. Anche all'interno lo stesso ceppo di ratto, varie caratteristiche tra cui tasso di crescita possono variare con diversi fornitori19. Questo dovrebbe sempre essere preso in considerazione. Per il ceppo di ratto specifico utilizzato, pertanto è fondamentale che vengono eseguiti studi pilota ben progettati al fine di determinare il diametro del bendaggio e il tempo di follow-up necessario per il fenotipo di fallimento RV desiderato sviluppare. Il modello clip potenzialmente utilizzabili in neonati di ratto in contrasto con la legatura tecnica precedentemente utilizzato20, ma non si ha esperienza con questo e le stesse considerazioni di cui sopra si applica prima di avviare uno studio.
Il modello PTB ha alcune limitazioni. In primo luogo, l'occlusione prossimale molto dalla clip intorno al tronco polmonare rappresenta le condizioni di stenosi pulmonic o CTEPH più che lo stringimento distale delle arterie polmonari più piccole vista in PAH. L'adattamento del camper per il postcarico aumentato può variare a seconda della posizione del obstruction(s)21. In secondo luogo, l'applicazione della clip durante l'intervento provoca un aumento molto improvviso in postcarico RV diverso dall'aumento graduale nella resistenza vascolare polmonare in PAH. La procedura è, tuttavia, eseguita in ristallo di ratto (100-120 g) dando luogo a un postcarico RV progressivamente aumentata rispetto al peso corporeo con la crescita degli animali. Durante il periodo di sette settimane dopo la chirurgia, il peso corporeo dei ratti aumenta circa quattro volte e quindi relativo postcarico RV aumenta proporzionalmente inducendo una malattia progressiva sviluppo6.
Utilizzando un applicatore ligating modificate e una clip di titanio per bendaggio del tronco polmonare, siamo stati in grado di indurre insufficienza di RV. Il metodo presenta diversi vantaggi tra cui elevata riproducibilità e la possibilità di creare livelli di gravità differenti di malattia da lieve ipertrofia RV per insufficienza di RV scompensata regolando il diametro del clip bendaggio. Modifica del diametro di 0,1 mm ha provocato fenotipi distinti del fallimento di RV che varia da moderato e compensato mancato RV grave e scompensata fallimento RV dimostrando precisione di questo tronco polmonare bendaggio metodo.
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Disclosures
Gli autori non hanno nulla a rivelare
Acknowledgments
Questo lavoro è stato supportato dal Consiglio danese per la ricerca indipendente [11e108410], il danese Heart Foundation [12e04-R90-A3852 e 12e04-R90-A3907] e la Novo Nordisk Foundation [NNF16OC0023244].
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17 G IV Venflon Cannula | Becton Dickinson, US | 393228 | Distal 2 mm of the needle have been cut off |
| 1 mL syringe + 26 G needle | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 absorbable multifilament suture | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, violet, 5x18" |
| 4-0 multifilament ligature | Covidien, US | LL-221 | Polysorb, violet, 98" |
| Buprenorphine | Indivior UK Limited | Local procurement, Temgesic 0.3 mg/mL | |
| Carprofene | ScanVet, DK | 27693 | Norodyl 50 mg/mL |
| Chlorhexidine | Faaborg Pharma, DK | Local procurement | |
| Contractor | Aesculap, Germany | BV010R | Blunt, self retaining, 70 mm |
| Ear Hooklet | Lawton, Germany | 66-0261 | Small, 14 cm, tip modified to an angle of 85° |
| Eye gel | Decra, UK | Lubrithal, Local procurement | |
| Forceps, Delicate Tissue | Lawton, Germany | 09-0020 | |
| Forceps, Dissecting | Lawton, Germany | 09-0013 | 1 regular, 1 with tip modified to an angle of 100° |
| Gas Anesthesia System | Penlon Limited, UK | SD0217SL | Sigma Delta Vaporizer |
| Hair trimmer | Oster | 76998-320-051 | |
| Horizon Open Ligating Clip Applier | Teleflex, US | 137085 | Modified with adjustable stop mechanism |
| Horizon Titanium Clips | Teleflex, US | 001200 | Small |
| Induction chamber | N/A | ||
| Iris Scissor | Lawton, Germany | 05-1450 | |
| Iris Scissor | Aesculap, Germany | BC060R | |
| Mechanical ventilator | Ugo Basile, Italy | 7025 | |
| Microscissor | Lawton, Germany | 63-1406 | |
| Microscope | Carl Zeiss, Germany | 303294-9903 | |
| Needle Holder | Lawton, Germany | 08-0011 | TITEGRIP |
| Pean | Lawton, Germany | 06-0100 | Halsted-Mosquito, straight |
| Pro-Optha | Lohmann & Rauscher, Germany | 16515 | Tampon |
| Saline 9 mg/mL | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, US | Sevorane, Local procurement | |
| Surgical hook | Lawton, Germany | 51-0665 | Cushing, 19 cm, tip modified to an angle of 90° |
| Surgical Tape | 3M, US | 1530-0 | Micropore |
| Temperature Controller | CMA Microdialysis; Sweden | 8003760 | CMA 450 |
| Weighing machine | VWR, US | ||
| Wistar rat weanlings | Janvier Labs, France | RjHan:WI, 100-120 g |
References
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