Summary
우리는 바로 심 실 비 대와 쥐에 있는 실패를 유발 하는 수술 방법 제시.
Abstract
오른쪽 심 실 (RV) 실패 지속적인된 압력 과부하에 의해 유도 된 병 적 상태와 여러 심폐 질환 사망률에 큰 기여입니다. RV 실패의 안정적이 고 재현 가능한 동물 모델은 따라서 질병 메커니즘 및 잠재적인 치료 전략의 효과 조사 하기 위하여 보증 된다. 폐 간선의 밴딩 고립 된 RV 비 대를 유발 하는 일반적인 방법 이지만 일반적으로 앞에서 설명한 모델 RV 비 대 및 실패의 안정적인 모델 만들기에 성공 하지 않은.
우리는 압력 과부하 유발 RV 비 대의 쥐 모델 제시 RV 비 대와 RV 실패 없이 다른 고기 수 있도록 폐 간선 구간 (PTB)에 의해 발생. 수정된 ligating 클립 내용 미리 설정된 내경을 폐 트렁크 주위 티타늄 클립을 압축 하기 위해 사용 합니다. 다른 클립 직경 보상된 RV 실패를 온화한 RV 비에서 질병 진행의 다른 단계를 유도 하기 위해 사용 합니다.
RV 비 PTB 절차 및 적용된 구간 클립의 직경에 따라 복종 하는 쥐에 지속적으로 개발, 우리 정확 하 게 보상된 비 대에서 심한 보상된 RV에 이르기까지 다른 질환 심각도 재현할 수 있습니다. 여분 심장 발현으로 실패입니다.
제시 PTB 모델은 압력 과부하의 유효 하 고 강력한 모델 유도 RV 비 및 높은 재현성 및 유도 하는 심각 하 고 보상 RV 실패의 가능성을 포함 하 여 다른 구간 모델에 몇 가지 장점이 실패 합니다.
Introduction
오른쪽 심 실 (RV) 영구 압력 과부하에 적응할 수 있습니다. 그러나 시간에,, 적응 메커니즘 RV 열립니다 심장 출력을 유지 하기 위해 실패 하 고 결국 rv가 실패 합니다. RV 함수는 폐 동맥 고혈압 (PAH), 압력 (또는 볼륨) 오버 로드와 함께 선 천 성 심장 질환의 다양 한 형태, thromboembolic 폐 고혈압 (CTEPH), 등 여러 가지 심폐 질환의 주요 예 후 요인 RV의 강렬한 치료에도 불구 하 고 RV 실패는 이러한 조건에서 사망의 주된 원인은 남아 있다.
독특한 속성1,2 와 embryological 개발3 RV의 결과로 왼쪽된 심장 마비에서 파생 된 지식은 단순히 오른쪽 심장 마비를 추정 수 없습니다. 오른쪽 심장 마비의 동물 모델 따라서 RV 실패와 잠재적인 약물 치료 전략의 메커니즘을 조사 하기 위하여 필요 합니다.
실험적인 있다 SU5416에 의해 유도 된 폐 고혈압의 모델 hypoxia (SuHx)4 또는 결합 monocrotaline (MCT)5는 RV 실패 보조 폐 맥 관 구조에 질병을 유발. 이 모델은 폐 맥 관 구조 대상 약물의 치료 효과 평가 하는 데 사용 됩니다. SuHx와 MCT 모델 RV 실패의 고정 되지 않은 afterload 모델은. 따라서, 그것은 결론 내정간섭 후에 RV 기능 개선 보조 afterload 폐 혈관 효과 감소 하는 경우 또는 RV에 대 한 직접 효과 의해 발생 하는 경우 수 또한, MCT 모델 몇 여분 심장 효과 있다.
실험 폐 간선 구간 모델, RV의 afterload 폐 간선의 기계적 수축으로 인해 고정 됩니다. 이로써 RV에 개입의 직접 심장 효과의 조사에 대 한 모든 폐 혈관 효과6,7,,89에서 독립. 일반적으로, banding 폐 트렁크 따라 바늘을 삽입 하 여 수행 됩니다. 그럼 한 합자 바늘 및 폐 트렁크 주위에 배치 하 고 매듭으로 묶어 떠나 폐 트렁크 주위 봉합 바늘을 제거. 바늘의 계기에 따라 constrictions의 다른 정도 적용할 수 있습니다, 하지만이 이렇게 널리 이용 되 고에 불구 하 고 몇 가지 단점이 있습니다. 첫째, banding의 직경은 정확 하 게는 동일 바늘의 외부 직경으로 합자는 바늘 및 폐 트렁크 연결 합니다. 둘째, 얼마나 매듭 연결 banding의 어느 정도 재현 하기 어려운 중요 한 변동 있을 수 있습니다. 이 이어질 것입니다 변형 구간 직경 및 그로 인하여 더 큰 분산. 마지막으로, 매듭 시간이 지남에 느슨한 올 수 있습니다.
한 연구에는 폐 트렁크10주위 반 폐쇄 탄탈 클립을 적용 됩니다. 그들은 1.10 m m2 의 내부 영역에 폐 간선 주위 클립을 압축 하 고 18 G 바늘을 사용 하 여 봉합으로 띠를 받게 하는 쥐에 비해. 전반적으로, 클립으로 밴딩 적은 맞춰서 수술 합병증 및 데이터 편차와 연관 되었다.
Schou에서 설명 하는 원칙에 따라 외11, 우리 더 개발 하 고 폐 간선 (PTB) 모델 RV 비 대 및 실패의 밴딩 특징. 여기, 우리는 이전 연구12,13에서 결과에 따라이 모델을 사용 하 여 우리의 경험을 제시. 이 모델에 대 한 티타늄 클립 별개 RV 실패 고기를 유도 하기 위하여 조정 될 수 있습니다는 정확한 사전 내부 직경 폐 트렁크 주위 압축 됩니다.
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Protocol
모든 쥐 동물 실험 및 동물 실험에 장관급 순서에 덴마크 법률에 설명 된 덴마크 국가 지침 서에 따라 치료 했다. 모든 실험 기관 윤리 검토 위원회에 의해 승인 되었고 동물 연구 (승인 번호 2012-15-2934-00384, 정의의 덴마크 내각)에 대 한 덴마크 법률에 따라 실시.
1입니다. Ligating 클립 내용 조정
참고: 폐 간선의 밴딩 각도 턱 수정된 오픈 ligating 클립 내용 수행 됩니다. Applier 턱 서로 정확한 거리에 도달 하는 때 압축을 중지 하는 조정 가능한 정지 메커니즘 수정 됩니다. 클립을 ligating 작은 티타늄 수정된 내용으로 압축 하는 경우 중지 메커니즘 (그림 1)의 조정에 따라 특정 직경 클립의 다리 사이 루멘 유지 합니다.
- 예를 들어 원하는 banding의 직경을 선택, 0.6 m m.
- 턱 사이의 거리는 1.0 m m 완벽 하 게 압축 될 때까지 ligating 클립 내용을 조정 합니다. 이 두 클립 다리는 0.2 m m의 두께 0.6 m m의 루멘 단풍.
그림 1: The PTB 절차. (A)는 수술 악기 PTB 프로시저 ligating 클립 내용 (파란색 화살표)를 포함 하 여 사용. (B) 조정 가능한 정지 메커니즘은 ligating의 내용 클립. 선회 章 (파란색 화살표) 턱 서로 일정 거리 도달 applier의 폐쇄를 중지는 (노란색 화살표), 핀의 위치를 조정 합니다. 클립 압축 되 고 알려진된 외부 직경을 가진 예를 들면 바늘을 사용 하 여 측정 될 수 있다 거리 두 클립의 다리는 클립의 안쪽 직경의 두께에 해당 합니다. (C) applier 티타늄 클립 applier의 조정에서 미리 지정 된 정확한 내경을 압축 합니다. (D) 내부 직경 압축 된 클립의 RV 비 대 및 실패의 다른 심각도 유도 하기 위하여 조정할 수 있습니다. 제시 하는 데이터에 대 한 1.0 m m 내경 가벼운 RV 비 대를 유도 하기 위해 사용 되었다, 적당 한 RV 실패를 유발 하는 내부 직경 0.6 m m의 사용 되었다 그리고 0.5 m m 내경 사용 되었다 심각한 RV 실패를 유발 하. (E) 폐 트렁크 주위 신청 후 클립. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
2입니다. 쥐의 준비
참고: 진통제의 기타 regimens는 적용할 수 있습니다.
- Wistar 쥐 weanlings 무게 약 100-120 g를 사용 합니다. 수술 도중 체온을 유지 하기 위해 덮여 난방 패드를 사용 합니다.
- 수술, 기계 호흡의 약 1.75 mL tidal volume을 분 당 75의 호흡 속도 설정 사용 하 여.
- 5 분 동안 유도 챔버에서 sevoflurane (O2의 1.5 L에 7% 혼합)와 쥐를 anaesthetize. 바늘의 원심 2 m m 팁 커버 부드러운 카 테 터에 대 한 순서로 잘라 있다 17 G IV cannula를 사용 하 여 쥐 넣어야 바늘을 제거 하 고 호흡기에는 정 맥을 연결.
- 쥐가 열 패드에 그것의 뒤에 놓습니다. 흉부의 움직임을 관찰 하 여는 삽 관 법 올바른지 확인 하십시오. 이들을 해야 한다 측면 차이 없이 호흡기와 속도.
참고: 흉부, 복 부 수축 및 상단 왼쪽된 복 부에 있는 위장의 인플레이션의 움직임의 부재는 잃어버렸던된 튜브의 징후입니다. 정 맥을 제거 하 고 다시 유도 챔버에에서 쥐를 넣어 다시 넣어야. - 올바른 삽 관 법, 후 유지 관리 농도에 sevoflurane을 줄일 (O2, 3.5% 믹스 1.5 L/min)가 열 패드를 쥐의 발을 수정.
- 쥐의 앞 발을 짜 내는 집게를 사용 하 여 사지의 철수 반사를 확인 하 여 prober anesthetization를 확인 합니다.
- 쥐 buprenorphine 주입 (0.1 mg/kg 피하 (사우스 캐롤라이나)) 및 carprofene (5 mg/kg 사우스 캐롤라이나) 수술 후 통증을 완화 하.
- 가슴을 면도 하 고 액체와 소독.
3입니다. 폐 간선의 격리
- 가 위 한 쌍, 흉 골의 중간 부분을 따라 피부에 2 cm 절 개를 확인 합니다. 큰 가슴 근육을 식별 하 고 sternal 첨부 파일을 잘라. 2차, 3rd, 그리고 4번째 늑 골 아래를 식별 합니다.
- 필요에 따라 2차 있는 공간의 더 낮은 중간 부분에 1성 있는 공간에서 2nd 코스타 주위 봉합 (4-0, multifilament, 흡수)을 넣어 고정 집게와 2nd 코스타를 잡아. 앞쪽 흉부 동맥 선 위해 회사 매듭을 묶어.
참고: 이 재발 문제는 앞쪽 흉부 동맥에서 출혈 하는 경우에 유용할 수 있습니다. - 4일, 3rd, 그리고 흉 골 가까운 2nd 코스타가 고 신중 하 게 완전 한 왼쪽된 thoracotomy 수행 되었습니다 때까지 있는 근육 해 부. 앞쪽 흉부 동맥에서 출혈이 발생 하는 경우는 pean로 압축 하 고 동맥 선.
- 흉 골 사이 costae 견인을 삽입 하 고 좋은 작동 분야를 엽니다. 필드의 맨 thymus 대동맥 및 폐 트렁크입니다. 조심 스럽게 thymus는 pean를 사용 하 여 들어올린 대동맥 및 폐 트렁크 아래 노출 하려면 위쪽으로 플립.
-
왼쪽된 심 방 부속 기에 뒤에 있는 가로 pericardial 공동 통해 85 ° 각을 가진 작은 수술 hooklet의 팁 가이드. 부 비 동을 통해 중간 당겨 고 오름차순 대동맥 그리고 폐 간선 사이 때까지 위쪽으로 귀 걸이의 팁을 안내 합니다.
- 오름차순 대동맥에서 폐 트렁크를 분리 하기 위하여는 아이리스가 위 끝을 덮고 있는 결합 조직 제거 합니다.
- (선택 사항) 더 큰 걸이를 가진 단계를 반복 합니다.
- 가이드는 hook(s)로 만든 통로 통해 폐 트렁크 주위 각된 근육 집게. 끝을 잡아 약 10 cm 합자 (4-0, multifilament) 및 풀의 합자의 통로 통해 다시. 이제 폐 트렁크 오름차순 대동맥에서 분리 하 고 그것의 주위 합자에 의해 통제 될 수 있다.
4입니다. 클립의 신청
- 클립 조정된 ligating 클립 내용을 로드 합니다. 신중 하 게 가이드 문 턱의 한 클립의 한쪽 다리 하지만 폐 트렁크 주위 통로. 합자를 사용 하 여 부드럽게 당겨 폐 트렁크 위쪽으로 클립의 포크로.
- 클립의 포크에 폐 간선은 클립 다리의 두 끝은 어떤 결합 조직 무료 때 밴딩을 적용 하 내용으로 클립을 압축.
- 어떻게 RV 즉시 열립니다 banding에 대 한 응답을 관찰 하 고 합자를 제거.
5입니다. 흉부의 폐쇄
- pean thymus에서 제거 하 고 thymus 그것의 자연적인 위치에 위치. 견인 기를 제거 합니다.
- 3 개의 층에 흉부를 닫습니다: 있는 레이어, 주요 가슴 근육 및 피부 봉합 (4-0, multifilament, 흡수)를. 수술 도중 분실 된 액체를 대체 하기 위하여 염 분 사우스 캐롤라이나의 2 개 mL를 주사.
- sevoflurane을 해제 하 고 계속 저절로 호흡 시작 하는 때까지 인공 호흡기 (o 2의 1.5 L)에 쥐. 다음, extubate는 쥐입니다.
- 다음 3 일14 에 대 한 식 수에 buprenorphine와 쥐를 취급 또는 비슷한 진통 프로토콜을 적용. 3 일 후, 쥐 회복 되며 불편 없이.
- 다음 주에는 쥐 및 가능한 부작용의 매일에 평가 되어야 한다. thoracotomy에서 상처의 치유 받아야 한다 특별 한 주의 첫 번째 주 동안 감염의 어떤 표시 든 지 나는 cicatrices의 부족을 검출 하기 위하여. 쥐 털이 억 센 털, 장애인된 이동성, 호흡 문제, 그리고 체중 감소를 포함 하 여 번 창 하는 실패의 흔적을 표시, 경우 그들은 밀접 하 게 모니터링 하 고 만약 그들이 그들의 체중의 20% 이상을 잃거나 fulminant 개발 안락사 호흡기 부족입니다.
6. 가짜 수술
- 위장 수술의 모든 클립 (4 단계)의 응용 프로그램을 제외 하 고 위의 단계를 따라 수행 합니다.
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Representative Results
우리의 그룹12,13에서 이전 연구에서 설명된 PTB 절차를 사용 하 여, 우리 RV 비 (가벼운 PTB)에 의해 유도 된 클립 1.0 m m, 0.6 m m 클립으로 밴딩에 의해 RV 실패 (중간 PTB)의 중간 정도와 심각한 정도 밴딩 0.5 m m 클립으로 밴딩에 의해 RV 실패 (심한 PTB)의 간 경화 및 복수 (그림 5E)를 포함 한 RV 실패의 심각한 구간 개발된 여분 심장 발현에 들어서는 쥐. 모든 쥐 PTB 후 7 주를 평가 했다 고 가짜 쥐만 클립의 신청 없이 동일한 절차를 받았다. 수술 사망률 보다 1에서 6 이었다입니다. 7 주 생존 율 쥐 심한 밴딩 하 고 쥐 가벼운 또는 온건 밴딩 또는 가짜 수술에에서 100% 복종에 대 한 80% 이었다.
PTB 절차의 효과의 평가, 심장 자기 공명 영상 (MRI) RV 볼륨 평가 및 심장 산출 심장 초음파를 사용 했습니다. Tricuspid 환상 평면 수축 여행 (TAPSE)는 꼭대기 4 상공 회의소 보기에서 RV 수축과 tricuspid 환상 비행기의 거리가 측정 되었다. 호흡 밖에 3 주기의 평균 대표 값으로 사용 되었다. RV 끝 확장기 양 (EDV) 및 끝 심장 수축 양 (ESV) 그려서 평가 했다 각 쥐 MRI에 의해 얻은 RV 및 RV 방출 분 율 (EF) EF로 계산을 통해 짧은 축 이미지의 시리즈에서 endocardium = (EDV-ESV) / EDV. 심장 출력 폐 밸브와 위상 대조 MRI 시퀀스를 사용 하 여 클립 사이 측정 했다. 디지털 녹음 RV 압력의 안락사 전에 RV에 설치 된 마이크로 팁 카 테 테 르에 의해 얻은 했다. 방법의 자세한 내용은 되었습니다12위에서 설명한. 버스 비는 쥐의 크기에 대 한 수정 하는 경골의 길이 나눈 RV의 무게와 좌 심 실 (LV) 플러스 심장의 무게에 의해 분할 RV 무게의 비율으로 평가 되었습니다. 앞에서 설명한12모든 방법은 적용 했다.
1 주일에 높은 RV 압력 및 RV 부전 분명 심장 출력 감소 TAPSE에 의해 운영된 쥐 사기에 비해 PTB 쥐에서 개발 했다. 따라서, 중재 또는 약리 치료 시작할 수 있습니다 이미이 시간 포인트에서 하나 설립된 RV 실패에 대 한 효과 조사 하는 것을 목표로 하는 경우. 추가 6 주 후, RV 압력은 더욱 증가 했다. 중간 대 심각한 RV 실패 표현 형의 차이 더욱 밴딩 (그림 2 및 그림 3)의 심각도 증가 심장 출력에 TAPSE stepwise 감소 표시 발음 했다. 자세한 hemodynamic PTB 가벼운 쥐와 차이 PTB 심한 쥐 수술 후 4 주 우리의 그룹 previousely15에 의해 출판 되었습니다.
PTB 절차 또한 운영된 쥐 사기에 비해 온건한 PTB 쥐 및 온건한 PTB와 가짜에 비해 심한 PTB 쥐 RV EDV에 RV ESV 증가 의해 RV 팽창 분명 발생 합니다. RV EF stepwise 감소는 또한 본된 (그림 4).
Rv가 비의 개발 클립에 의해 적용 되는 압력의 크기에 관련 되었다. 쥐 쥐 심각한 0.5 m m 클립 줄무늬에 온건한 0.6 m m 클립 줄무늬에 1.0 m m의 클립으로 가벼운 띠와 쥐에서 stepwise 증가 LV 플러스 심장 체중 RV의 비율. 유사한 결과 쥐의 크기에 대 한 경골의 길이 함께 나누어 수정 RV 무게에 대 한 보였다. 비 대도 운영된 쥐 사기에 비해 PTB 쥐에서 단면적 크로스 cardiomyocyte 증가로 보였다. cardiomyocytes의 비 대, 떨어져 압력 과부하 또한 RV 섬유 증을 포함 한 RV 실패와 관련 된 RV의 다른 형태학 상 변화를 유도 한다. 심한 banding을 복종 하는 쥐에 decompensated RV 실패 유도 했다. 이 형 간 어두운 변색으로 본 간 혼잡 등 뒤로 실패의 특징 이었다. 간 혼잡 ascites (그림 5) 일반적으로 함께 했다.
그림 2: 1 주 및 수술 후 7 주 PTB의 효과. (A) 오른쪽 심 실 (RV) 수축 기 혈압 (B) 심장 출력 및 (C) tricuspid 환상 평면 수축 일탈 (TAPSE) 가짜 또는 온건 또는 각각 심한 밴딩 PTB 작업 후 1 주를 측정 (D, E 및 F) 같은 절차와 RV 실패12의 추가 개발 후 7 주를 측정합니다. 데이터 제시 ± SEM. 단방향 ANOVA 포스트 hoc Bonferroni 분석을 의미 합니다. * * p < 0.01, * * * p < 0.001, 그리고 * * * p < 0.0001 PTB vs 가짜와 PTB 심각한 vs PTB 온건. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 심장 초음파에 의해 평가 PTB 절차의 효과. (A) A 대표 4 상공 회의소 보기 및 속도 시간 적분 (VTI) 폐 간선 (위 패널)와 tricuspid 환상 평면 수축 여행 (TAPSE) (하단 패널)에서 운영 하는 가짜 쥐 (B) 측정. 적당 한 구간에 들어서는 PTB 쥐 비슷한 이미지 (C , D) 모든 이미지는 가짜 작업 또는 밴딩 후 7 주입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4: PTB 쥐의 자기 공명 영상. 심장 자기 공명 영상 (MRI) PTB와 가짜 쥐 운영. (A) 대표 4 챔버 이미지 (위 패널) 및 짧은 축 조회 (하단 패널)의 가짜 쥐 (왼쪽)과 RV 실패 (오른쪽)의 적당 한 정도 가진 PTB 쥐. PTB 쥐에서 RV 고압 심장 불 룩 한 (파란색 별표) 발생합니다. (B)는 PTB 유도 절차 RV 팽창도 분명 RV 끝 확장기 볼륨 (EDV)와 RV 끝 심장 수축 양 (ESV)의 증가 의해 (C) RV 방출 분수 (EF)12감소. 데이터 표시 평균 ± SEM. 단방향 ANOVA Bonferroni 분석 특별 게시 . * p < 0.05 * * p < 0.01, 그리고 * * * p < 0.0001 PTB vs 가짜와 PTB 심각한 vs PTB 온건. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5: 데이터 해부학 및 조직학. (A) RV LV 플러스 심장 및 (B) RV 중량으로 나눈 값으로 측정 하는 RV 비 나눈 가벼운 RV 비, 온건한 RV 실패, 심각한 RV 실패와 쥐에서 경골 길이 PTB 절차 후 7 주. 조직학 섹션 hematoxyline eosine cardiomyocyte의 측정 물 (C) 대표 이미지 크로스 단면적 및 (D) picrosirius 레드 가짜 쥐 (왼쪽)와 PTB 쥐에서 섬유 증에 대 한 편광된 빛 아래 분석 와 적당 한 RV 실패 (오른쪽). (E) A 건강 한 간 (왼쪽) 고 심한 RV 실패12,13PTB 쥐에서 혼잡 (오른쪽)와 변색된 간. 데이터 제시 ± SEM. 단방향 ANOVA 포스트 hoc Bonferroni 분석을 의미 합니다. * * p < 0.01와 * * * p < 0.0001 PTB vs 가짜, PTB 온건한 vs 가벼운 PTB와 PTB 심각한 vs PTB 온건. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
우리는 접근 가능 하 고 매우 재현 방법 폐 간선 구간 수정된 ligating 클립 내용 폐 트렁크 주위 티타늄 클립을 압축을 사용 하 여 설명 합니다. 조정 하 여 다른 내부 직경을 클립을 압축 하기 위해 내용, RV 비 대 및 실패의 독특한 고기에서는의 외 심장 형상으로 심각한 RV 실패를 포함 하 여 하는 유도 수 있다.
비록 간단 하 고, 프로토콜 몇 가지 중요 한 단계를 포함 합니다. 중요 한 것은, 쥐 그들은 PTB 절차를 받을 때 너무 큰 수 없습니다. 우리의 경험에서는, Wistar 쥐 weanlings 100-120 g 무게 절차를 위해 적당 하다. 큰 쥐에 심각한 밴딩의 응용 급성 RV 실패와 죽음 이어질 수 있습니다. 다른 연구6,7,8,,910,16 는 큰 쥐 (160-260 g) 뿐만 아니라 그들의 각각 bandings (1.27-1.65 m m)의 더 큰 직경에 주로 사용 됩니다.
덜 심각도의 밴딩의 응용 프로그램은 또한 겸손 한 상대 다른 그룹에 의해 보고 된 RV 압력 증가 설명할 수 있습니다. 18 g 밴딩 바늘 (1.27 mm) 70-90 mmHg6,,78,9의 범위에서 수축 기 압력의 RV에 지도 한다. 한 연구6이 RV 섬유 증을 시키거나 심장 출력을 줄일 충분 하지 않았다. 여기, 우리는 RV 약 90 mmHg 적당 한 구간에 대 한 심한 구간에 대 한 110 mmHg의 압력을 보고합니다. 심각한 띠와 우리 간 혼잡 및 ascites12를 포함 하 여 여분 심장 발현으로 보상된 RV 실패의 표현 형을 만들 수 또한 있다. 20 G 바늘 (0.902 mm)를 사용 하 여 결 찰에 의해 폐 간선 구간 간 섬유 증, 육 두 구 같은 간 혼잡 및 ascites Sprague Dawley 쥐16 우리의 연구에 비해 상대적으로 가벼운 긴축에도 불구 하 고 발생 합니다. 이 다른 쥐 긴장 banding에 다르게 응답에 의해 설명 될 수 있습니다. 쥐 긴장 사이 물질 대사17, 아드레날린 색조와 심장 박동18 에 관해서는 상당한 차이가 있다. 같은 쥐 긴장 내 에서도 성장 속도 포함 한 다양 한 특성은 다른 공급 업체19달라질 수 있습니다. 이 항상 취해야 한다 계정으로. 특정 쥐 긴장 사용에 대 한 그것은 따라서 잘 설계 된 파일럿 연구 구간 직경 및 원하는 RV 실패 표현 형을 개발에 필요한 후속 시간 확인 하기 위해 수행 됩니다. 클립 모델 ligating 이전에 사용 하는 기술을20, 반대로 쥐 신생아에 사용 될 하지만 우리는이 경험을가지고 하 고 위의 언급 한 동일한 고려 연구를 시작 하기 전에 적용 됩니다.
PTB 모델에는 몇 가지 제한이 있습니다. 첫째, 폐 트렁크 주위 클립에 의해 매우 근 위 폐색 pulmonic 협 또는 CTEPH 원심 PAH에 본 작은 폐 동맥의 축소 보다는 더 많은 조건을 나타냅니다. 증가 한 afterload에 RV의 적응 obstruction(s)21의 위치에 따라 달라질 수 있습니다. 둘째, 수술 하는 동안 클립의 응용 프로그램 PAH에 폐 혈관 저항에 RV afterload 다른 점진적 증가에 매우 갑자기 증가 발생합니다. 그러나 절차는,, 성장 동물의 몸 무게를 기준으로 점진적으로 증가 RV afterload을 야 기한 쥐 weanlings (100-120 g)에서 수행 됩니다. 수술 후 7 주 기간 동안 쥐의 몸 무게 증가 약 대금 하 고 따라서 상대 RV afterload 증가 비례 진보적인 질병 개발6을 유도 합니다.
폐 트렁크의 밴딩에 대 한 수정된 ligating 클립 내용 및 티타늄 클립을 사용 하 여, 우리 RV 실패를 일으킬 수 있었다. 방법 높은 재현성 및 밴딩 클립의 직경을 조정 하 여 보상된 RV 실패 다른 질병 심각도 가벼운 RV 비에서 만들기의 가능성을 포함 하 여 여러 가지 장점이 있습니다. 직경 0.1 m m로 뚜렷한 RV 실패 고기 온건한에서 배열에 결과 변화와 RV 방법 banding이 폐 트렁크의 정확도 입증 심각 하 고 보상 RV 실패에 실패를 보상.
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Disclosures
저자 공개할 게 없다
Acknowledgments
이 작품은 독립적인 연구 [11e108410] [12e04-R90-A3852 및 12e04-R90-A3907], 덴마크 심장 재단, Novo Nordisk 재단 [NNF16OC0023244] 덴마크어 위원회에 의해 지원 되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17 G IV Venflon Cannula | Becton Dickinson, US | 393228 | Distal 2 mm of the needle have been cut off |
| 1 mL syringe + 26 G needle | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 absorbable multifilament suture | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, violet, 5x18" |
| 4-0 multifilament ligature | Covidien, US | LL-221 | Polysorb, violet, 98" |
| Buprenorphine | Indivior UK Limited | Local procurement, Temgesic 0.3 mg/mL | |
| Carprofene | ScanVet, DK | 27693 | Norodyl 50 mg/mL |
| Chlorhexidine | Faaborg Pharma, DK | Local procurement | |
| Contractor | Aesculap, Germany | BV010R | Blunt, self retaining, 70 mm |
| Ear Hooklet | Lawton, Germany | 66-0261 | Small, 14 cm, tip modified to an angle of 85° |
| Eye gel | Decra, UK | Lubrithal, Local procurement | |
| Forceps, Delicate Tissue | Lawton, Germany | 09-0020 | |
| Forceps, Dissecting | Lawton, Germany | 09-0013 | 1 regular, 1 with tip modified to an angle of 100° |
| Gas Anesthesia System | Penlon Limited, UK | SD0217SL | Sigma Delta Vaporizer |
| Hair trimmer | Oster | 76998-320-051 | |
| Horizon Open Ligating Clip Applier | Teleflex, US | 137085 | Modified with adjustable stop mechanism |
| Horizon Titanium Clips | Teleflex, US | 001200 | Small |
| Induction chamber | N/A | ||
| Iris Scissor | Lawton, Germany | 05-1450 | |
| Iris Scissor | Aesculap, Germany | BC060R | |
| Mechanical ventilator | Ugo Basile, Italy | 7025 | |
| Microscissor | Lawton, Germany | 63-1406 | |
| Microscope | Carl Zeiss, Germany | 303294-9903 | |
| Needle Holder | Lawton, Germany | 08-0011 | TITEGRIP |
| Pean | Lawton, Germany | 06-0100 | Halsted-Mosquito, straight |
| Pro-Optha | Lohmann & Rauscher, Germany | 16515 | Tampon |
| Saline 9 mg/mL | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, US | Sevorane, Local procurement | |
| Surgical hook | Lawton, Germany | 51-0665 | Cushing, 19 cm, tip modified to an angle of 90° |
| Surgical Tape | 3M, US | 1530-0 | Micropore |
| Temperature Controller | CMA Microdialysis; Sweden | 8003760 | CMA 450 |
| Weighing machine | VWR, US | ||
| Wistar rat weanlings | Janvier Labs, France | RjHan:WI, 100-120 g |
References
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